本文關(guān)鍵詞：祛濕化瘀方對脂肪肝大鼠肝臟基因表達譜的調(diào)節(jié)作用

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【摘要】：目的觀察祛濕化瘀方對高脂飲食誘導(dǎo)脂肪肝大鼠肝臟基因表達譜的干預(yù)作用及其作用機制。方法20只SD雄性大鼠采用單純高脂飲食(88%普通飼料+2%膽固醇+10%豬油)制備脂肪肝大鼠模型。造模4周后按隨機數(shù)字表法分為祛濕化瘀方組(10只)和模型組(10只),繼續(xù)造模同時分別給予祛濕化瘀方湯劑(0.93 g生藥/100 g體重)和蒸餾水灌胃,每日1次。同時設(shè)10只SD雄性大鼠為正常組,給予等量蒸餾水灌胃,各組均于8周末取材。采用生化法檢測肝組織甘油三酯(triglyceride,TG)、游離脂肪酸(free fatty acid,FFA)含量及血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(aspartate aminotransferase,AST)活性;采用HE及油紅染色觀察肝臟組織的病理變化;采用Affymetrix基因芯片檢測肝組織基因表達,比較祛濕化瘀方組與模型組差異表達基因、分析差異基因的功能以及涉及的信號通路;并選取祛濕化瘀方組與模型組間10個差異倍數(shù)大于2的涉及糖脂代謝的差異基因進行RT-PCR驗證。結(jié)果(1)與正常組比較,模型組大鼠肝組織TG、FFA含量和血清ALT、AST活性均明顯升高(P0.01);與模型組比較,祛濕化瘀方組大鼠TG、FFA含量和ALT、AST活性均明顯降低(P0.05,P0.01)。祛濕化瘀方能降低高脂飲食誘導(dǎo)的大鼠脂肪肝模型的肝細(xì)胞脂肪變性程度,減少炎癥,改善肝組織病理。(2)祛濕化瘀方組與模型組比較,P0.05且差異倍數(shù)大于2的功能明確、有指定基因名稱的差異基因共80個,其中上調(diào)基因44個,下調(diào)基因36個。80個差異基因涉及27條差異有統(tǒng)計學(xué)意義的信號通路(包括甘油酯類代謝、通路脂肪細(xì)胞信號通路、胰島素信號通路及藥物代謝信號通路等,P0.05)。(3)對甘油激酶(Gk)、硬脂酰CoA去飽和酶-1(Scd1)、甘油-3-磷酸轉(zhuǎn)移酶(Gpat2)、葡萄糖-6-磷酸酶(G6pc)、Irs1等10個調(diào)節(jié)糖脂代謝基因的RT-PCR驗證實驗結(jié)果顯示:所有基因RT-PCR與基因芯片結(jié)果上調(diào)或下調(diào)趨勢完全一致,80%基因差異倍數(shù)非常接近。結(jié)論祛濕化瘀方可調(diào)節(jié)高脂飲食誘導(dǎo)的脂肪肝大鼠脂肪代謝、糖類代謝、抗脂質(zhì)過氧化及藥物代謝等相關(guān)基因表達,表現(xiàn)出中藥復(fù)方的綜合藥理作用。
【作者單位】： 上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬曙光醫(yī)院肝病研究所;上海市中醫(yī)臨床重點實驗室;教育部肝腎疾病病證實驗室;上海高校中醫(yī)內(nèi)科學(xué)E-研究院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金面上項目(No.81374031,No.81173404) 上海市自然科學(xué)基金項目(No.13ZR1442600)
【分類號】：R285.5
【正文快照】： 非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)是遺傳一環(huán)境一代謝應(yīng)激相關(guān)性肝病,患病率逐年升高,已成為一種公共健康威脅[1]。因NAFLD是一種復(fù)雜的、系統(tǒng)性的代謝性疾病,很難針對某一靶點設(shè)計出理想的治療藥物,所以現(xiàn)代醫(yī)學(xué)仍缺乏理想治療藥物。目前臨床運

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