本文關(guān)鍵詞：微綠球藻藻油提取工藝及富油培養(yǎng)條件的優(yōu)化，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：以微綠球藻(Nannochloropsis sp.)為實(shí)驗(yàn)材料，采用新式的平板光生物反應(yīng)器對(duì)微綠球藻進(jìn)行培養(yǎng)，并對(duì)藻油提取方法及富集油脂的培養(yǎng)條件進(jìn)行了優(yōu)化研究，分別比較了不同提取劑、細(xì)胞破壁方法、提取時(shí)間、提取溫度對(duì)藻油提取率的影響以及不同光照強(qiáng)度、溫度、鹽度、光徑、氮濃度等培養(yǎng)條件下的最高細(xì)胞密度、生長(zhǎng)速率及生物產(chǎn)量的差異；采收不同培養(yǎng)條件下穩(wěn)定期的培養(yǎng)液，測(cè)定藻細(xì)胞內(nèi)多糖、蛋白質(zhì)、色素及粗脂的含量；并設(shè)計(jì)正交實(shí)驗(yàn)，對(duì)富集藻油的培養(yǎng)條件進(jìn)行了優(yōu)化。 研究結(jié)果表明，不同提取劑、破壁方法、提取時(shí)間、提取溫度對(duì)藻油提取率均有不同程度的影響。其中提取劑的影響最大，其次是提取溫度、提取時(shí)間、破壁方法。本實(shí)驗(yàn)所得的微綠球藻藻油提取的最佳條件為：工業(yè)酒精作為提取劑、反復(fù)凍融法破碎細(xì)胞壁、提取時(shí)間2h、提取溫度65℃，在此條件下，微綠球藻的藻油提取率為34.62%。本實(shí)驗(yàn)的方法可用于高密度微藻的粗脂提取，為海藻油的工業(yè)化大量生產(chǎn)提供理論參考。 不同的培養(yǎng)條件對(duì)微綠球藻的生長(zhǎng)有不同程度的影響。光照強(qiáng)度對(duì)微綠球藻生長(zhǎng)的的影響極顯著(p0.01)，在試驗(yàn)所設(shè)置的光強(qiáng)范圍內(nèi)，比生長(zhǎng)速率、最高細(xì)胞密度和生物產(chǎn)量均隨光照強(qiáng)度的增強(qiáng)先增大后減小，在20000lx時(shí)達(dá)到最高后又下降，說(shuō)明20000lx左右的強(qiáng)光可以明顯促進(jìn)微綠球藻的生長(zhǎng)，培養(yǎng)時(shí)在一定范圍內(nèi)提供強(qiáng)光可增大細(xì)胞密度，提高產(chǎn)量。溫度對(duì)微綠球藻的生長(zhǎng)也有顯著影響（p0.05），其在實(shí)驗(yàn)所設(shè)置的溫度范圍內(nèi)均能正常生長(zhǎng)，比生長(zhǎng)速率、最高細(xì)胞密度和生物產(chǎn)量均在30℃時(shí)達(dá)到最高，隨后隨著溫度的升高而下降。溫度過(guò)高過(guò)低都不利于藻細(xì)胞的生長(zhǎng)，最適溫度為28-32℃。鹽度對(duì)微綠球藻的生長(zhǎng)有顯著影響（p0.05），微綠球藻在10‰-30‰的鹽度范圍內(nèi)均能正常生長(zhǎng)，比生長(zhǎng)速率、最高細(xì)胞密度和生物產(chǎn)量均隨鹽度的增大而增大，在鹽度達(dá)到40‰后，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢，細(xì)胞密度低，各指標(biāo)均急劇下降。氮濃度對(duì)微綠球藻生長(zhǎng)的影響極顯著（p0.01），比生長(zhǎng)速率隨氮濃度的增大而增大，在2.35mmol/L時(shí)達(dá)到最高，最高細(xì)胞密度和生物產(chǎn)量隨氮濃度的增大而增大，在1.18mmol/L時(shí)達(dá)到最高值，從產(chǎn)量的角度看，最適的氮濃度為1.18mmol/L。光生物反應(yīng)器的光徑對(duì)微綠球藻生長(zhǎng)的影響極顯著（p0.01），比生長(zhǎng)速率、最高細(xì)胞密度和單位體積產(chǎn)量均隨光徑的增大而減小，單位面積產(chǎn)量隨光徑的增大而增大。在實(shí)驗(yàn)所設(shè)置的光徑范圍內(nèi)，最適光徑為5cm。 在不同的培養(yǎng)條件下，微綠球藻細(xì)胞內(nèi)的有機(jī)物質(zhì)含量不同。在不同光照強(qiáng)度條件下，隨著光照強(qiáng)度的增強(qiáng)，粗脂含量與多糖先升高后下降，在2000lx時(shí)達(dá)到最高，可溶性蛋白和類胡蘿卜素的含量先升高后下降，在5000lx時(shí)達(dá)到最高，葉綠素含量隨光照強(qiáng)度的增大而下降；不同溫度條件下，隨著溫度的升高，粗脂和葉綠素含量呈下降趨勢(shì)，類胡蘿卜素呈上升趨勢(shì)，可溶性蛋白先升高后下降，28℃時(shí)達(dá)到最高，多糖含量先下降后上升，20℃和32℃時(shí)含量最高；在不同鹽度條件下，隨著鹽度的增大，粗脂、葉綠素和類胡蘿卜素的含量呈上升趨勢(shì)，可溶性蛋白含量先上升后下降，在30‰時(shí)達(dá)到最高，多糖含量先升高后下降，在20‰時(shí)達(dá)到最高，但10‰和20‰組差異不顯著；不同氮濃度條件下，隨著氮濃度的升高，粗脂含量和可溶性蛋白呈下降趨勢(shì)，多糖和葉綠素含量與之相反，呈上升趨勢(shì)，類胡蘿卜素含量先升高后下降，在2.35mmol/L時(shí)達(dá)到最高值；在不同的光徑條件下，粗脂、可溶性蛋白和多糖的含量隨光徑的增大而降低，葉綠素和類胡蘿卜素含量隨光徑增大而增大，類胡蘿卜素含量增大趨勢(shì)比葉綠素更明顯。 在各因素中，光照強(qiáng)度對(duì)粗脂含量的影響最大，其次是溫度、氮濃度和光徑。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，選用光徑5cm的光生物反應(yīng)器，在光照強(qiáng)度5000lx，溫度24℃的條件下缺氮培養(yǎng)，在此條件下培養(yǎng)微綠球藻，所得的粗脂含量為46.72%，為實(shí)驗(yàn)所得的最高值。本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果可以為微綠球藻富油培養(yǎng)的實(shí)際應(yīng)用提供一定的參考。
【關(guān)鍵詞】：微綠球藻 光照強(qiáng)度 溫度 鹽度 光徑 氮濃度
【學(xué)位授予單位】：魯東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：TE667
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-12
• 第一章 前言12-14
• 1.1 研究背景12
• 1.2 研究目的12
• 1.3 本章小結(jié)12-14
• 第二章 文獻(xiàn)綜述14-19
• 2.1 微綠球藻的生物學(xué)特性14-16
• 2.1.1 微綠球藻的形態(tài)特征及繁殖方式14
• 2.1.2 微綠球藻生長(zhǎng)的生態(tài)條件14-15
• 2.1.3 營(yíng)養(yǎng)因子對(duì)微綠球藻生長(zhǎng)的影響15-16
• 2.2 微綠球藻的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值研究現(xiàn)狀16-17
• 2.3 微綠球藻的應(yīng)用價(jià)值研究現(xiàn)狀17
• 2.4 展望17-19
• 第三章 微綠球藻藻油提取工藝的優(yōu)化19-25
• 3.1 材料與方法19-20
• 3.2 結(jié)果與分析20-25
• 3.2.1 藻油提取單因素實(shí)驗(yàn)20-23
• 3.2.2 藻油提取正交實(shí)驗(yàn)23-25
• 第四章 不同培養(yǎng)條件對(duì)微綠球藻細(xì)胞生長(zhǎng)的影響25-37
• 4.1 實(shí)驗(yàn)材料25-26
• 4.2 實(shí)驗(yàn)方法26-27
• 4.2.1 微綠球藻細(xì)胞培養(yǎng)26-27
• 4.2.2 微綠球藻細(xì)胞生物量測(cè)定27
• 4.2.3 微綠球藻細(xì)胞干重標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制27
• 4.3 結(jié)果與分析27-37
• 4.3.1 微綠球藻細(xì)胞干重與 OD660 關(guān)系曲線27-28
• 4.3.2 光照強(qiáng)度對(duì)微綠球藻生長(zhǎng)的影響28-29
• 4.3.3 溫度對(duì)微綠球藻生長(zhǎng)的影響29-31
• 4.3.4 鹽度對(duì)微綠球藻生長(zhǎng)的影響31-33
• 4.3.5 氮濃度對(duì)微綠球藻生長(zhǎng)的影響33-34
• 4.3.6 光生物反應(yīng)器的光徑對(duì)微綠球藻生長(zhǎng)的影響34-37
• 第五章 不同培養(yǎng)條件對(duì)微綠球藻營(yíng)養(yǎng)成分的影響37-53
• 5.1 材料與方法37-42
• 5.1.1 實(shí)驗(yàn)材料37
• 5.1.2 微綠球藻細(xì)胞中可溶性蛋白含量的測(cè)定37-39
• 5.1.3 微綠球藻細(xì)胞中多糖含量的測(cè)定39-40
• 5.1.4 微綠球藻細(xì)胞中藻油含量的測(cè)定40-41
• 5.1.5 微綠球藻細(xì)胞中色素含量的測(cè)定41-42
• 5.2 結(jié)果與分析42-53
• 5.2.1 不同培養(yǎng)條件對(duì)微綠球藻細(xì)胞中藻油含量的影響42-45
• 5.2.2 不同培養(yǎng)條件對(duì)微綠球藻細(xì)胞中可溶性蛋白、多糖含量的影響45-48
• 5.2.3 不同培養(yǎng)條件對(duì)微綠球藻細(xì)胞中色素含量的影響48-53
• 第六章 微綠球藻富集油脂的培養(yǎng)條件優(yōu)化53-55
• 6.1 實(shí)驗(yàn)材料53
• 6.2 實(shí)驗(yàn)方法53-54
• 6.3 結(jié)果與分析54-55
• 第七章 結(jié)論55-57
• 參考文獻(xiàn)57-63
• 致謝63-64
• 附錄64-65
• 攻讀碩士學(xué)位期間取得的科研成果65

【參考文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：微綠球藻藻油提取工藝及富油培養(yǎng)條件的優(yōu)化，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：406060