本文關鍵詞：姬松茸多糖的提取、純化和結構分析，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】： 本論文對姬松茸子實體多糖進行了系統(tǒng)的提取、純化研究，并對所得一個大分子量單組分進行了一些理化性質(zhì)研究和結構分析。 1、提取時，先進行了一些單因素試驗，然后對確定出的料水比、浸提溫度、浸提時間三個因素進行了正交試驗，得出了水提時的最佳工藝條件，而經(jīng)生產(chǎn)經(jīng)濟核算，最終確定料水比：1:30；浸提溫度：120℃；浸提時間：3h，該條件下，多糖得率為8.12％。 另外實驗發(fā)現(xiàn)微波預處理8～12分鐘可使提取率從8.12％提高到約9.15％；提取次數(shù)以兩次較經(jīng)濟，兩次累計提取率可達93.10％；醇沉工藝優(yōu)化條件為3倍體積95％乙醇沉淀6h。 按上述最佳提取工藝條件進行提取，實際多糖得率為9.12％。 2、純化時，系統(tǒng)地進行了脫蛋白研究。采用了Sevag法、酶法結合Sevag法、三氯乙酸法、1萬分子截留量膜超濾、陰陽離子交換樹脂法脫蛋白。 用弱堿性陰離子和弱酸性陽離子交換樹脂一次串聯(lián)進行粗多糖脫蛋白，效果十分理想。該法條件溫和、有部分脫色效果、易工業(yè)化，蛋白脫除率達92.36％，多糖回收率為82.85％，經(jīng)1萬截留分子量透析膜透析，冷凍干燥后所得姬松茸多糖精粉為淡黃色粉末，其多糖含量達89.27％，蛋白質(zhì)含量為4.55％。 3、對所得姬松茸多糖精粉進行了多種凝膠柱層析，先用Sephadex G-200葡聚糖凝膠層析分離成大分子量多糖部分和小分子量多糖部分，然后對大分子量多糖部分進行Sephacryl S-400凝膠層析，分離得到一個分子量超過200萬且含有少量蛋白(1.5％)的多糖組分，經(jīng)凝膠HPLC純度鑒定為均一性物質(zhì)，命名組分A.B.M.F-VHMW，該組分含量占多糖精粉的28.96％；對小分子量多糖部分進行Sephadex G-100葡聚糖凝膠柱層析，結果表明主要有三個組分，經(jīng)凝膠HPLC標準分子量對照分析，三個組分分子量分別為7.2萬、4.8萬和1.3萬；相對含量比例為：38.2％:16.1％:45.7％。 4、對所得單組分A.B.M.F-VHMW進行了一些理化性質(zhì)和結構分析。單組分A.B.M.F-VHMW為白色粉末狀固體，可溶于水，不溶于乙醇、乙醚、丙酮等有機溶劑，其比旋光度為[α]_D~(25)=+62.5°。凝膠HPLC(HPGPC)分析其分子量 大于200萬。經(jīng)2.omol幾HZSO;完全水解后HPLC分析，確定由單一葡萄糖組成。 紅外光譜(IR)、‘H和’3c核磁共振譜(NMR)分析確定其糖鏈結構主要為a- (1~6)毗喃型D一葡聚糖，，是含有1.5%蛋白的蛋白聚糖。 本研究的特色和創(chuàng)新之處主要表現(xiàn)在以下幾點: 1、獨創(chuàng)性地將微波處理與加壓水提工藝結合起來，大大提高了多糖提取得 率。 2、在純化時，首次采用弱堿性陰離子和弱酸性陽離子交換樹脂串聯(lián)進行脫 蛋白處理，各方面效果均較理想。 3、對所得姬松茸多糖精粉進行了S叩hadexo一200、s即hacryls一400和 SePhadexG一100凝膠柱層析，對其中一個大于200萬分子量組分A.B.M.F一vHMw 進行了收集和凍干，并進行了一些理化性質(zhì)和結構分析，結果表明組分 A.B.M一VHMW的糖鏈結構主要為a一(l~6)毗喃型D一葡聚糖，并含有1 .5% 蛋白的蛋白聚糖，參考國內(nèi)外文獻均未見報道。
【關鍵詞】：姬松茸 多糖 提取 純化 結構分析
【學位授予單位】：浙江工業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2003
【分類號】：TQ28
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 第一章 文獻綜述9-30
• 引言9
• 1.1 多糖的生物活性9-11
• 1.1.1 抗腫瘤活性10
• 1.1.2 抗病毒活性10
• 1.1.3 抗衰老活性10-11
• 1.2 多糖的分離純化和結構分析概述11-13
• 1.2.1 多糖的分離純化11-12
• 1.2.2 多糖鏈的結構研究12-13
• 1.3 多糖的結構和活性的關系13-18
• 1.4 多糖的結構修飾18-20
• 1.5 真菌多糖類產(chǎn)品開發(fā)現(xiàn)狀20-21
• 1.6 目前多糖研究中存在的問題21-22
• 1.7 姬松茸多糖及其研究進展22-28
• 1.7.1 姬松茸簡介及國內(nèi)外研究概況22-28
• 1.7.1.1 姬松茸及姬松茸多糖簡介22-25
• 1.7.1.2 姬松茸多糖國內(nèi)外研究概況25-28
• 1.8 本項目的研究意義及研究內(nèi)容28-30
• 1.8.1 研究意義28-29
• 1.8.2 主要研究內(nèi)容29-30
• 第二章 姬松茸多糖的提取研究30-42
• 引言30
• 2.1 材料與方法30-33
• 2.1.1 原料、試劑材料及儀器30-31
• 2.1.2 實驗方法31-33
• 2.2 結果與討論33-41
• 2.2.1 子實體粉碎目數(shù)的研究33-34
• 2.2.2 熱水浸提工藝的確定34-38
• 2.2.3 預處理方法的研究38
• 2.2.4 濾渣復提次數(shù)的確定38-39
• 2.2.5 醇沉工藝的確定39-40
• 2.2.6 按所定提取工藝的得率及所得粗粉的分析結果40-41
• 2.3 本章小結41-42
• 第三章 姬松茸多糖的純化研究42-59
• 前言42-43
• 3.1 材料與方法43-48
• 3.1.1 原料、試劑材料及儀器43-44
• 3.1.2 實驗方法44-48
• 3.2 結果與討論48-58
• 3.2.1 Sevag法脫蛋白48-50
• 3.2.2 Sevag法結合酶法脫蛋白50-51
• 3.2.3 三氯乙酸脫蛋白51-52
• 3.2.4 超濾在姬松茸多糖純化中的應用52
• 3.2.5 離子交換樹脂脫蛋白52-55
• 3.2.6 凝膠柱層析分離純化結果55-58
• 3.3 本章小結58-59
• 第四章 姬松茸多糖的結構研究59-72
• 前言59-60
• 4.1 材料與方法60-64
• 4.1.1 原料、試劑材料及儀器60
• 4.1.2 實驗方法60-64
• 4.2 結果與討論64-71
• 4.2.1 單組分A.B.M.F-VHMW的旋光度測定64
• 4.2.2 單組分A.B.M.F-VHMW的分子量測定64-65
• 4.2.3 單組分A.B.M.F-VHMW組成單糖測定65-67
• 4.2.4 單組分A.B.M.F-VHMW的紅外光譜67
• 4.2.5 單組分A.B.M.F-VHMW的核磁共振譜67-71
• 4.3 本章小結71-72
• 結論與展望72-75
• 參考文獻75-80
• 致謝80-81

【引證文獻】

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  本文關鍵詞：姬松茸多糖的提取、純化和結構分析，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：343817