大豆異黃酮提取分離技術及檢測方法研究
本文關鍵詞:大豆異黃酮提取分離技術及檢測方法研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】: 大豆異黃酮具有抗氧化、抗癌、類雌激素及抗雌激素、預防心血管疾病、改善婦女更年期綜合癥等多種生物活性和藥理活性,而且其不同單體組分的活性不同,在保健食品和醫(yī)藥等領域具有極大的應用價值。 論文針對目前大豆異黃酮浸提得率較低的缺陷,比較了不同方法浸提大豆異黃酮的效果。正交試驗結果表明,采用70%乙醇、料液比為1:6、于50℃條件下浸提5h,大豆異黃酮得率為4.07mg/g;采用50%乙醇、料液比為1:8、70℃、超聲(25kHz,160W)浸提1h,大豆異黃酮得率為4.23mg/g,較之第一種方法提高了3.93%;采用50%乙醇、料液比為1:8、70℃、超聲(25kHz,160W)加攪拌(300 r/min)浸提1h,大豆異黃酮得率為4.36mg/g,較之前兩種方法分別提高了7.13%和3.07%。三種浸提方法對大豆異黃酮的抗氧化活性均無顯著的影響。 論文研究了大豆異黃酮的不同純化方法。結果顯示,等體積的乙酸乙酯于25℃條件下,經(jīng)三次萃取可使大豆異黃酮含量由2.74%提高到31.61%,,收率為31.1%;采用LSA-8型大孔吸附樹脂、以70%乙醇溶液洗脫、流速為1.0BV/h、于25℃條件下洗脫,可使大豆異黃酮含量由11.9%提高到57.0%;當原液濃度為20.0mg/ml、溶液溫度為40℃、離心(6×10~3r/min)40min,可使大豆異黃酮含量由原來的40.9%提高到71.2%,收率為32.3%。研究結果表明,不同含量的大豆異黃酮制品需采用不同的純化方法。 論文比較了三種不同柱層析法對大豆異黃酮主要單體分離效果的影響。結果顯示,采用300~400目硅膠、洗脫體系為氯仿—甲醇(5:1,V/V)、流速為1.0BV/h,可以使染料木苷、大豆苷、染料木黃酮和大豆苷元四種主要單體 組分得到分離;采用聚酞胺柱層析法,流速為1.OBV/h,用20%甲醇作為洗脫 液可以分離出以大豆普為主要成分的大豆異黃酮(含量達90.3%),再用40% 甲醇洗脫可以分離出以染料木昔為主要成分的大豆異黃酮(含量達92.0%); 采用LH一20葡聚糖凝膠柱,以90%甲醇作為洗脫劑、流速為2.OBV/h,可以將 染料木昔和大豆普分離出來,其含量分別達到95.7%和95.1%。 論文系統(tǒng)研究了大豆異黃酮的定性和定量檢測方法。特征顯色反應、熒光 反應、雙向紙層析法和薄層層析法均可鑒定大豆異黃酮及其不同單體組分。紫 外全波長掃描結果顯示,染料木昔、大豆普和染料木黃酮的最大吸收為26Onm 左右,大豆普元為248nm左右;加入移動試劑后,可以明顯區(qū)分出該四種單 體組分。薄層層析洗脫法、紫外分光光度法和高效液相色譜法均可用于檢測大 豆異黃酮及其主要單體組分的含量。其中,高效液相色譜法檢測大豆異黃酮中 的染料木營、大豆營、染料木黃酮及大豆普元含量的準確度、精密度和靈敏度 最高。 論文根據(jù)大豆異黃酮的物理和化學特性,比較了不同方法對大豆異黃酮的 提取效果,確定了含量不同的大豆異黃酮制品的純化途徑,探索了大豆異黃酮 不同單體組分的分離技術,建立了大豆異黃酮及其主要單體組分的定性和定量 檢測方法,闡述了大豆異黃酮分子結構與其功能的關系。研究結果為大豆異黃 酮的合理有效利用提供了有價值的參考依據(jù),具有一定的理論意義和較大的實 際應用價值。
【關鍵詞】:大豆異黃酮 提取 純化 分離 檢測
【學位授予單位】:四川大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2003
【分類號】:TQ28
【目錄】:
- 第一部分 前言9-25
- 1.1 大豆異黃酮的研究概況9-21
- 1.1.1 大豆異黃酮的結構9-11
- 1.1.2 大豆異黃酮的性質11-20
- 1.1.3 大豆異黃酮生物合成途徑及代謝20-21
- 1.2 大豆異黃酮的應用21-23
- 1.2.1 保健食品21-22
- 1.2.2 藥品22-23
- 1.2.3 飼料添加劑23
- 1.3 論文研究的意義23
- 1.4 論文研究的指導思想和主要研究內容23-25
- 第二部分 大豆異黃酮浸提方法研究25-40
- 2.1 引言25-26
- 2.2 材料與方法26-28
- 2.2.1 原料與試劑26
- 2.2.2 儀器與設備26
- 2.2.3 實驗方法26-28
- 2.3 結果與討論28-39
- 2.3.1 常規(guī)浸提法28-32
- 2.3.2 攪拌浸提法32-34
- 2.3.3 超聲輔助浸提法34-38
- 2.3.4 浸提物的抗氧化活性38-39
- 2.4 結論39-40
- 第三部分 大豆異黃酮的純化方法研究40-57
- 3.1 引言40
- 3.2 材料與方法40-43
- 3.2.1 原料與試劑40-41
- 3.2.2 儀器與設備41
- 3.2.3 實驗方法41-43
- 3.3 結果與討論43-56
- 3.3.1 萃取法43-45
- 3.3.2 吸附法45-52
- 3.3.3 離心法52-56
- 3.4 結論56-57
- 第四部分 大豆異黃酮單體的分離方法研究57-68
- 4.1 引言57
- 4.2 材料與方法57-59
- 4.2.1 原料與試劑57-58
- 4.2.2 儀器與設備58
- 4.2.3 實驗方法58-59
- 4.3 結果與討論59-66
- 4.3.1 硅膠柱層析法59-62
- 4.3.2 聚酰胺柱層析法62-65
- 4.3.3 葡聚糖凝膠柱層析法65-66
- 4.4 結論66-68
- 第五部分 大豆異黃酮的檢測方法研究68-90
- 5.1 引言68-69
- 5.2 材料與方法69-72
- 5.2.1 原料與試劑69-70
- 5.2.2 儀器與設備70
- 5.2.3 實驗方法70-72
- 5.3 結果與討論72-88
- 5.3.1 特征顯色與熒光反應72-73
- 5.3.2 平面色譜法鑒定大豆異黃酮73-76
- 5.3.3 紫外分光光度法鑒定大豆異黃酮76-79
- 5.3.4 高效液相色譜法鑒定大豆異黃酮79-81
- 5.3.5 薄層色譜法檢測大豆異黃酮含量81-82
- 5.3.6 紫外分光光度法檢測大豆異黃酮含量82-85
- 5.3.7 高效液相色譜法檢測大豆異黃酮含量85-88
- 5.4 結論88-90
- 第六部分 主要結論90-93
- 參考文獻93-103
- 在讀研究生期間發(fā)表的研究論文103-104
- 聲明104-105
- 致謝105
【引證文獻】
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本文關鍵詞:大豆異黃酮提取分離技術及檢測方法研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號:272447
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