本文關鍵詞：黑木耳多糖分離純化及其對大豆分離蛋白糖基化的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：本研究以黑木耳(Auricularia auricular)為試驗原料,采用亞臨界水萃取法提取黑木耳多糖,通過響應面法優(yōu)化提取工藝條件,并分析三氯乙酸法、酶解法、sevage法和AB-8樹脂法等脫除黑木耳多糖中蛋白質(zhì)的效果,得到脫蛋白的最佳工藝條件,在此基礎上,利用黑木耳多糖和大豆分離蛋白進行復合,優(yōu)化糖基化反應條件,并初步探討了黑木耳多糖-大豆分離蛋白復合物的功能特性,為黑木耳多糖的綜合利用及工業(yè)化生產(chǎn)提供理論依據(jù)。主要研究結果如下：1.根據(jù)Box-Behnken試驗設計原理,在單因素的試驗基礎上采用響應面分析法優(yōu)化工藝條件,得到亞臨界水萃取法提取木耳多糖的最佳工藝條件為：提取溫度152.31℃,提取時間26.07 min,料液比130.79：1mL/g,提取壓力1.0 MPa,此時得到的木耳多糖提取率為24.51%。同時,將優(yōu)化的亞臨界水萃取法與傳統(tǒng)的水浸提法、酶提取法、微波和超聲波輔助法進行比較,結果表明黑木耳多糖的提取率較高,提取時間短,并且綠色環(huán)保,適合工業(yè)化生產(chǎn)以及應用在食品藥物中。2.為了得到黑木耳多糖的最佳脫蛋白工藝,用三氯乙酸法、sevage法、酶解法、酶解-sevage法、等電點法、酶解-等電點法和AB-8樹脂等7種方法處理黑木耳多糖,其蛋白脫除率分別為76.85%、72.17%、72.42%、76.48%、50.71%、62.24%和78.37%,其中AB-8樹脂對蛋白質(zhì)的脫除效果最好,通過響應面法對其進行工藝優(yōu)化,結果表明：上樣濃度為2.07mg/n (?)L、吸附時間為2.06h、固液比為1：4.87時蛋白脫除率最高,為81.00%,此時多糖回收率為83.13%；并分析比較了脫除蛋白質(zhì)前后黑木耳多糖的體外抗氧化性,發(fā)現(xiàn)黑木耳多糖脫蛋白后其體外抗氧化活性有所增加,羥基自由基清除率提高32.36%,DPPH清除率最高為脫蛋白前的1.12倍,而還原能力為脫蛋白前的1.89倍。3.采用Box-Behnken模型優(yōu)化黑木耳多糖-大豆蛋白復合物的制備工藝,優(yōu)化后的工藝參數(shù)為：料液比40：1(m:V)、pH 9.21、溫度92.88℃、糖與蛋白質(zhì)量比4.18：1。并分析比較了黑木耳多糖-大豆蛋白復合物和普通大豆蛋白的功能特性,結果表明黑木耳多糖-大豆蛋白復合物的乳化活性、乳化穩(wěn)定性增加,與大豆蛋白相比分別增加10.75倍和6.15倍,同時黑木耳多糖-大豆蛋白復合物的溶解度在pH 2-10范圍內(nèi)溶解度顯著高于大豆蛋白,且熱穩(wěn)定性提高了9.24倍。黑木耳多糖與大豆蛋白復合后顯著改善了蛋白質(zhì)的功能特性,為黑木耳多糖廣泛的工業(yè)化應用奠定了理論基礎。
【關鍵詞】：黑木耳 多糖 亞臨界水 脫蛋白 糖基化
【學位授予單位】：東北林業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：TS219;TQ281
【目錄】：

• 摘要3-4
• Abstract4-9
• 1 緒論9-15
• 1.1 黑木耳多糖的簡介9-10
• 1.1.1 多糖簡介9
• 1.1.2 黑木耳多糖的生理功能9-10
• 1.2 多糖提取純化方法的研究進展10-13
• 1.2.1 傳統(tǒng)提取方法10-12
• 1.2.2 亞臨界水萃取法12
• 1.2.3 多糖脫蛋白方法的研究進展12-13
• 1.3 蛋白質(zhì)糖基化研究進展13-14
• 1.4 本研究的目的意義14-15
• 2 黑木耳多糖的亞臨界水萃取工藝研究15-25
• 2.1 材料與方法15-16
• 2.1.1 試驗原料15
• 2.1.2 試驗試劑15
• 2.1.3 試驗儀器15
• 2.1.4 黑木耳多糖的提取工藝流程15
• 2.1.5 多糖含量的測定15
• 2.1.6 多糖提取率的計算15-16
• 2.1.7 單因素試驗16
• 2.1.8 響應面分析試驗16
• 2.2 結果與分析16-23
• 2.2.1 葡萄糖標準曲線的建立16-17
• 2.2.2 液料比對多糖提取率的影響17-18
• 2.2.3 溫度對多糖提取率的影響18
• 2.2.4 時間對多糖提取率的影響18-19
• 2.2.5 壓力對多糖提取率的影響19-20
• 2.2.6 響應面試驗結果與分析20-22
• 2.2.7 亞臨界水萃取法與不同提取方法對比試驗22-23
• 2.3 討論23-24
• 2.4 本章小結24-25
• 3 黑木耳多糖脫蛋白工藝的優(yōu)化25-40
• 3.1 材料與方法25-27
• 3.1.1 試驗原料25
• 3.1.2 黑木耳多糖的提取25
• 3.1.3 多糖含量的測定25
• 3.1.4 蛋白質(zhì)含量的測定25
• 3.1.5 多糖中蛋白質(zhì)脫除方法25-26
• 3.1.6 多糖回收率及蛋白質(zhì)脫除率的計算26
• 3.1.7 最佳方法的工藝優(yōu)化26-27
• 3.1.8 體外抗氧化研究27
• 3.2 結果與分析27-38
• 3.2.1 黑木耳多糖除蛋白工藝的篩選27-32
• 3.2.2 AB-8樹脂脫蛋白工藝的優(yōu)化32-37
• 3.2.3 黑木耳多糖脫蛋白對體外抗氧化性的影響37-38
• 3.3 討論38-39
• 3.4 本章小結39-40
• 4 黑木耳多糖-大豆蛋白復合物的制備及其功能特性研究40-56
• 4.1 材料與方法40-42
• 4.1.1 試驗原料40
• 4.1.2 黑木耳多糖的提取40
• 4.1.3 多糖含量的測定40
• 4.1.4 游離氨基酸含量量的測定40-41
• 4.1.5 單因素試驗41
• 4.1.6 響應面分析試驗41
• 4.1.7 乳化性和乳化穩(wěn)定性的測定41-42
• 4.1.8 溶解性的測定42
• 4.1.9 熱穩(wěn)定性的測定42
• 4.2 結果與分析42-54
• 4.2.1 甘氨酸標準曲線的建立42-43
• 4.2.2 pH對氨基酸結合率及乳化活性的影響43-44
• 4.2.3 溫度對氨基酸結合率及乳化活性的影響44-46
• 4.2.4 糖與蛋白質(zhì)量比對氨基酸結合率及乳化活性的影響46-47
• 4.2.5 料液比對氨基酸結合率及乳化活性的影響47-48
• 4.2.6 響應面試驗結果與分析48-51
• 4.2.7 黑木耳多糖-大豆蛋白復合物的功能特性分析51-54
• 4.3 討論54-55
• 4.4 本章小結55-56
• 結論56-57
• 參考文獻57-63
• 攻讀學位期間發(fā)表的學術論文63-64
• 致謝64-65

【參考文獻】

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本文編號：269805