本文關(guān)鍵詞：酸性多糖甲基化分析方法的改進(jìn)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

萬方數(shù)據(jù) 萬方數(shù)據(jù) 酸性多糖甲基化分析方法的改進(jìn) 摘 要 酸性多糖中羧基和硫酸根等酸性基團(tuán)的存在，影響了其在甲基化溶劑中的溶 解，致使甲基化程度往往較低，且糖醛酸中羧基的存在導(dǎo)致酸性多糖不易氣化和 水解，，限制了其應(yīng)用氣相-質(zhì)譜連用（GC - MS ）進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析，制約了甲基化方 法在酸性多糖中的應(yīng)用。本文對(duì)甲基化分析過程中出現(xiàn)的酸性多糖不易在甲基化 試劑中溶解和硫酸根位置不易確定等問題進(jìn)行了研究，以含有糖醛酸和硫酸根的 酸性多糖標(biāo)準(zhǔn)品硫酸軟骨素（CS ）為原料，對(duì)含有糖醛酸的酸性多糖還原的條 件進(jìn)行優(yōu)化，確定最佳的糖醛酸還原條件；對(duì)含有硫酸根的酸性多糖的脫硫方法 和其在甲基化試劑中的溶解性等問題進(jìn)行了探討，對(duì)比研究確定最佳的酸性多糖 甲基化條件，為酸性多糖的結(jié)構(gòu)分析奠定基礎(chǔ)。 首先以 CS 為研究對(duì)象，對(duì)糖醛酸羧基還原的方法進(jìn)行改良。比較了鈉型 和氫型 CS 樣品分別在不同緩沖液體系、控制pH 值的條件下，還原率的高低。 結(jié)果顯示，氫型 CS 在改良后的75% 四氫呋喃 - 0.1 mol/L 2 - 嗎啉乙磺酸（THF - MES ）的緩沖液中，pH 4.75 和 50 ℃ 的條件下，采用碳二亞胺-硼氫化鈉（EDC - NaBH ）法還原，糖醛酸還原率高達(dá)98% 以上，明顯高于鈉型。比較了不同檢 4 測方法測定糖醛酸還原率的優(yōu)劣，結(jié)果顯示高效液相色譜（HPLC ）法快捷方便， 結(jié)果準(zhǔn)確，是一種理想的糖醛酸還原率檢測方法。將該方法應(yīng)用于不同結(jié)構(gòu)的酸 性多糖糖醛酸還原中，表明該方法具有普適性，不僅適用于 CS 類，同樣適應(yīng) 于透明質(zhì)酸 （Hyaluronic Acid ）和肝素 （Heparin ）中糖醛酸還原，也適用于海洋 來源的聚甘露糖醛酸（Polymannuronic Acid ）及褐藻糖膠（Fucoidan ）中糖醛酸 的還原，為

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