海洋生物污損是全球范圍內(nèi)的普遍現(xiàn)象,現(xiàn)行的抗污損毒性化合物,已經(jīng)對(duì)海洋環(huán)境和人類(lèi)健康造成嚴(yán)重危害。天然無(wú)毒的抗污損化合物的開(kāi)發(fā)是解決這一環(huán)境難題的主要途徑。海洋自身特殊的生態(tài)環(huán)境,使得生活其中的微生物代謝產(chǎn)物與陸源微生物不同,化合物結(jié)構(gòu)獨(dú)特,生物活性多樣。海綿由于其獨(dú)特的化學(xué)防御機(jī)制,其共附生微生物的多樣性高,可產(chǎn)生具有顯著抗污損活性的次生代謝產(chǎn)物,成為抗污損活性天然產(chǎn)物的重要潛在來(lái)源。本文從美國(guó)華盛頓州圣璜島海域的8種海綿樣品分離的120株共附生微生物中,篩選出了11株細(xì)菌,其粗提物能有效抑制硅藻附著。對(duì)其中兩株活性菌株No.683和No.333進(jìn)行了菌種鑒定和發(fā)酵條件優(yōu)化,并對(duì)菌株No.683的活性產(chǎn)物進(jìn)行分離鑒定,為尋找抑制硅藻附著的活性海綿共附生微生物提供依據(jù)。本文的主要研究結(jié)果如下：1.采用顯微計(jì)數(shù)法對(duì)120株海綿共附生微生物進(jìn)行了抗硅藻附著活性的篩選,結(jié)果顯示,11株菌有較好的活性,占總測(cè)試菌株的9.2%。在測(cè)試濃度為100μg/mL時(shí),對(duì)5種測(cè)試硅藻的抑制率均大于90.0%。在所有活性菌株中,菌株No.683的效果最好,平均抑制率高達(dá)98.0%；No.333次之,平均抑制... 

【文章來(lái)源】：揚(yáng)州大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】：83 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
目錄
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 研究背景
        1.1.1 海洋生物污損概述
        1.1.2 污損防治方法
    1.2 天然抗污損化合物研究
        1.2.1 天然抗污損化合物來(lái)源
            1.2.1.1 來(lái)源于海洋和陸地的植物的抗污損活性物質(zhì)
            1.2.1.2 來(lái)源于海洋無(wú)脊椎動(dòng)物的抗污損活性物質(zhì)
            1.2.1.3 來(lái)源于海洋微生物的抗污損活性物質(zhì)
        1.2.2 海洋微生物中獲得的天然抗污損化合物的種類(lèi)
            1.2.2.1 脂肪酸類(lèi)
            1.2.2.2 異丁烯內(nèi)酯類(lèi)
            1.2.2.3 環(huán)二肽類(lèi)
            1.2.2.4 二羥基苯酸大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)
    1.3 海綿共附生微生物防污損研究現(xiàn)狀
        1.3.1 海綿的抗污損化合物概況
        1.3.2 海綿的抗污損化合物主要來(lái)源
        1.3.3 海綿共附生微生物的特點(diǎn)
    1.4 海洋天然抗污損活性化合物研究技術(shù)與方法
        1.4.1 抗硅藻附著天然活性產(chǎn)物研究
            1.4.1.1 抗硅藻附著天然活性產(chǎn)物的研究意義
            1.4.1.2 抗硅藻附著天然活性產(chǎn)物的篩選方法
                1.4.1.2.1 平板計(jì)數(shù)法
                1.4.1.2.2 抗硅藻附著圈指示法
                1.4.1.2.3 顯微計(jì)數(shù)法
        1.4.2 活性產(chǎn)物提取分離技術(shù)與方法
        1.4.3 活性產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)鑒定技術(shù)與方法
    1.5 論文的設(shè)計(jì)思路及研究目的
第二章 海綿共附生微生物抗硅藻附著活性菌株的篩選和鑒定
    2.1 材料
        2.1.1 供試菌株
        2.1.2 測(cè)試硅藻
        2.1.3 培養(yǎng)基
        2.1.4 主要儀器
        2.1.5 主要試劑及常用溶液
    2.2 方法
        2.2.1 菌株發(fā)酵及粗提物的獲取
        2.2.2 硅藻培養(yǎng)
        2.2.3 抗硅藻附著活性的篩選
        2.2.4 活性菌株的鑒定
            2.2.4.1 形態(tài)學(xué)特征
            2.2.4.2 菌株的掃描電鏡分析
            2.2.4.3 菌株16S rDNA序列測(cè)定
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 抗硅藻附著活性菌株篩選結(jié)果
        2.3.2 抗硅藻附著活性菌株的鑒定
            2.3.2.1 No.683菌種鑒定
                2.3.2.1.1 菌株No.683形態(tài)學(xué)特征和掃描電鏡觀察
                2.3.2.1.2 菌株No.683 16S rDNA序列測(cè)定結(jié)果
            2.3.2.2 No.333菌種鑒定
                2.3.2.2.1 菌株No.333形態(tài)學(xué)特征和掃描電鏡觀察
                2.3.2.2.2 菌株No.333 16S rDNA序列測(cè)定結(jié)果
            2.3.2.3 No.683和No.333相似度對(duì)比
    2.4 本章小結(jié)
第三章 活性菌株發(fā)酵條件的優(yōu)化
    3.1 材料
    3.2 方法
        3.2.1 發(fā)酵提取物的獲取
        3.2.2 抗硅藻附著活性的測(cè)定
        3.2.3 活性菌株發(fā)酵條件優(yōu)化的正交試驗(yàn)設(shè)置
            3.2.3.1 正交試驗(yàn)設(shè)置
            3.2.3.2 粗提物產(chǎn)量和抗硅藻附著活性測(cè)定
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 菌株No.683發(fā)酵條件優(yōu)化的正交試驗(yàn)結(jié)果分析
            3.3.1.1 菌株No.683培養(yǎng)基組分和發(fā)酵條件的正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)結(jié)果分析
            3.3.1.2 菌株No.683粗提物產(chǎn)量和抗硅藻附著活性測(cè)定結(jié)果分析
        3.3.2 菌株No.333發(fā)酵條件優(yōu)化的正交試驗(yàn)結(jié)果分析
            3.3.2.1 菌株No.333培養(yǎng)基組分和發(fā)酵條件的正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)結(jié)果分析
            3.3.2.2 正交試驗(yàn)粗提物產(chǎn)量結(jié)果分析和最優(yōu)發(fā)酵條件確定
    3.4 本章小結(jié)
第四章 菌株No.683抗硅藻附著活性產(chǎn)物的分離鑒定
    4.1 材料
        4.1.1 供試菌株及硅藻
        4.1.2 培養(yǎng)基
        4.1.3 主要儀器
        4.1.4 主要試劑
    4.2 方法
        4.2.1 菌株No.683的批量發(fā)酵及發(fā)酵產(chǎn)物的提取
        4.2.2 菌株No.683發(fā)酵產(chǎn)物的分離純化
            4.2.2.1 粗提物的初步分離
            4.2.2.2 活性物質(zhì)的柱層析分離
                4.2.2.2.1 薄層層析
                4.2.2.2.2 硅膠柱分離
                4.2.2.2.3 反相減壓柱分離
            4.2.2.3 半制備HPLC型液相
        4.2.3 菌株發(fā)酵產(chǎn)物分離片段的抑制硅藻附著活性測(cè)試
        4.2.4 活性成分的鑒定
            4.2.4.1 HPLC分析
            4.2.4.2 核磁共振分析
            4.2.4.3 GC-MS分析
            4.2.4.4 脂肪酸分析
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 菌株No.683的批量發(fā)酵及發(fā)酵產(chǎn)物的提取
        4.3.2 菌株No.683發(fā)酵產(chǎn)物的分離純化
            4.3.2.1 粗提物的初步分離
            4.3.2.2 活性物質(zhì)的柱層析分離
                4.3.2.2.1 薄層層析
                4.3.2.2.2 硅膠柱分離
                4.3.2.2.3 反相減壓柱分離
            4.3.2.3 HPLC分析
            4.3.2.4 半制備HPLC型液相
        4.3.3 活性成分的鑒定
            4.3.3.1 核磁共振分析
            4.3.3.2 GC-MS分析
            4.3.3.3 脂肪酸分析
    4.4 本章小結(jié)
第五章 總結(jié)
    5.1 結(jié)論
    5.2 討論
    5.3 展望
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄


【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
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本文編號(hào)：3519384