近海石油開采和石油泄漏事故導(dǎo)致大量的石油烴排放至海洋環(huán)境中,對(duì)海洋生態(tài)系統(tǒng)產(chǎn)生了長(zhǎng)期和短期的損害,綜合評(píng)估海洋石油污染的生物毒性效應(yīng)是十分必要的。由于石油烴的水溶組分是潛在的毒性成分,本文通過室內(nèi)模擬石油烴污染暴露試驗(yàn)測(cè)定船用120#燃料油分散液和乳化液對(duì)模式生物海膽的慢性毒性效應(yīng),從分子水平研究石油烴對(duì)生物體的毒性機(jī)制,為海上石油烴污染風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估提供依據(jù)。首先運(yùn)用高效液相色譜技術(shù)檢測(cè)不同暴露天數(shù)、不同濃度石油烴暴露下海膽全基因組DNA甲基化水平,結(jié)果表明：隨著污染暴露時(shí)間的增長(zhǎng),分散液試驗(yàn)組和乳化液試驗(yàn)組均導(dǎo)致DNA過低甲基化現(xiàn)象,而且乳化液試驗(yàn)組導(dǎo)致更低水平的DNA甲基化。其次運(yùn)用單鏈構(gòu)象多態(tài)性分子標(biāo)記技術(shù)（PCR-SSCP）和DNA基因測(cè)序技術(shù)研究120#燃料油分散液和乳化液污染暴露后對(duì)控制海膽腸道發(fā)育的SP-Lox基因和參與海膽細(xì)胞分化增殖的SP-Runt基因的影響,結(jié)果表明SP-Lox基因未出現(xiàn)基因突變,SP-Runt基因在乳化液試驗(yàn)組暴露21天后出現(xiàn)基因突變,基因測(cè)序后顯示其編碼區(qū)第986位堿基T突變成堿基C,氨基酸由纈氨酸變成丙氨酸。最后對(duì)比120#燃料油分散液和乳化液對(duì)馬... 

【文章來源】：大連海事大學(xué)遼寧省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第1章 緒論
    1.1 研究背景
        1.1.1 石油污染海洋現(xiàn)狀
        1.1.2 石油污染海洋中遷移轉(zhuǎn)化
        1.1.3 石油污染對(duì)海洋生態(tài)環(huán)境的影響
    1.2 研究現(xiàn)狀
        1.2.1 海洋石油污染的毒理學(xué)研究進(jìn)展
        1.2.2 化學(xué)分散劑的應(yīng)用及影響
        1.2.3 消油劑的毒性效應(yīng)研究進(jìn)展
        1.2.4 海洋生物DNA甲基化水平檢測(cè)方法研究
        1.2.5 海洋生物基因突變檢測(cè)方法研究
    1.3 研究目的、內(nèi)容、意義、技術(shù)路線
        1.3.1 研究目的
        1.3.2 研究?jī)?nèi)容
        1.3.3 研究意義
        1.3.4 技術(shù)路線
第2章 試驗(yàn)材料、試驗(yàn)油品、試驗(yàn)方案的設(shè)置
    2.1 試驗(yàn)材料
        2.1.1 試驗(yàn)油品的選擇
        2.1.2 試驗(yàn)所用消油劑的選擇
        2.1.3 試驗(yàn)受試生物的選擇
    2.2 試驗(yàn)儀器及藥品
        2.2.1 試驗(yàn)儀器
        2.2.2 試驗(yàn)藥品
    2.3 試驗(yàn)油品的制備
        2.3.1 試驗(yàn)油品濃度的測(cè)定
        2.3.2 消油劑的投放比例與油品濃度的關(guān)系
        2.3.3 試驗(yàn)油品方案的確定
    2.4 試驗(yàn)方案
        2.4.1 受試生物的培養(yǎng)
        2.4.2 污染暴露慢性毒性試驗(yàn)
        2.4.3 海膽DNA的提取步驟
第3章 消油劑處理石油烴對(duì)海膽DNA甲基化水平的檢測(cè)分析
    3.1 DNA甲基化檢測(cè)原理
    3.2 DNA甲基化檢測(cè)方法
        3.2.1 DNA樣品前處理
        3.2.2 高效液相色譜條件優(yōu)化及操作方法
        3.2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
    3.3 試驗(yàn)結(jié)果與分析
        3.3.1 120#燃料油分散液試驗(yàn)結(jié)果與分析
        3.3.2 120#燃料油乳化液試驗(yàn)結(jié)果與分析
        3.3.3 120#燃料油分散液與乳化液試驗(yàn)結(jié)果對(duì)比
    3.4 討論與結(jié)論
第4章 消油劑處理石油烴對(duì)海膽基因突變的檢測(cè)分析
    4.1 PCR—SSCP技術(shù)檢測(cè)原理
    4.2 目標(biāo)基因的選擇
    4.3 基因序列引物篩選
    4.4 聚丙烯酰胺凝膠（PAGE）電泳
    4.5 試驗(yàn)結(jié)果與分析
        4.5.1 基因組DNA的檢測(cè)
        4.5.2 PCR引物擴(kuò)增的檢測(cè)
        4.5.3 PCR-SSCP的檢測(cè)
        4.5.4 多態(tài)性的測(cè)序檢測(cè)
        4.5.5 海膽基因突變率分析
    4.6 討論與結(jié)論
第5章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介



本文編號(hào)：2925049