【摘要】：我國棕囊藻赤潮的頻發(fā),會生成有害泡沫物質(zhì),消耗水中溶解氧,釋放藻毒素,嚴(yán)重破壞海洋生態(tài)系統(tǒng),危害人類健康。課題組前期已從珠海發(fā)生棕囊藻赤潮水體中分離得到一株能夠抑制球形棕囊藻生長的芽孢桿菌B1,已鑒定出分泌的活性物質(zhì)為咪唑丙烯酸、N-乙酰組胺、L-組氨酸。本論文在此基礎(chǔ)上,進(jìn)一步對這些純抑藻物質(zhì)在單一和聯(lián)合脅迫下,對球形棕囊藻的抑藻效應(yīng)、藻細(xì)胞的抗氧化系統(tǒng)及抑藻過程中細(xì)胞形貌和內(nèi)部結(jié)構(gòu)變化進(jìn)行研究,并對球形棕囊藻抑藻前后藻細(xì)胞的溶血毒素活性、藻毒素組分的變化進(jìn)行了測定。主要研究結(jié)果如下:(1)以96 h EC_(50)為指標(biāo),三種化合物的抑藻效應(yīng)強(qiáng)弱的順序為:咪唑丙烯酸(8μg/mL)N乙酰組胺(16μg/mL)L-組氨酸(23μg/mL)。以AI值為判斷依據(jù),二元混合物咪唑丙烯酸+N-乙酰組胺對球形棕囊藻的具體聯(lián)合作用方式為協(xié)同作用,而咪唑丙烯酸+L-組氨酸,N-乙酰組胺+L-組氨酸表現(xiàn)為拮抗作用。(2)對抗氧化系統(tǒng)研究表明,二元混合物N-乙酰組胺與+咪唑丙烯酸更有利于提高藻細(xì)胞的MDA含量、SOD和CAT活性水平,說明其藻細(xì)胞膜脂過氧化,膜系統(tǒng)和抗氧化系統(tǒng)被破壞。(3)FESEM和TEM觀察結(jié)果表明含氮化合物會對藻細(xì)胞形貌和內(nèi)部結(jié)構(gòu)產(chǎn)生影響,而不同含氮化合物作用于藻細(xì)胞的位點有所區(qū)別。N-乙酰組胺主要是通過影響細(xì)胞膜滲透性造成質(zhì)壁分離,而咪唑丙烯酸直接破壞藻細(xì)胞內(nèi)部的葉綠體和細(xì)胞核。聯(lián)合處理進(jìn)一步證明了N-乙酰組胺與咪唑丙烯酸對球形棕囊藻的抑制存在協(xié)同作用。(4)對抑藻過程中球形棕囊藻毒素溶血活性變化研究表明:含氮化合物投加濃度為EC_(50)(單一)和1:1 EC_(50)(聯(lián)合)時,抑藻至第5 d時,咪唑丙烯酸、N-乙酰組胺單一處理組及其聯(lián)合處理組的溶血百分?jǐn)?shù)相比對照組下降了37.6%,52.5%和67.5%。表明咪唑丙烯酸+N-乙酰組胺對棕囊藻細(xì)胞胞內(nèi)毒素溶血活性影響較大。(5)通過HPLC和GC-MS對含氮化合物抑藻后棕囊藻的毒素檢測,HPLC檢測結(jié)果表明對照組和處理組藻毒素組分不變(均為8個),但N-乙酰組胺和尿刊酸聯(lián)合脅迫下則可以同時抑制組分4和組分1的合成,GC-MS檢測結(jié)果則表明N-乙酰組胺+咪唑丙烯酸可抑制C_(17)H_(32)O_2和C_(19)H_(34)O_2兩種組分的合成。表明咪唑丙烯酸+N-乙酰組胺能使棕囊藻合成脂肪酸的能力下降,從而降低毒性。
【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：X55
【圖文】：

圖 2.1 制備人工海水的裝置圖Fig 2.1 The experiment setup of synthetic seawater表 2.1 改良的 f/2 藻種培養(yǎng)基配方Table 2.1 Modified f/2 algae culture medium formula 組分原液濃度 培養(yǎng)基中濃度NO375.0 g·L-1dH2O 8.83 x 10-4MSiO3· 9H2O 30.0 g·L-1dH2O 1.07 x 10-4MH2PO4· H2O 5.0 g·L-1dH2O 3.63 x 10-5MEDTA · 2H2O - 1 x 10-5Ml3· 6H2O - 1 x 10-5MSO4· 5H2O 9.8 g·L-1dH2O 4 x 10-8MSO4· 7H2O 22.0 g·L-1dH2O 8 x 10-8MCl2· 6H2O 10.0 g·L-1dH2O 5 x 10-8M

暨南大學(xué)碩士學(xué)位論文海水養(yǎng)殖專用鹽（廣東省鹽業(yè)集團(tuán)多品種鹽有限公司）；丙酮 （分析純，天津市天新精細(xì)化工有限公司）L-組氨酸 （上海化工新興化工試劑研究所）咪唑丙烯酸 Sigma-aldrichN-乙酰組胺 Sigma-aldrich（2）實驗試劑L-組氨酸母液和工作液咪唑丙烯酸母液和工作液N-乙酰組胺母液和工作液

暨南大學(xué)碩士學(xué)位論文的順序為：咪唑丙烯酸 （8 μg/mL）> N 乙酰組胺 （16 3 μg/mL）。Chen[40]等在驗證抑藻過程中，這三種含氮化序為：咪唑丙烯酸 （2 μg/mL）> N 乙酰組胺 （4 μg/mmL）。因此選擇咪唑丙烯酸和 N 乙酰組胺進(jìn)行后續(xù)研究一抑藻效應(yīng)強(qiáng)弱順序與本課題組文獻(xiàn)報道相應(yīng)的敏感濃丙烯酸比 N-乙酰組胺和 L-組氨酸具有更強(qiáng)的溶藻效應(yīng)，囊藻吸收咪唑丙烯酸比 N 乙酰組胺和 L-組氨酸更快。Z L-賴氨酸對銅綠微囊藻具有更強(qiáng)的抑藻效應(yīng)是由于銅綠 L-賴氨酸更快。

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本文編號：2804987