【摘要】：中國南海是中國的一個邊緣海。它從馬來西亞南海峽延伸到臺灣海峽東北部，占地面積大約350萬平方公里。中國南海有著大量的生物多樣性，包括超過30%世界珊瑚礁，許多寶貴的魚類和數(shù)量龐大的微生物類群。中國南海地區(qū)蘊(yùn)含著豐富的微生物資源，由于其特殊的地理位置和氣候環(huán)境，這些微生物進(jìn)化出獨(dú)特的生理、代謝特征和生態(tài)功能，具有重要的研究價值和廣闊的應(yīng)用前景。本文以采自中國南海的多種樣品進(jìn)行了微生物多樣性分析，對“東方紅2號”南海基金DFH11航次站點(diǎn)表層海水和海底沉積物樣品中的微生物進(jìn)行了群落分布分析及優(yōu)勢菌群的研究，并以分離出的其中兩株深海細(xì)菌為研究對象，利用多相分類學(xué)方法研究分析了兩株菌的細(xì)胞形態(tài)，生長限制因子，生理生化性質(zhì)，分子遺傳學(xué)特征，細(xì)胞脂肪酸分析，主要極性脂組分等的多方面的特征，最終確立了兩株細(xì)菌的分類地位。 1.中國南海樣品可培養(yǎng)細(xì)菌的多樣性分析 本文所分析的樣品為“東方紅2號”南�；餌FH11航次獲取的海底沉積物、沙礫和用濾膜過濾取得的表層海水樣品共12個樣品，結(jié)果顯示，在表層海水樣品中可培養(yǎng)的微生物菌群主要由γ 變形菌（Pseudoalteromonas、Vibrio、Alteromonas、Psychrobacter），α 變形菌（Sphingorhabdus），硬壁菌（Bacillus），放線菌（Kouria、Rhodococcus），擬桿菌（Maribacter、Cellulophage、Flavobacterium、Olleya）組成。海水沉積物樣品中可培養(yǎng)的微生物菌群主要由γ 變形菌（Enterobacteria、Vibrionaceae、 Alteromonas、 Psychrobacter），微球菌（Microcobacteria），硬壁菌（Bacillus），黃桿菌（Flavobacteriaceae），γ 變形菌（Pseudoalteromonas、Psychrobacter、Oceanospirillaceae、Planococcaseae）組成。 2.菌株SM1222T的多相分類學(xué)研究 菌株SM1222T分離于中國南海42號站位2022m沉積物樣品。菌株SM1222T菌落顏色為灰黃色，邊緣光滑呈凸起狀，革蘭氏染色反應(yīng)為陰性，細(xì)胞呈棒狀，有鞭毛。其生長溫度范圍為4 35°C，最適生長溫度為25 30°C；生長鹽度范圍為0.5 8%NaCl(w/v)，最適鹽度為2.0 3.0%NaCl；生長的pH范圍為5.5 10.5，最適生長的pH值為7.5 8。菌株SM1222T能夠還原硝酸鹽為亞硝酸鹽，其細(xì)胞的觸酶和氧化酶反應(yīng)為陽性。該菌株能夠降解利用尿素、檸檬酸鹽和丙酮酸鹽，不能降解利用瓊脂、DNA、 明膠、淀粉、Tween40、Tween60、Tween80和七葉苷。 菌株SM1222T的主要脂肪酸為：summed feature3(C16:1ω7c and/or iso-C15:02-OH)，C16:0，C18:1ω7c，summed feature2(C14:03-OH and/or iso-C16:1I) and C12:0。該菌株的主要呼吸醌為Q 8，主要的極性脂類為：磷脂酰乙醇胺（phosphatidylethanolamine，PE），磷脂酰甘油（phosphatidylglycerol，PG）和雙磷脂酰甘油（diphosphatidylglycerol，DPG）。菌株SM1222T的基因組DNA的G+C含量為51.5mol%。 遺傳學(xué)分析，16S rRNA基因序列分析表明菌株SM1222T與Oceanisphaera ostreaeKCTC23422T具有最高的序列相似性(96.8%)，基于16S rRNA基因序列的遺傳學(xué)進(jìn)化分析構(gòu)建的系統(tǒng)進(jìn)化樹，菌株SM1222T與Oceanisphaera屬聚集成簇，并處于Oceanisphaera屬進(jìn)化分支內(nèi)。 基于以上多相分類學(xué)數(shù)據(jù)，，菌株SM1222T屬于Oceanisphaera屬的一個新種，命名為Oceanisphaera profundasp.nov.，菌株SM1222T（=CCTCC AB2013241T=KCTC32510T）為該新種的模式菌株。 3.菌株SM1341T的多相分類研究 菌株SM1341T分離于中國南海103號站位4300m沉積物樣品。菌株SM1341T菌落顏色為白色，需氧的，革蘭氏染色反應(yīng)為陰性，細(xì)胞呈棒狀，沒有鞭毛。其生長溫度范圍為15 40°C，最適生長溫度為35°C；生長鹽度范圍為0 6%NaCl (w/v)，最適鹽度為3.0%NaCl；生長的pH范圍為5.0 10.0，最適生長的pH值為7.0。菌株SM1341T能夠還原硝酸鹽為亞硝酸鹽，其細(xì)胞的觸酶和氧化酶反應(yīng)為陽性。該菌株能夠降解利用酪蛋白、淀粉、Tween20、Tween40、Tween80、明膠，不能降解利用瓊脂、DNA、Tween60和七葉苷。 菌株SM1341T的主要脂肪酸為C16:0、summed feature2(C14:03-OH and/or iso-C16:1I)、C18:1ω7c、cyclo-C19:0ω7c和C18:1ω7c11-methyl。該菌株的主要呼吸醌為Q 10，主要的極性脂類為：磷脂酰膽堿（phosphatidylcholine，PC）、磷脂酰甘油（phosphatidylglycerol，PG）、雙磷脂酰甘油（diphosphatidylglycerol，DPG）和兩種含氨基的脂類（two aminolipids，AL1-AL2）。 菌株SM1341T的16SrRNA基因序列與Oceanicella actignis DSM22673T(94.37%)和Pleomorphobacterium xiamenense CLWT(94.31%)具有最高的序列相似性。菌株SM1341T的基因組DNA的G+C含量為68.8mol%。 基于以上多相分類學(xué)數(shù)據(jù)，菌株SM1341T應(yīng)代表Oceanicella屬的一個新種，命名為Oceanicella nanhaiensis sp. nov.，菌株SM1341T（=KCTC32512T=CCTCCAB2013360T）為該新種的模式菌株。 該研究對豐富中國南海細(xì)菌多樣性的認(rèn)識和了解，掌握微生物在整個海洋生態(tài)系統(tǒng)中的地位和作用，并且對開展海洋生態(tài)環(huán)境的研究以及開發(fā)海洋微生物資源具有重要的理論意義和應(yīng)用價值。
【學(xué)位授予單位】：聊城大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：Q178.53

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本文編號：2546375