本文關(guān)鍵詞：浮游生物多樣性高效檢測(cè)技術(shù)的建立及其在渤海褐潮研究中的應(yīng)用　出處：《中國(guó)海洋大學(xué)》2014年碩士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 浮游生物 高通量測(cè)序 褐潮 18S rDNA可變區(qū)V9 抑食金球藻 多形微眼藻

【摘要】：浮游生物在水體生態(tài)系統(tǒng)的物質(zhì)循環(huán)、能量流動(dòng)以及信息傳遞等方面起著不容忽視的作用，研究水體中浮游生物多樣性組成結(jié)構(gòu)將有助于對(duì)水域環(huán)境的開(kāi)發(fā)和利用。分子生物學(xué)的發(fā)展為浮游生物多樣性研究提供了新的方法，目前常用的克隆技術(shù)、DGGE和RLFP等技術(shù)，相對(duì)于傳統(tǒng)的顯微觀(guān)察方法具有快速、準(zhǔn)確的特點(diǎn)，然而復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)流程、較高的成本和低的覆蓋度成為這類(lèi)技術(shù)的弊端。下一代測(cè)序技術(shù)以其快速、準(zhǔn)確和通量高的優(yōu)點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于基因組學(xué)和轉(zhuǎn)錄組學(xué)等領(lǐng)域中，為生命科學(xué)的研究提供了許多新的方法。 本研究把高通量測(cè)序技術(shù)應(yīng)用到浮游生物多樣性研究中，開(kāi)發(fā)了一種浮游生物多樣性的高效檢測(cè)技術(shù)：利用通用引物擴(kuò)增可以區(qū)分不同物種的基因marker—18S rDNA可變區(qū)V9后，，進(jìn)行高通量測(cè)序，再對(duì)可操作分類(lèi)單元OTUs(operational taxonomic units)進(jìn)行分類(lèi)，實(shí)現(xiàn)對(duì)環(huán)境樣品中浮游生物多樣性的分析。該技術(shù)具有簡(jiǎn)單、快速、高通量、低成本和高靈敏度等優(yōu)點(diǎn)，為浮游生物的研究提供了新的思路。 渤海的山海關(guān)、撫寧、新開(kāi)口和樂(lè)亭沿海作為重要的海水養(yǎng)殖基地，極大地促進(jìn)了當(dāng)?shù)貪O業(yè)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，然而海水富營(yíng)養(yǎng)化的加重導(dǎo)致了赤潮的頻繁發(fā)生，尤其是2009年以來(lái)出現(xiàn)的褐潮，褐潮藻直徑約2μm，最高濃度可達(dá)109個(gè)/L，由于其能顯著阻止當(dāng)?shù)仞B(yǎng)殖的海灣扇貝的進(jìn)食，對(duì)當(dāng)?shù)氐呢愵?lèi)養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。該褐潮優(yōu)勢(shì)藻個(gè)體微小，形態(tài)特征不明顯，采用顯微觀(guān)察困難且誤差較大，而傳統(tǒng)的分子生物學(xué)技術(shù)存在費(fèi)時(shí)、費(fèi)力、成本較高且生物覆蓋度較窄等缺陷。本次實(shí)驗(yàn)研究選擇了2011年渤海褐潮期四個(gè)站位（山海關(guān)海域、撫寧海域、新開(kāi)口海域和樂(lè)亭海域）的微型浮游生物樣品作為研究對(duì)象，應(yīng)用開(kāi)發(fā)的浮游生物多樣性的檢測(cè)方法，首先對(duì)微型浮游生物的組成結(jié)構(gòu)進(jìn)行了綜合的分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)四站位各含有11~13個(gè)綱235~255種浮游植物和8~12門(mén)35~97種微型浮游生物，浮游生物含量高于傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)觀(guān)察，顯示了本技術(shù)發(fā)明高靈敏度和廣泛的覆蓋范圍。通過(guò)多樣性指數(shù)分析發(fā)現(xiàn)樂(lè)亭海域物種均勻度相對(duì)較好，多樣性最高；新開(kāi)口海域物種豐富度最高；而山海關(guān)海域物種均勻度、豐富度以及多樣性最低。其中浮游植物中甲藻、綠藻和硅藻以及浮游動(dòng)物中纖毛蟲(chóng)、多細(xì)胞生物和絲足蟲(chóng)種類(lèi)較多，浮游生物的群落結(jié)構(gòu)的變化可能由于褐潮期理化及生物因素改變導(dǎo)致，實(shí)驗(yàn)結(jié)果為渤海以及褐潮期的微型浮游生物多樣性研究提供了寶貴的資料。 同時(shí)，我們對(duì)其褐潮的優(yōu)勢(shì)種進(jìn)行了分析，發(fā)現(xiàn)抑食金球藻（Aureococcusanophagefferens）和多形微眼藻（Minutocellus polymorphus）在四個(gè)站位中含量均較高，優(yōu)勢(shì)藻在各個(gè)站位的分布情況不同，抑食金球藻在山海關(guān)海域的含量最高，其次是新開(kāi)口，再次是樂(lè)亭，撫寧含量最低；而多形微眼藻含量由高到低依次是撫寧、樂(lè)亭、山海關(guān)、新開(kāi)口。以上結(jié)果表明，渤海海域的褐潮可能是由這兩種褐潮生物共同形成的。本研究結(jié)果為深入理解褐潮爆發(fā)的機(jī)制奠定了基礎(chǔ)，為褐潮的治理和防治提供了有力的參考。
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)海洋大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：Q178;X55

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 齊雨藻;洪英;呂頌輝;張家平;朱從舉;李雅琴;梁松;;中國(guó)赤潮生物新紀(jì)錄種——海洋褐胞藻[J];暨南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)與醫(yī)學(xué)版);1991年03期

2 李勝男;史小麗;謝薇薇;龔伊;孔繁翔;;長(zhǎng)江中下游湖泊超微型真核藻類(lèi)遺傳多樣性研究[J];環(huán)境科學(xué);2013年09期

本文編號(hào)：1335184