微流控芯片技術(shù)在生化樣品分析中的應(yīng)用研究
發(fā)布時(shí)間:2021-02-14 02:59
微流控芯片實(shí)驗(yàn)室又稱微流控芯片或芯片實(shí)驗(yàn)室,指的是在一塊幾平方厘米的芯片上構(gòu)建的化學(xué)或生物實(shí)驗(yàn)室。它把化學(xué)和生物等領(lǐng)域中所涉及的樣品制備、反應(yīng)、分離、檢測(cè)等基本操作單元集成到一塊很小的芯片上,由微通道形成網(wǎng)絡(luò),以可控流體貫穿整個(gè)系統(tǒng),用以實(shí)現(xiàn)常規(guī)化學(xué)或生物實(shí)驗(yàn)室的各種功能。作為一種分析平臺(tái),微流控芯片實(shí)驗(yàn)室主要以芯片毛細(xì)管電泳的形式開始研究,因其尺寸微小,又將多種操作單元集成在一起,具有響應(yīng)速度快、樣品消耗低、高通量、便于攜帶等優(yōu)勢(shì)。微流控芯片實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用廣泛,已經(jīng)涉及到了環(huán)境監(jiān)測(cè)、食品檢查、藥物篩選,疾病治療等諸多領(lǐng)域,近些年來在分析分離領(lǐng)域越來越受到科研工作者們的重視和青睞。但是,芯片尺寸微小造成進(jìn)樣量小,檢測(cè)光程較短,導(dǎo)致檢測(cè)靈敏度達(dá)不到生物體系中痕量組分的檢測(cè)要求。為了提高儀器的檢測(cè)靈敏度,除了改進(jìn)和完善各類檢測(cè)器外,還可以研究將各種富集技術(shù)與微流控芯片聯(lián)用,進(jìn)一步提高檢測(cè)靈敏度。本文采用微流控芯片電泳(MCE),聯(lián)合激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)器(LIF),結(jié)合在線富集法,探討了微流控芯片電泳在生化分析中的一些應(yīng)用,主要內(nèi)容如下:第一章簡(jiǎn)要介紹微流控芯片電泳的發(fā)展歷史、基本特征、進(jìn)樣方式、...
【文章來源】:華東師范大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:72 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
微流控芯片電泳發(fā)展歷史Fig.1ThephylogenyofMicrochipCapillaryElectrophoresis
圖 1 微流控芯片通道示意圖Fig.1 Schematic diagram of the channel of the microfluidic ch98 %)和 β-CM-7 (98 %)從北京賽百盛基因公司購(gòu)買;Fluorescein isothiocyanate, FITC)(Sigma,98 %);硼砂酶、氫氧化鈉、鹽酸(上海國(guó)藥集團(tuán),AR);實(shí)驗(yàn)中8.25 M 的二次超純水;從當(dāng)?shù)厥袌?chǎng)購(gòu)買實(shí)驗(yàn)中用到。量的 β-CM-5 和 β-CM-7 標(biāo)準(zhǔn)品,二次超純水定容, 母液 (1 mM)由丙酮溶液配制。衍生時(shí)所用緩沖溶。稀釋樣品時(shí)用到的緩沖液是 5 mM 硼砂溶液。運(yùn)砂溶液。使用 1 M 的氫氧化鈉或 1 M 的鹽酸調(diào)節(jié)溶后放到 4℃處進(jìn)行保存。
圖 2 衍生緩沖液 pH、濃度和衍生時(shí)間對(duì)衍生效率的影響Fig.2 A. Effect of the pH of derivatization buffer on the derivatization efficiency. B. Effect of theconcentration of derivatization buffer on the derivatization efficiency. C. Effect of thederivatization time on the derivatization efficiency.3.2 分離緩沖液 pH、濃度的優(yōu)化實(shí)驗(yàn)探索了運(yùn)行緩沖溶液硼砂的 pH 值、濃度對(duì)于 β-CM-5、β-CM-7 和 FITC分離效果的影響。緩沖液的 pH 不僅會(huì)影響芯片通道管壁上基團(tuán)的解離度進(jìn)而改變電滲流,也可以改變樣品的解離能力影響其遷移行為。實(shí)驗(yàn)表明,衍生后的產(chǎn)物及異硫氰酸熒光素在堿性環(huán)境中熒光響應(yīng)較強(qiáng)。所以實(shí)驗(yàn)研究了分離緩沖液的 pH 在 8.6-9.6
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]基于場(chǎng)放大進(jìn)樣富集的微流控芯片-激光誘導(dǎo)熒光法檢測(cè)奶制品中的β-酪啡肽[J]. 張雅婷,張炎,張毅,陳武娟,李儀,王清江,何品剛. 分析試驗(yàn)室. 2018(01)
[2]毛細(xì)管電泳-發(fā)光二極管誘導(dǎo)熒光檢測(cè)法分析肝硬化及正常人血清蛋白質(zhì)的差異[J]. 包日煌,范清杰,宋瓏,姚遠(yuǎn),高衛(wèi)平. 色譜. 2015(02)
[3]毛細(xì)管電泳法測(cè)定水體中四環(huán)素類抗生素的基質(zhì)效應(yīng)及場(chǎng)放大進(jìn)樣技術(shù)的應(yīng)用[J]. 李愛梅,黃茁,盧文平,徐中其. 色譜. 2014(08)
[4]禽致病性大腸桿菌毒力基因多重PCR方法的建立和應(yīng)用[J]. 孟慶美,王少輝,韓先干,韓月,丁鏟,戴建君,于圣青. 微生物學(xué)報(bào). 2014(06)
[5]高效毛細(xì)管電泳同時(shí)分離6種酪啡肽[J]. 王偉,陳蘋蘋. 福州大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2011(04)
[6]毛細(xì)管等電聚焦/加壓毛細(xì)管電色譜二維分離體系在多肽分離中的應(yīng)用[J]. 魏娟,谷雪,王彥,閻超. 分析化學(xué). 2011(02)
[7]基于液芯波導(dǎo)原理的微流控芯片長(zhǎng)光程光度檢測(cè)系統(tǒng)[J]. 杜文斌,方群,方肇倫. 高等學(xué);瘜W(xué)學(xué)報(bào). 2004(04)
本文編號(hào):3033004
【文章來源】:華東師范大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:72 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
微流控芯片電泳發(fā)展歷史Fig.1ThephylogenyofMicrochipCapillaryElectrophoresis
圖 1 微流控芯片通道示意圖Fig.1 Schematic diagram of the channel of the microfluidic ch98 %)和 β-CM-7 (98 %)從北京賽百盛基因公司購(gòu)買;Fluorescein isothiocyanate, FITC)(Sigma,98 %);硼砂酶、氫氧化鈉、鹽酸(上海國(guó)藥集團(tuán),AR);實(shí)驗(yàn)中8.25 M 的二次超純水;從當(dāng)?shù)厥袌?chǎng)購(gòu)買實(shí)驗(yàn)中用到。量的 β-CM-5 和 β-CM-7 標(biāo)準(zhǔn)品,二次超純水定容, 母液 (1 mM)由丙酮溶液配制。衍生時(shí)所用緩沖溶。稀釋樣品時(shí)用到的緩沖液是 5 mM 硼砂溶液。運(yùn)砂溶液。使用 1 M 的氫氧化鈉或 1 M 的鹽酸調(diào)節(jié)溶后放到 4℃處進(jìn)行保存。
圖 2 衍生緩沖液 pH、濃度和衍生時(shí)間對(duì)衍生效率的影響Fig.2 A. Effect of the pH of derivatization buffer on the derivatization efficiency. B. Effect of theconcentration of derivatization buffer on the derivatization efficiency. C. Effect of thederivatization time on the derivatization efficiency.3.2 分離緩沖液 pH、濃度的優(yōu)化實(shí)驗(yàn)探索了運(yùn)行緩沖溶液硼砂的 pH 值、濃度對(duì)于 β-CM-5、β-CM-7 和 FITC分離效果的影響。緩沖液的 pH 不僅會(huì)影響芯片通道管壁上基團(tuán)的解離度進(jìn)而改變電滲流,也可以改變樣品的解離能力影響其遷移行為。實(shí)驗(yàn)表明,衍生后的產(chǎn)物及異硫氰酸熒光素在堿性環(huán)境中熒光響應(yīng)較強(qiáng)。所以實(shí)驗(yàn)研究了分離緩沖液的 pH 在 8.6-9.6
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]基于場(chǎng)放大進(jìn)樣富集的微流控芯片-激光誘導(dǎo)熒光法檢測(cè)奶制品中的β-酪啡肽[J]. 張雅婷,張炎,張毅,陳武娟,李儀,王清江,何品剛. 分析試驗(yàn)室. 2018(01)
[2]毛細(xì)管電泳-發(fā)光二極管誘導(dǎo)熒光檢測(cè)法分析肝硬化及正常人血清蛋白質(zhì)的差異[J]. 包日煌,范清杰,宋瓏,姚遠(yuǎn),高衛(wèi)平. 色譜. 2015(02)
[3]毛細(xì)管電泳法測(cè)定水體中四環(huán)素類抗生素的基質(zhì)效應(yīng)及場(chǎng)放大進(jìn)樣技術(shù)的應(yīng)用[J]. 李愛梅,黃茁,盧文平,徐中其. 色譜. 2014(08)
[4]禽致病性大腸桿菌毒力基因多重PCR方法的建立和應(yīng)用[J]. 孟慶美,王少輝,韓先干,韓月,丁鏟,戴建君,于圣青. 微生物學(xué)報(bào). 2014(06)
[5]高效毛細(xì)管電泳同時(shí)分離6種酪啡肽[J]. 王偉,陳蘋蘋. 福州大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2011(04)
[6]毛細(xì)管等電聚焦/加壓毛細(xì)管電色譜二維分離體系在多肽分離中的應(yīng)用[J]. 魏娟,谷雪,王彥,閻超. 分析化學(xué). 2011(02)
[7]基于液芯波導(dǎo)原理的微流控芯片長(zhǎng)光程光度檢測(cè)系統(tǒng)[J]. 杜文斌,方群,方肇倫. 高等學(xué);瘜W(xué)學(xué)報(bào). 2004(04)
本文編號(hào):3033004
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