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癌癥標志物的微流控芯片聚集誘導(dǎo)發(fā)光檢測新技術(shù)研究

發(fā)布時間:2020-12-25 14:38
  隨著癌癥標志物的不斷發(fā)現(xiàn),其在癌癥的早期篩查、早期診斷、療效監(jiān)測與術(shù)后預(yù)后中得到了廣泛應(yīng)用。目前,無法在同一檢測平臺和方法中實現(xiàn)高通量多標志物聯(lián)合檢測以及自動化快速檢測。鑒于此,本文提出了一種基于微流控芯片的聚集誘導(dǎo)發(fā)光新方法,實現(xiàn)癌癥標志物多重檢測。論文的主要研究結(jié)果如下:1、發(fā)展了基于表面潤濕介導(dǎo)組裝技術(shù)的抗體陣列構(gòu)建方法,實現(xiàn)癌癥多標志物的同時檢測。我們利用聚二甲基硅氧烷(PDMS)與玻片可逆鍵合后殘留在玻片上的PDMS具有疏水性的特點,快速在玻片上構(gòu)建疏水區(qū)域,而親水區(qū)域形成微點陣。將不同癌癥標記物的抗體固定在玻片的親水性點陣區(qū)域內(nèi),之后與待檢測的抗原及辣根過氧化物酶標記的抗體一起孵育。酪氨酸功能化四苯乙烯(TPE-Tyr)分子溶解于水性介質(zhì)中,熒光發(fā)射可忽略不計;添加辣根過氧化物酶和過氧化氫后,由于TPE-Tyr中的酪氨酸部分被辣根過氧化物酶催化氧化偶聯(lián)而發(fā)生有效交聯(lián),從而實現(xiàn)聚集誘導(dǎo)發(fā)光。每塊芯片可以同時進行不同標志物(以9種為例)的檢測或者不同人群的同一標志物分析。在癌胚抗原的單一檢測中,熒光強度與抗原濃度在5ng/mL-100 ng/mL范圍內(nèi)表現(xiàn)出良好的線性關(guān)系,R<... 

【文章來源】:華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:77 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

癌癥標志物的微流控芯片聚集誘導(dǎo)發(fā)光檢測新技術(shù)研究


ACQ及AIE分子在不同濃度水溶液中熒光圖

發(fā)光原理


華 中 科 技 大 學(xué) 碩 士 學(xué) 位 論 文另一個典型的AIEgen是四苯乙烯(TPE),它已經(jīng)被廣泛和深入的研究(圖1],TPE分子的中心(定子)被四個苯基環(huán)(轉(zhuǎn)子)包圍。TPE的稀溶液幾乎。芳香族轉(zhuǎn)子在單鍵軸上相對于烯烴定子的動態(tài)旋轉(zhuǎn)不輻射地分散激子能量發(fā)狀態(tài)時,TPE分子中間的烯雙鍵被打開,生成了2個DPM單元,由于它們在質(zhì)中的旋轉(zhuǎn)或扭轉(zhuǎn)運動而產(chǎn)生的摩擦,將光子能量轉(zhuǎn)換為熱能,導(dǎo)致激子的弛豫。在聚集體形成后,TPE的分子內(nèi)旋轉(zhuǎn)(RIR)受限,這阻礙了分子間π-π互作用。其他螺旋槳形狀的AIEgen(如HPS)的AIE活性都可以歸因于RIR過

方向圖,誘導(dǎo)發(fā)光,方向,酪氨酸


對I-葡萄糖(熒光猝滅劑)的化學(xué)氧化,熒光膠束可用于水溶液中D-葡萄糖的選擇性檢測,檢測限為2.29 μm。圖1-9 聚集誘導(dǎo)發(fā)光材料的應(yīng)用方向。[7]Figure 1-9 Application direction of AIEgens.[7]L-酪氨酸功能化的TPE衍生物已經(jīng)發(fā)展成為一種具有快速響應(yīng)和高特異性的熒光啟動生物傳感系統(tǒng)。由TPE核心和周圍的四個L-酪氨酸單元組成。TPE核作為信號基序,酪氨酸單元賦予探針水溶性和酶偶聯(lián)反應(yīng)。TPE-Tyr分子分散在水溶液中,因此對其苯基和酪氨酸單元的分子內(nèi)運動沒有限制,使其微弱或甚至不發(fā)射。以HRP為催化劑,在H2O2存在下,通過苯酚聚合,可以使分子的酪氨酸單元發(fā)生分子間交聯(lián)。通過這種方式,可以聚合成一個大的交聯(lián)網(wǎng)絡(luò),其中TPE單元通過二吡羅辛鍵連接。由于結(jié)構(gòu)的剛性,交聯(lián)聚集體對TPE單元施加了強烈的約束

【參考文獻】:
期刊論文
[1]聚集誘導(dǎo)發(fā)光超分子聚合物的光物理性能研究[J]. 黃媛媛,高建峰,彭慧晴,吳驪珠,佟振合,陳玉哲,楊清正.  高分子學(xué)報. 2017(01)
[2]聚集誘導(dǎo)發(fā)光——從基礎(chǔ)研究到光電和生物傳感應(yīng)用[J]. 唐本忠.  光學(xué)與光電技術(shù). 2016(03)
[3]Molecular biomarkers for the detection of metastatic colorectal cancer cells[J]. Hidenori Kamiyama,Hiroshi Noda,Fumio Konishi,Toshiki Rikiyama.  World Journal of Gastroenterology. 2014(27)

碩士論文
[1]具有聚集誘導(dǎo)發(fā)光特性的分子自組裝及應(yīng)用[D]. 金英芝.蘇州大學(xué) 2016
[2]聚集誘導(dǎo)發(fā)光分子的合成及其在化學(xué)傳感與檢測領(lǐng)域的應(yīng)用[D]. 金佳科.浙江大學(xué) 2008



本文編號:2937844

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