發(fā)布時(shí)間：2017-09-29 00:21

  本文關(guān)鍵詞：功能性序列對(duì)納米金特異性吸附巰基DNA的影響機(jī)制及其穩(wěn)定性分析

  更多相關(guān)文章： 球形核酸 納米金粒子 T堿基序列 谷胱甘肽 雜交效率

【摘要】：金納米顆粒(AuNPs)與DNA連接形成的球形核酸(SNA)已經(jīng)在生物領(lǐng)域作為一種重要的功能材料。球狀核酸結(jié)構(gòu)(SNA)與互補(bǔ)的DNA序列有高的雜交能力是至關(guān)重要的,從而確保它們?cè)谂c反義基因治療和細(xì)胞傳感等領(lǐng)域的適用性。傳統(tǒng)salt-aging過程方法是有效的,但是很繁瑣,需要1-3天才能完成�？焖俚蚿H值連接方法被證明是有效的,而相關(guān)核心問題是DNA非特異性吸附于金納米顆粒表面。為了解決這個(gè)問題,我們系統(tǒng)地比較了球狀核酸結(jié)構(gòu)(SNA)分別由這兩種方法(Salt-aging方法和低pH值的方法)處理的情況。就互補(bǔ)DNA的數(shù)量而言,每個(gè)球狀核酸結(jié)構(gòu)(SNA)均可以綁定互補(bǔ)DNA,平均每個(gè)巰基修飾的互補(bǔ)鏈DNA探針的與SNA都具有一定的綁定親和力,兩種方法也產(chǎn)生了類似雜交效率,盡管球狀核酸結(jié)構(gòu)(SNA)利用低pH值的方法具有較高的加載能力,但是SNA表面的立體構(gòu)型存在非特異性吸附與電荷排斥與空間位阻效應(yīng)。通過谷胱甘肽(GSH)的處理,我們發(fā)現(xiàn)非特異性DNA與納米金粒子的結(jié)合可以幾乎完全消除,形成一個(gè)具有直立構(gòu)型的球狀核酸結(jié)構(gòu)(SNA)。相比傳統(tǒng)的方法,使用有毒巰基己醇或硫醇消除非特異性DNA吸附,谷胱甘肽具有生物相容性,溫和,同時(shí)具有成本效益,技術(shù)上也易于使用。此外,通過調(diào)整合理的DNA堿基序列——T序列的個(gè)數(shù)變化,在DNA序列的頭端形成功能性序列,從而增強(qiáng)金納米粒子對(duì)DNA的承載能力和穩(wěn)定性,這種方法也適用于鹽誘導(dǎo)聚合方法。這項(xiàng)工作不僅針對(duì)非特異性DNA吸附提供了有效和簡(jiǎn)單的技術(shù)解決方案,而且提拱了球狀核酸結(jié)構(gòu)(SNA)雜交效率的新見解。
【關(guān)鍵詞】：球形核酸 納米金粒子 T堿基序列 谷胱甘肽 雜交效率
【學(xué)位授予單位】：北京化工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：O614.123;TB383.1
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-14
• 第一章 緒論14-24
• 1.1 納米金簡(jiǎn)介14-19
• 1.1.1 納米金的定義14
• 1.1.2 納米金的性質(zhì)14-15
• 1.1.3 納米金的應(yīng)用與發(fā)展介紹15-18
• 1.1.4 納米金的制備18-19
• 1.2 球狀核酸結(jié)構(gòu)(SNA)簡(jiǎn)介19-22
• 1.2.1 球狀核酸結(jié)構(gòu)(SNA)20
• 1.2.2 球狀核酸結(jié)構(gòu)(SNA)組成結(jié)構(gòu)20-22
• 1.3 課題目的與意義22-24
• 第二章 納米金的制備與表征24-28
• 2.1 材料與儀器24-25
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料24
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器24-25
• 2.2 方法與結(jié)果25-27
• 2.2.1 納米金的制備25
• 2.2.2 納米金粒徑測(cè)定25-27
• 2.2.3 納米金濃度的計(jì)算27
• 2.3 本章小結(jié)27-28
• 第三章 納米金與DNA吸附及其優(yōu)化28-34
• 3.1 材料與儀器28-29
• 3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料28
• 3.1.2 實(shí)驗(yàn)器材28-29
• 3.2 方法與結(jié)果29-30
• 3.2.1 DNA序列設(shè)計(jì)基礎(chǔ)29
• 3.2.2 DNA序列設(shè)計(jì)結(jié)果29-30
• 3.3 納米金與巰基化DNA吸附研究30-33
• 3.3.1 低pH吸附30-31
• 3.3.2 氯化鈉鹽培養(yǎng)吸附31
• 3.3.3 納米金裝載DNA的定量分析31-33
• 3.4 本章小結(jié)33-34
• 第四章 球狀核酸結(jié)構(gòu)SNA的性質(zhì)研究34-44
• 4.1 材料與儀器34-35
• 4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料34
• 4.1.2 實(shí)驗(yàn)器材34-35
• 4.2 穩(wěn)定性研究的方法與結(jié)果35-39
• 4.2.1 DNA吸附納米金結(jié)構(gòu)研究35-36
• 4.2.2 帶有DNA的納米金粒子穩(wěn)定性研究36-37
• 4.2.3 SNA鹽穩(wěn)定性的研究37-38
• 4.2.4 SNA隨時(shí)間變化的穩(wěn)定性研究38-39
• 4.3 SNA的裝載能力及其熱力學(xué)研究方法與結(jié)果39-42
• 4.3.1 SNA裝載linker DNA研究39-40
• 4.3.2 SNA熱力學(xué)溶解曲線研究40-42
• 4.4 本章小結(jié)42-44
• 第五章 球形核酸結(jié)構(gòu)SNA雜交功能研究44-52
• 5.1 材料與儀器44-45
• 5.1.1 實(shí)驗(yàn)材料44
• 5.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器44-45
• 5.2 方法與結(jié)果45-50
• 5.2.1 兩種方法下SNA雜交情況對(duì)比45-47
• 5.2.2 鈉鹽對(duì)SNA雜交影響研究47-49
• 5.2.3 SNA的雜交親和力研究49-50
• 5.3 本章小結(jié)50-52
• 第六章 GSH處理降低非特異性吸附研究52-64
• 6.1 材料與儀器52-53
• 6.1.1 實(shí)驗(yàn)材料52
• 6.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器52-53
• 6.2 方法與結(jié)果53-60
• 6.2.1 GSH濃度對(duì)非特異性吸附的影響53-55
• 6.2.2 GSH處理濃度對(duì)SNA結(jié)構(gòu)的影響55-58
• 6.2.3 GSH處理時(shí)間對(duì)非特異性吸附影響探究58-59
• 6.2.4 GSH處理后雜交的ssDNA熔解曲線59-60
• 6.3 鹽培養(yǎng)下GSH對(duì)非特異性吸附影響研究60-62
• 6.4 本章小結(jié)62-64
• 第七章 GSH與MCH功能性區(qū)別研究64-76
• 7.1 材料與儀器64-65
• 7.1.1 實(shí)驗(yàn)材料64
• 7.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器64-65
• 7.2 方法與結(jié)果65-71
• 7.2.1 GSH對(duì)SNA表面DNA處理機(jī)制研究65-67
• 7.2.2 GSH與MCH對(duì)非特異性吸附作用區(qū)別67-71
• 7.2.3 GSH與MCH雜交動(dòng)力區(qū)別研究71
• 7.3 GSH與MCH對(duì)SNA穩(wěn)定性區(qū)別的研究71-73
• 7.4 本章小結(jié)73-76
• 第八章 結(jié)論,創(chuàng)新點(diǎn)和展望76-78
• 8.1 結(jié)論76-77
• 8.2 創(chuàng)新點(diǎn)77
• 8.3 展望77-78
• 參考文獻(xiàn)78-84
• 致謝84-86
• 研究成果及發(fā)表的學(xué)術(shù)論文86-88
• 作者及導(dǎo)師簡(jiǎn)介88-89
• 附件89-90

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 曾琦斐;;納米金的制備及其應(yīng)用研究[J];嘉應(yīng)學(xué)院學(xué)報(bào);2011年05期

2 曾琦斐;;表面活性劑存在下HEPES緩沖溶液中制備納米金顆粒[J];武漢工程大學(xué)學(xué)報(bào);2010年07期

3 劉興芝,房大維,王魯寧,關(guān)英勛,董志國(guó),司偉,陳林,臧樹良;納米材料及其應(yīng)用[J];遼寧大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2004年01期

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本文編號(hào)：938931