本文關(guān)鍵詞：DNA納米結(jié)構(gòu)及其仿生礦化的生物學(xué)效應(yīng)

  更多相關(guān)文章： DNA納米結(jié)構(gòu) 六螺旋 四面體 礦化

【摘要】：納米材料被廣泛應(yīng)用于生物、醫(yī)藥、材料等領(lǐng)域的研究和開(kāi)發(fā)。隨著納米技術(shù)的發(fā)展,這些領(lǐng)域有了長(zhǎng)足的發(fā)展。作為構(gòu)建嚴(yán)密、精巧的多樣模板,DNA納米結(jié)構(gòu)也引起了人們持續(xù)的關(guān)注。到目前為止,DNA納米結(jié)構(gòu)的構(gòu)建已經(jīng)形成了完整的體系,我們幾乎能夠得到所有想要的結(jié)構(gòu)。除了繼續(xù)構(gòu)建更高級(jí)復(fù)雜的結(jié)構(gòu)之外,DNA納米結(jié)構(gòu)還可以用作核酸藥物的載體。為了了解結(jié)構(gòu)的載藥應(yīng)用潛力,本文開(kāi)展了DNA納米結(jié)構(gòu)的生物學(xué)效應(yīng)研究。具體研究結(jié)構(gòu)如下:(1)不同細(xì)胞攝取DNA六螺旋納米結(jié)構(gòu)的研究。組裝了一種內(nèi)腔徑2-3 nm、長(zhǎng)為20 nm的管狀結(jié)構(gòu)——DNA六螺旋。首先研究了該結(jié)構(gòu)的合成效果,發(fā)現(xiàn)經(jīng)過(guò)簡(jiǎn)單的退火處理后目標(biāo)結(jié)構(gòu)的產(chǎn)率就能達(dá)到85%,便于后續(xù)處理。血清穩(wěn)定性的探究則表明這一結(jié)構(gòu)能夠作用于細(xì)胞并且適于長(zhǎng)時(shí)間的作用。在此基礎(chǔ)上研究了RAW264.7細(xì)胞、Hela細(xì)胞和MCF-7細(xì)胞對(duì)這種結(jié)構(gòu)的攝取效率,DNA六螺旋的高攝取率進(jìn)一步保證了該結(jié)構(gòu)用作藥物載體的可能性。該部分工作完善了納米結(jié)構(gòu)的范疇,同時(shí)也為接下來(lái)核酸載體的應(yīng)用奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。(2)DNA四面體的礦化及生物效應(yīng)的研究。CpG是一段以CG二核苷為核心的非甲基化DNA序列,與內(nèi)體膜上的TLR9(toll-like受體)結(jié)合后會(huì)激發(fā)免疫反應(yīng)、提高免疫效應(yīng),是一種免疫激活因子。CpG被四面體載體成功運(yùn)送到細(xì)胞內(nèi),相對(duì)于CpG本身,四面體促進(jìn)了細(xì)胞的攝取。但由于細(xì)胞和四面體表面都帶有負(fù)電荷,因此我們相信攝取結(jié)果并不是最理想的。某些輔助試劑如陽(yáng)離子聚合物可以屏蔽表面電荷。我們?cè)谒拿骟w單鏈上修飾CpG,用這些鏈合成目標(biāo)結(jié)構(gòu)。為了提高細(xì)胞攝取效率,我們用磷酸鈣對(duì)四面體進(jìn)行礦化,得到了可在酶處理下穩(wěn)定存在一段時(shí)間的結(jié)構(gòu)。對(duì)礦化前后的顆粒進(jìn)行形態(tài)和尺寸的變化的考察,發(fā)現(xiàn)了明顯的差異。又研究了細(xì)胞攝取、細(xì)胞毒性以及免疫刺激等生物性能的變化。
【關(guān)鍵詞】：DNA納米結(jié)構(gòu) 六螺旋 四面體 礦化
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)科學(xué)院研究生院(上海應(yīng)用物理研究所)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：Q52;TB383.1
【目錄】：

• 摘要5-6
• ABSTRACT6-10
• 第一章 緒論10-26
• 1.1 DNA核酸分子的連接及高級(jí)結(jié)構(gòu)的構(gòu)建10-13
• 1.1.1 二維結(jié)構(gòu)的構(gòu)建10-11
• 1.1.2 三維結(jié)構(gòu)的構(gòu)建11-12
• 1.1.3 總結(jié)12-13
• 1.2 核酸藥物分子研究13-14
• 1.2.1 CpG寡核苷酸13
• 1.2.2 siRNA13-14
• 1.3 藥物載體的發(fā)展歷程14-17
• 1.4 仿生礦化及載體應(yīng)用17-18
• 1.5 本課題的提出18-19
• 參考文獻(xiàn)19-26
• 第二章 不同細(xì)胞對(duì)DNA六螺旋納米結(jié)構(gòu)的攝取研究26-40
• 2.1 引言26-27
• 2.2 實(shí)驗(yàn)部分27-29
• 2.2.1 試劑與儀器27-28
• 2.2.2 實(shí)驗(yàn)方法28-29
• 2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果29-34
• 2.3.1 DNA六螺旋結(jié)構(gòu)的合成效率表征29-30
• 2.3.2 六螺旋結(jié)構(gòu)在細(xì)胞培養(yǎng)基中的穩(wěn)定性30-31
• 2.3.3 RAW264.7 細(xì)胞對(duì)納米結(jié)構(gòu)六螺旋的攝取31-33
• 2.3.4 MCF-7 和Hela細(xì)胞對(duì)六螺旋的攝取研究33-34
• 2.4 本章小結(jié)34-36
• 參考文獻(xiàn)36-40
• 第三章 DNA四面體的礦化及生物效應(yīng)的研究40-58
• 3.1 引言40-41
• 3.2 實(shí)驗(yàn)部分41-45
• 3.2.1 材料和儀器41-43
• 3.2.2 實(shí)驗(yàn)方法43-45
• 3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果45-52
• 3.3.1 寡核苷酸序列的選擇45-46
• 3.3.2 礦化結(jié)果的表征46-47
• 3.3.3 酶處理結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性47-48
• 3.3.4 細(xì)胞攝取48-50
• 3.3.5 細(xì)胞毒性研究50
• 3.3.6 免疫效應(yīng)研究50-52
• 3.4 本章小結(jié)52-54
• 參考文獻(xiàn)54-58
• 第四章 總結(jié)與展望58-62
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表及待發(fā)表的論文62-64
• 致謝64-66

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 王振發(fā);王烈;衛(wèi)立辛;;基因治療病毒載體的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2007年07期

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本文編號(hào)：808430