發(fā)布時間：2017-06-07 16:06

  本文關鍵詞：葡萄糖酸亞鐵固體脂質(zhì)納米粒的制備及肌原纖維蛋白酶解多肽對其性質(zhì)的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：鐵元素參與生命體物質(zhì)和能量代謝,是人體需要的必需微量元素之一。膳食中的鐵元素絕大多數(shù)以非血紅素鐵的形式存在,但由于食物組分中的植酸、草酸和多酚等抑制劑的存在,非血紅素鐵的生物利用率低,往往不能滿足人體日常所需。因此,制備鐵的膳食補充劑,防止鐵與其抑制劑的絡合是提高鐵元素的生物吸收率,改善缺鐵現(xiàn)狀的重要手段。本文選用葡萄糖酸亞鐵作為芯材,探討了采用固體脂質(zhì)納米粒技術(shù)對葡萄糖酸亞鐵進行包埋,以包埋率為指標,確定了制備過程中的關鍵因素條件,并考察了三種多糖或多糖對葡萄糖酸亞鐵固體脂質(zhì)納米粒包埋率、理化性質(zhì)和釋放率的影響。本課題還提取了豬肉中的肌原纖維蛋白,分析了經(jīng)不同酶解過程處理得到的酶解產(chǎn)物在分子量分布以及氨基酸組成的差異,旨在探索肌原纖維蛋白提高鐵在人體吸收的內(nèi)在原因,并研究了多肽對葡萄糖酸亞鐵制備的影響,以期獲得更高生物利用率的鐵補充劑。具體研究內(nèi)容和結(jié)果如下:(1)研究了采用多重乳狀液的方法制備葡萄糖酸亞鐵固體脂質(zhì)納米粒(SLN)的工藝,以包埋率為指標,優(yōu)化了關鍵制備參數(shù),結(jié)果顯示,當內(nèi)相中水相與油相的體積比為0.2,外水相與內(nèi)相乳狀液的體積比為5:1,大豆卵磷脂濃度為5%時,SLN的包埋率取得最大,為52.48%,并分析了大豆卵磷脂對顆粒形態(tài)的影響。(2)考察了三種多糖或單糖,即海藻酸鈉(SA)、鹽酸氨基葡萄糖(GH)和硫酸葡聚糖(DS)溶液對葡萄糖酸亞鐵油水分配系數(shù)的影響,發(fā)現(xiàn)多糖/單糖的加入提高了葡萄糖酸亞鐵的油溶性,并將其和葡萄糖酸亞鐵的混合溶液作為內(nèi)相,考察了三類物質(zhì)對固體脂質(zhì)納米粒包埋率的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn),海藻酸鈉、硫酸葡聚糖和鹽酸氨基葡萄糖的添加量的不同會導致包埋率的變化,且均在與葡萄糖酸亞鐵質(zhì)量比為1:2時,有最大包埋率,分別為59.03%,54.06%和61.30%,對粒子的平均粒徑和多分散系數(shù)無太大影響,顆粒zeta電位絕對值增大。差示掃描量熱曲線顯示,與硬脂酸相比,SLN的熔化焓和峰值溫度發(fā)生改變,反映了脂質(zhì)在SLN中的結(jié)晶度降低。體外模擬釋放實驗反映了固體脂質(zhì)納米粒在模擬胃液環(huán)境下能保持良好穩(wěn)定性,并在模擬腸液中顯示出突釋的特點,說明固體脂質(zhì)納米粒對葡萄糖酸亞鐵有較好的保護及釋放效果。(3)提取豬肉中的肌原纖維蛋白,通過SDS-PAGE分析比較不同酶對肌原纖維蛋白的酶解效果,篩選與胃蛋白酶酶解程度相似的酶解途徑,比較各酶解產(chǎn)物的多肽得率和水解度,綜合選取Protin SD-AY(SD)先酶解4 h,后用細菌蛋白酶Protease P(PP)酶解12 h的兩步酶解過程,比較該酶解產(chǎn)物與胃蛋白酶酶解產(chǎn)物的相對分子質(zhì)量分布和氨基酸組成以及鐵絡合率,結(jié)果發(fā)現(xiàn)與兩步酶解產(chǎn)物相比,具有更高天冬氨酸和谷氨酸含量的胃蛋白酶酶解產(chǎn)物的鐵絡合率更高為13.53%。嘗試將多肽引入固體脂質(zhì)納米粒中,發(fā)現(xiàn)亞鐵包埋率有下降趨勢,粒徑顯著增大,zeta電位絕對值顯著增加,但并未改變固體脂質(zhì)納米粒的釋放特性,在模擬胃液腸液中的釋放率更高。貯藏實驗表明,4℃貯藏溫度下的藥物保留率高于25℃,貯藏期間的平均粒徑除多肽和對照組SLN外沒有發(fā)生明顯改變。
【關鍵詞】：葡萄糖酸亞鐵 固體脂質(zhì)納米粒 海藻酸鈉 鹽酸氨基葡萄糖 硫酸葡聚糖 多肽
【學位授予單位】：江南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：TB383.1;TS218
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-7
• 縮寫符號說明7-11
• 1 緒論11-18
• 1.1 微量元素鐵的研究現(xiàn)狀11-13
• 1.1.1 鐵元素的生物功能11
• 1.1.2 鐵的膳食來源11
• 1.1.3 鐵的吸收機制11-12
• 1.1.4 缺鐵的危害與防治12-13
• 1.1.5 鐵補充劑存在的問題13
• 1.2 固體脂質(zhì)納米粒13
• 1.3 固體脂質(zhì)納米顆粒的制備方法13-15
• 1.3.1 高壓均質(zhì)法13-14
• 1.3.2 微乳法14
• 1.3.3 乳化-溶劑揮發(fā)法14
• 1.3.4 多重乳狀液法14-15
• 1.4 固體脂質(zhì)納米粒的包埋與釋放15
• 1.5 肌原纖維蛋白的作用15-16
• 1.6 立題依據(jù)及意義16
• 1.7 課題主要研究內(nèi)容16-18
• 2 材料與方法18-25
• 2.0 實驗原料18
• 2.1 實驗儀器18
• 2.2 實驗方法18-25
• 2.2.1 二價鐵離子的測定18
• 2.2.2 固體脂質(zhì)納米粒的制備18-19
• 2.2.3 固體脂質(zhì)納米粒包埋率的測定19
• 2.2.4 多糖/單糖固體脂質(zhì)納米粒的制備19-20
• 2.2.5 固體脂質(zhì)納米粒的熱性能20
• 2.2.6 固體脂質(zhì)納米粒的形態(tài)學觀察20
• 2.2.7 體外模擬釋放實驗20
• 2.2.8 豬肉鹽溶蛋白的提取及蛋白質(zhì)含量測定20-21
• 2.2.9 肌原纖維蛋白多肽的制備及酶解過程的篩選21-22
• 2.2.10 酶解產(chǎn)物相對分子質(zhì)量的測定22
• 2.2.11 酶解產(chǎn)物水解氨基酸組成的測定22-23
• 2.2.12 多肽的鐵絡合率測定23
• 2.2.13 多肽亞鐵絡合物的FT-IR分析23
• 2.2.14 多肽固體脂質(zhì)納米粒的制備23-24
• 2.2.15 固體脂質(zhì)納米粒的貯藏穩(wěn)定性24
• 2.2.16 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析24-25
• 3 結(jié)果與討論25-51
• 3.1 葡萄糖酸亞鐵固體脂質(zhì)納米粒的制備25-28
• 3.1.1 葡萄糖酸亞鐵用量對包埋率的影響25
• 3.1.2 內(nèi)相水相/油相體積比對包埋率的影響25-26
• 3.1.3 外水相與內(nèi)相乳狀液的體積比對包埋率的影響26-27
• 3.1.4 大豆卵磷脂濃度對固體脂質(zhì)納米粒的影響27-28
• 3.2 多糖/單糖葡萄糖酸亞鐵固體脂質(zhì)納米粒的制備28-32
• 3.2.1 多糖/單糖對葡萄糖酸亞鐵油水分配系數(shù)的影響28-29
• 3.2.2 多糖/單糖對固體脂質(zhì)納米粒包埋率的影響29-31
• 3.2.3 多糖/單糖對固體脂質(zhì)納米粒粒徑、zeta電位以及多分散系數(shù)的影響31-32
• 3.3 固體脂質(zhì)納米粒的熱性能32-33
• 3.4 固體脂質(zhì)納米粒的形態(tài)觀察33
• 3.5 固體脂質(zhì)納米粒的體外釋放33-37
• 3.5.1 固體脂質(zhì)納米粒在模擬胃液釋放前后的粒徑分布及變化34
• 3.5.2 固體脂質(zhì)納米粒在模擬胃液釋放前后的粒徑變化34-36
• 3.5.3 固體脂質(zhì)納米粒在模擬腸液中的體外釋放36-37
• 3.6 肌原纖維蛋白的不同酶解作用37-42
• 3.6.0 胃蛋白酶對肌原纖維蛋白的酶解作用37-38
• 3.6.1 SD對肌原纖維蛋白的酶解作用38-39
• 3.6.2 PP對肌原纖維蛋白的酶解作用39
• 3.6.3 PR對肌原纖維蛋白的酶解作用39
• 3.6.4 PM對肌原纖維蛋白的酶解作用39-40
• 3.6.5 兩步酶解過程的SDS-PAGE分析40-42
• 3.6.6 酶解反應的多肽得率和水解度42
• 3.7 酶解產(chǎn)物的分子質(zhì)量及水解氨基酸組成42-44
• 3.7.1 酶解產(chǎn)物中各組分的分子質(zhì)量及分布42-43
• 3.7.2 酶解產(chǎn)物的氨基酸組成差異43-44
• 3.8 多肽的亞鐵絡合率44-45
• 3.9 多肽亞鐵絡合物的紅外光譜分析45-46
• 3.10 多肽葡萄糖酸亞鐵固體脂質(zhì)納米粒的制備46-48
• 3.10.1 多肽對固體脂質(zhì)納米粒包埋率的影響46-47
• 3.10.2 多肽對固體脂質(zhì)納米粒平均粒徑和多分散系數(shù)的影響47
• 3.10.3 多肽對固體脂質(zhì)納米粒的zeta電位的影響47-48
• 3.11 多肽固體脂質(zhì)納米粒的體外釋放48-49
• 3.12 固體脂質(zhì)納米粒的貯藏穩(wěn)定性49-51
• 主要結(jié)論與展望51-53
• 致謝53-54
• 參考文獻54-61
• 附錄: 作者在攻讀碩士學位期間發(fā)表的論文61

  本文關鍵詞：葡萄糖酸亞鐵固體脂質(zhì)納米粒的制備及肌原纖維蛋白酶解多肽對其性質(zhì)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：429554