聚合物納米載體的表面性能與其體內(nèi)命運(yùn)息息相關(guān)。在闡明研究納米載體不同表面特性對(duì)其體內(nèi)命運(yùn)影響的基礎(chǔ)上,對(duì)載體表面性質(zhì)進(jìn)行改性,可針對(duì)性設(shè)計(jì)高效的納米藥物遞送體系,提高藥物遞送的效率。以往的研究結(jié)果表明納米載體的表面電荷和親水段PEG密度可調(diào)節(jié)其與巨噬細(xì)胞的識(shí)別作用。近期的研究結(jié)果表明這是由于納米顆粒的表面電荷和PEG密度,顯著影響了其進(jìn)入體內(nèi)生理環(huán)境之后表面所吸附蛋白數(shù)量和種類,而這些蛋白顯著影響細(xì)胞和納米載體生物界面之間復(fù)雜的相互作用,進(jìn)一步影響其最終體內(nèi)命運(yùn)。因此,同時(shí)針對(duì)載體表面物化性質(zhì)和結(jié)合蛋白進(jìn)行研究相當(dāng)重要。本論文的工作首先研究了納米載體表面電荷對(duì)納米遞送體系治療腫瘤功效的影響;進(jìn)而,我們系統(tǒng)研究了納米載體蛋白結(jié)合性能與其體內(nèi)命運(yùn)的相關(guān)性,嘗試更加簡(jiǎn)便的利用納米載體表面特性預(yù)測(cè)復(fù)雜的體內(nèi)命運(yùn);最終,我們研究了載體表面電勢(shì)和PEG密度共同對(duì)納米載體基因編輯能力的影響。本論文的主要內(nèi)容分為如下三部分:1.我們合成了鍵合順鉑前藥的聚乳酸衍生物,通過單乳化的方法以聚乙二醇聚乳酸(mPEG-PLA)為主體,摻入不同質(zhì)量分?jǐn)?shù)的陽(yáng)離子脂質(zhì)DOTAP作為輔助,自組裝形成一系列不同正電性的納...

【文章頁(yè)數(shù)】：130 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 癌癥的治療現(xiàn)狀
    1.2 納米載體系統(tǒng)的應(yīng)用及挑戰(zhàn)
        1.2.1 納米載體系統(tǒng)的臨床應(yīng)用現(xiàn)狀
        1.2.2 納米載體系統(tǒng)的臨床應(yīng)用挑戰(zhàn)
    1.3 納米載體系統(tǒng)表面物理化學(xué)特性對(duì)體內(nèi)外命運(yùn)的影響
        1.3.1 表面電勢(shì)影響納米載體系統(tǒng)體內(nèi)命運(yùn)
        1.3.2 表面親疏水程度影響納米載體系統(tǒng)體內(nèi)命運(yùn)
    1.4 納米載體系統(tǒng)表面生物學(xué)特性對(duì)體內(nèi)外命運(yùn)的影響
        1.4.1 納米載體系統(tǒng)表面生物學(xué)特性的定義
        1.4.2 納米載體系統(tǒng)表面生物學(xué)特性決定其體內(nèi)外命運(yùn)
        1.4.3 納米載體系統(tǒng)表面生物學(xué)特性與其體內(nèi)外命運(yùn)的相關(guān)性
    1.5 選題依據(jù)及主要研究?jī)?nèi)容
    參考文獻(xiàn)
第二章 陽(yáng)離子脂質(zhì)輔助的正電性順鉑鍵合前藥納米載體用于克服腫瘤順鉑耐藥的研究
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料及方法
        2.2.1 主要材料
        2.2.2 側(cè)鏈羥基化修飾的聚乳酸(PLA-OH)的合成
        2.2.3 側(cè)鏈羥基化聚乳酸鍵合順鉑前藥(PLA-Pt)的合成
        2.2.4 羅丹明B標(biāo)記的聚乳酸(PLA-RhoB)的合成
        2.2.5 陽(yáng)離子脂質(zhì)輔助的鍵合順鉑前藥納米顆粒的制備
        2.2.6 不同正電性鍵合順鉑前藥納米顆粒的藥代動(dòng)力學(xué)研究
        2.2.7 皮下腫瘤模型的構(gòu)建
        2.2.8 不同正電性鍵合順鉑前藥納米顆粒體內(nèi)臟器分布
        2.2.9 不同正電性鍵合順鉑前藥納米顆粒體內(nèi)腫瘤細(xì)胞攝取
        2.2.10 不同正電性鍵合順鉑前藥納米顆粒腫瘤抑制實(shí)驗(yàn)
        2.2.11 免疫組化和免疫熒光實(shí)驗(yàn)
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 側(cè)鏈羥基化聚乳酸鍵合順鉑前藥(PLA-Pt)的合成及表征
        2.3.2 鍵合順鉑前藥納米顆粒的構(gòu)建及表征
        2.3.3 正電性鍵合順鉑前藥納米顆粒的體內(nèi)命運(yùn)
        2.3.4 正電性鍵合順鉑前藥納米顆粒抑制順鉑耐藥腫瘤的生長(zhǎng)
        2.3.5 免疫組化觀察治療后腫瘤細(xì)胞的增殖凋亡情況
        2.3.6 納米顆粒不引起臟器損傷
    2.4 本章小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第三章 納米載體親水表面的蛋白結(jié)合能力與體內(nèi)命運(yùn)相關(guān)性的研究
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料及方法
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.2 PEG-PLA和PEEP-PLA納米顆粒的制備與表征
        3.2.3 PEG-PLA和PEEP-PLA納米顆粒的蛋白吸附量檢測(cè)
        3.2.4 PEG-PLA和PEEP-PLA納米顆粒的蛋白結(jié)合能力檢測(cè)
        3.2.5 UPLC檢測(cè)PEG-PLA和PEEP-PLA納米顆粒的體外巨噬細(xì)胞攝取
        3.2.6 CLSM檢測(cè)PEG-PLA納米顆粒的體外巨噬細(xì)胞攝取
        3.2.7 FACS/UPLC/CLSM檢測(cè)PEG-PLA納米顆粒的體內(nèi)肝臟枯否細(xì)胞攝取
        3.2.8 PEG-PLA納米顆粒的體內(nèi)血液循環(huán)和組織分布
        3.2.9 PEG-PLA納米顆粒表面吸附蛋白的質(zhì)譜檢測(cè)
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 不同PEG密度納米顆粒的構(gòu)建和表征
        3.3.2 不同PEG密度納米顆粒的蛋白結(jié)合能力差異
        3.3.3 納米顆粒體外的巨噬細(xì)胞攝取和蛋白結(jié)合能力的關(guān)系
        3.3.4 納米顆粒的體內(nèi)循環(huán)與蛋白結(jié)合能力的相關(guān)性分析
        3.3.5 納米顆粒的體內(nèi)巨噬細(xì)胞識(shí)別與蛋白結(jié)合能力的相關(guān)性分析
        3.3.6 納米顆粒的體內(nèi)命運(yùn)與蛋白結(jié)合能力相關(guān)性的機(jī)制研究
        3.3.7 納米顆粒的體內(nèi)命運(yùn)與蛋白結(jié)合能力相關(guān)性的延展分析
    3.4 本章小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第四章 優(yōu)化的陽(yáng)離子脂質(zhì)輔助納米顆粒干預(yù)中性粒細(xì)胞相關(guān)炎癥的研究
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)材料及方法
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.2.2 pCas9/gNE質(zhì)粒的構(gòu)建
        4.2.3 CLAN庫(kù)的制備和表征
        4.2.4 高脂飲食誘導(dǎo)的T2D小鼠模型構(gòu)建
        4.2.5 eWAT和肝臟的免疫細(xì)胞分離
        4.2.6 納米顆粒庫(kù)的中性粒細(xì)胞攝取篩選
        4.2.7 CLANpCas9/gNE體內(nèi)敲除NE基因
        4.2.8 蛋白免疫印跡檢測(cè)NE的敲除效率
        4.2.9 小動(dòng)物成像檢測(cè)NE活性
        4.2.10 CLANpCas9/gNE治療高脂飲食誘導(dǎo)的二型糖尿病
        4.2.11 蛋白免疫印跡法檢測(cè)eWAT和肝臟中胰島素受體底物1的表達(dá)
        4.2.12 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)eWAT和肝臟中中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 具有不同表面特性的CLAN庫(kù)的制備和表征
        4.3.2 對(duì)體內(nèi)篩選eWAT和肝臟中中性粒細(xì)胞攝取CLAN
        4.3.3 CLAN45包載pCas9/gNE納米顆粒的構(gòu)建和表征
        4.3.4 CLANpCas9/gNE體內(nèi)基因敲除效率的表征
        4.3.5 CLANpCas9/gNE治療二型糖尿病
    4.4 本章小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
附錄一 主要儀器設(shè)備
附錄二 常規(guī)試劑
附錄三 主要溶液配制
附錄四 常規(guī)實(shí)驗(yàn)方法及檢測(cè)條件
附錄五 實(shí)驗(yàn)所用細(xì)胞株和動(dòng)物
致謝
在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與取得的研究成果



本文編號(hào)：3813102