當(dāng)前納米藥物遞送系統(tǒng)的研究依然是熱點(diǎn),將化療藥物載入納米載體可以減輕藥物的毒副作用、增加其水溶性、延長(zhǎng)體內(nèi)的循環(huán)時(shí)間、增加藥物的療效。本文利用去溶劑化-化學(xué)交聯(lián)法制備了載阿霉素（DOX）和載藤黃酸（GA）的牛血清白蛋白納米顆粒（BSA NPs）,進(jìn)行一系列的理化表征和優(yōu)化,并對(duì)其進(jìn)行體外和體內(nèi)抗癌活性表征。論文主要工作如下:首先,利用去溶劑化-化學(xué)交聯(lián)法制備了DOX-BSA NPs（DNP）和GA-BSA NPs（GNP）。利用minitab軟件設(shè)計(jì)了2³全因子實(shí)驗(yàn),以載藥量為指標(biāo),通過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行軟件分析,優(yōu)化了DNP和GNP的制備工藝。體外藥物釋放實(shí)驗(yàn)表明,DNP和GNP具有酸性刺激響應(yīng)性釋放特性,表明能在腫瘤細(xì)胞內(nèi)偏酸性環(huán)境下響應(yīng)釋放藥物。其次,考察了DNP和GNP體外抗癌活性,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明DNP和GNP聯(lián)合用藥具有協(xié)同抗癌作用。首先考察了DOX和GA的細(xì)胞毒性。DOX和GA都能明顯抑制HepG2肝癌細(xì)胞的存活。兩藥按照不同比例聯(lián)用均有協(xié)同作用,當(dāng)兩藥的聯(lián)用比為1:1時(shí)具有最強(qiáng)的協(xié)同作用,聯(lián)合指數(shù)（combination index,CI）為0.22。DO... 

【文章來(lái)源】：華僑大學(xué)福建省

【文章頁(yè)數(shù)】：76 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

不同類型的納米載藥體系[1]

7納米顆粒用釓螯合的白蛋白修飾后可用于磁共振成像和胞內(nèi)氧化還原響應(yīng)的藥物釋放[51]。除了上述的載藥功能，白蛋白還可以作為模板用以合成熒光金屬串，熒光量子點(diǎn)和非熒光無(wú)機(jī)納米顆粒等[52-54]。1.3聯(lián)合化療的研究進(jìn)展傳統(tǒng)的單藥化療存在易導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生抗藥性的缺點(diǎn)，而聯(lián)合治療可以增強(qiáng)藥效、減輕多藥抗性、調(diào)控癌細(xì)胞中的不同的信號(hào)途徑、敏化癌細(xì)胞以及通過(guò)降低聯(lián)合藥物各自的給藥劑量而起到減輕副作用的目的[55]。目前已發(fā)展出化療與其他治療方法結(jié)合的聯(lián)合治療方法包括聯(lián)合化療、化療與光療聯(lián)合、化療與免疫治療聯(lián)合、化療與基因治療聯(lián)合、多種聯(lián)合方式等，如下圖1.2所示[55]：圖1.2聯(lián)合治療的各種聯(lián)合模式[55]Fig.1.2Variouscombinationmodeofcombinationtherapy[55]本文采用的聯(lián)合治療模式是聯(lián)合化療。聯(lián)合化療用藥有以下要求：（1）藥物之間無(wú)重疊毒性；（2）聯(lián)合藥物對(duì)癌癥有不同的治療機(jī)理；（3）藥物之間有最優(yōu)化的劑量比例用于協(xié)同或疊加治療；（4）藥物之間要有相似的溶解度和滲透性。聯(lián)合化療效果可以通過(guò)計(jì)算聯(lián)合指數(shù)（CombinationIndex,CI）來(lái)衡量。CI>1表明兩藥有拮抗作用，CI=1表明兩藥是效果疊加的作用，而CI<1表明兩藥具

10圖1.3BSANPs制備工藝Fig.1.3PreparationprocessofBSAnanoparticles具體研究?jī)?nèi)容如下：（1）用去溶劑化-化學(xué)交聯(lián)法制備了DNP和GNP。分別采用SEM和TEM技術(shù)表征納米顆粒的形貌和粒徑。利用minitab軟件設(shè)計(jì)全因子實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行了粒徑、電位、載藥量、包封率、得率的表征，軟件分析結(jié)果，分別選出DOX和GA載藥量較高的優(yōu)化的BSA制備工藝。分別用優(yōu)化工藝制備的DNP和GNP進(jìn)行pH5.0和pH7.4環(huán)境下的藥物釋放實(shí)驗(yàn)。（2）細(xì)胞實(shí)驗(yàn)選取HepG2肝癌細(xì)胞株。對(duì)DOX和GA及其聯(lián)合用藥進(jìn)行細(xì)胞毒性和細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)。對(duì)空白BSANPs和以優(yōu)化工藝制備的DNP和GNP進(jìn)行細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)采用甲基噻唑基四唑（MethylThiazolylTetrazolium,MTT）法。采用激光共聚焦顯微鏡（ConfocalLaserScanningMicroscope,CLSM）觀察DOX和GA以及載藥納米顆粒的細(xì)胞攝取情況。（3）對(duì)載藥納米顆粒進(jìn)行體內(nèi)生物學(xué)評(píng)價(jià)。用適齡裸鼠構(gòu)建HepG2肝細(xì)胞癌模型，分為7組，考察DOX和GA，載藥納米顆粒及其聯(lián)合用藥的抗瘤效果，定時(shí)記錄各組裸鼠的腫瘤體積變化，裸鼠的質(zhì)量變化，做了不同時(shí)間DOX以及DNP的器官分布圖。初次給藥21天后處死裸鼠，取心、肝、脾、肺、腎、腫瘤做蘇木精-伊紅（Hematoxylin-Eosin,HE）染色。對(duì)腫瘤進(jìn)行c-Caspase-3以及Ki-67染色。詳細(xì)技術(shù)路線圖如圖1.4所示：

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]血清白蛋白納米藥物載體的制備及應(yīng)用[J]. 商宏華,申有青.  功能高分子學(xué)報(bào). 2013(03)
[2]白蛋白作為藥物載體的研究[J]. 張建軍,高緣,孫婉瑾.  化學(xué)進(jìn)展. 2011(08)

博士論文
[1]腫瘤微環(huán)境響應(yīng)藥物載體的設(shè)計(jì)和應(yīng)用[D]. 都小姣.中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué) 2014
[2]貝伐單抗介導(dǎo)鹽酸阿霉素白蛋白納米粒靶向給藥系統(tǒng)的研究[D]. 李磊.沈陽(yáng)藥科大學(xué) 2011
[3]白蛋白納米粒作為疏水性和親水性藥物的載體研究[D]. 陳衛(wèi).復(fù)旦大學(xué) 2008

碩士論文
[1]基于計(jì)算藥劑學(xué)下的藤黃酸—姜黃素納米膠束研究[D]. 郭鳴睿.遼寧大學(xué) 2018
[2]阿霉素白蛋白納米粒的研制及性質(zhì)的初步考察[D]. 魏雪.河北醫(yī)科大學(xué) 2008



本文編號(hào)：3540752