小分子與蛋白質(zhì)之間的作用已經(jīng)被用于各個(gè)研究方向,可以被用來實(shí)現(xiàn)很多研究目的。本文借助這種特殊作用力主要是為了篩選淀粉樣纖維的探針和構(gòu)筑新型熒光納米粒子。蛋白質(zhì)的錯(cuò)誤折疊導(dǎo)致的淀粉樣結(jié)塊是誘發(fā)很多相關(guān)疾病的關(guān)鍵因素。對于具有對淀粉樣蛋白形成過程的監(jiān)測功能和抑制效力的新型小分子的開發(fā)和研究是目前迫切需要的。在這項(xiàng)研究中,利用小分子和變性蛋白質(zhì)之間的作用,我們研究了一種傳統(tǒng)的染料小分子-溴酚藍(lán)（BPB）,具有能夠精確的特異性識(shí)別淀粉樣蛋白的能力以及有效的阻礙淀粉樣蛋白的形成。選取牛胰島素作為淀粉樣蛋白模型,在牛胰島素纖維化的過程中,利用BPB作為監(jiān)測小分子成功還原了牛胰島素纖維化的三個(gè)階段。當(dāng)BPB作為抑制劑加入牛胰島素體系中時(shí),使得纖維化進(jìn)程顯著減速,并且大大降低了淀粉樣的總量甚至是完全抑制。TBNCs納米粒子是我們設(shè)計(jì)構(gòu)筑的一種具有良好的生物相容性的新型水溶性納米粒子,加熱的牛血清白蛋白作為納米粒子的骨架。由于硫黃素T（ThT）已經(jīng)普遍被用來作為淀粉樣纖維的染料,其可以與淀粉樣纖維特異性結(jié)合。因此,在加熱牛血清白蛋白的過程中,將ThT摻雜于牛血清白蛋白的骨架中。由于牛血清白蛋白變性生成類... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

硫黃素T的化學(xué)結(jié)構(gòu)式

帶和旋光色散光譜，類似于觀察到的淀粉樣原纖維樣品。Edwards 和 Woody46,47證明，Cibacron 藍(lán)和剛果紅結(jié)合脫氫酶誘導(dǎo)的圓二色以作為脫氫酶的探針，如肝醇脫氫酶，酵母醇脫氫酶，乳酸脫氫酶和激酶磷酸甘油酸激酶和豬腺苷酸激酶。Edwards 和 Woody48認(rèn)為，剛果紅基于染輔酶結(jié)構(gòu)之間的相似性，與酶的輔酶結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合。剛果紅也被證明可以結(jié)他天然蛋白，包括細(xì)胞朊蛋白49，彈性蛋白50，RNA 聚合酶51和人類前列酸酶52。剛果紅結(jié)構(gòu)表明（圖 1.2），通過疏水和靜電相互作用的組合可以發(fā)生與蛋的結(jié)合。53,54為了理解剛果紅的結(jié)合特異性，Khurana 等人使用圓二色性來分析剛果紅與原蛋白，部分折疊的蛋白質(zhì)和淀粉樣蛋白原纖維結(jié)合的測定果表明剛果紅與天然蛋白質(zhì)結(jié)合的機(jī)制，涉及剛果紅在蛋白質(zhì)分子間嵌入而蛋白質(zhì)的寡聚化。55

2.1 (A) 牛胰島素晶體結(jié)構(gòu)(PDB ID: 2ZP6). (B) 溴酚藍(lán)分子結(jié)構(gòu)。第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)部分.2.1 試劑與儀器牛血清白蛋白（BSA）、氯化鈉（NaCl）、溴酚藍(lán)（BPB）等生物試劑由北鼎國昌盛生物科技有限公司供應(yīng)葡萄糖等購于北京國藥集團(tuán)化學(xué)試劑公司鹽酸（HCl）等化學(xué)試劑從北京化學(xué)試劑公司購買所得超純水由儀器 a Milli-Qsystem (Millipore, Bedford, MA,USA)制備


本文編號：3480792