納米藥物載體可通過實體瘤的高通透性和滯留效應（EPR）在腫瘤部位積累,增加藥物的含量,提高效果,降低副反應,具有應用前景。納米載體經(jīng)注射入血液循環(huán),易被單核吞噬系統(tǒng)（MPS）識別并攝取,并被清除。納米藥物載體表面涂覆聚乙二醇（PEG）,可通過空間立體障礙,減少血液中蛋白吸附。目前已經(jīng)上市和具有臨床轉(zhuǎn)化前景的納米載體幾乎都經(jīng)過PEG化修飾,如Genexol-PM膠束化紫杉醇藥物,聚乙二醇-聚天冬氨酸嵌段聚合物組成的荷載紫杉醇的納米顆粒NK105。納米載體PEG化（如表面PEG長度和密度）程度對其生物學行為產(chǎn)生顯著影響,但高分子納米載體表面的PEG化程度的控制一直未能有效解決,難以客觀評價高分子聚合物納米載體PEG化程度對體內(nèi)命運影響的規(guī)律。本論文旨在調(diào)控高分子納米藥物載體的表面PEG化程度,在減少對其它納米特性的干擾情況下,研究納米藥物載體表面PEG化程度對其體內(nèi)生物學行為的影響,并應用于藥物遞送研究。論文的主要內(nèi)容和結(jié)論如下:1、發(fā)展了調(diào)控聚合物納米顆粒表面PEG密度不同、其它納米特性相近的方法,并系統(tǒng)研究了表面PEG密度對納米顆粒體內(nèi)生物學行為的影響。通過將聚己內(nèi)酯（PCL）均聚物摻... 

【文章來源】：中國科學技術(shù)大學安徽省 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：109 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 癌癥治療的現(xiàn)狀和瓶頸
    1.2 納米載藥系統(tǒng)
        1.2.1 納米載藥系統(tǒng)的定義
        1.2.2 納米載藥系統(tǒng)的分類
    1.3 納米載體所具有的各種特性及其影響
        1.3.1 納米載體具有的各種納米特性
        1.3.2 不同納米特性對其顆粒體內(nèi)命運的影響
    1.4 納米特性對載體生物學特性影響的研究面臨的困境
    1.5 本課題的選題目的及主要研究內(nèi)容
    參考文獻
第二章 聚合物納米顆粒表面PEG密度的調(diào)控及其對體內(nèi)生物學效應的影響
    2.1 引言
    2.2 實驗材料
        2.2.1 主要材料
        2.2.2 細胞株
        2.2.3 實驗動物
    2.3 實驗方法
        2.3.1 聚合物納米顆粒的制備
        2.3.2 納米顆粒的粒徑分布及表面電勢測定
        2.3.3 納米顆粒的平均分子質(zhì)量測定
        2.3.4 納米顆粒的形貌觀察
        2.3.5 代謝動力學測定
        2.3.6 蛋白吸附實驗
        2.3.7 肝臟和脾臟中納米顆粒定量
        2.3.8 體外細胞攝取納米顆粒及定量
        2.3.9 腫瘤組織中納米顆粒定量
        2.3.10 體內(nèi)腫瘤細胞攝取納米顆粒及定量
        2.3.11 腫瘤抑制
    2.4 結(jié)果與討論
        2.4.1 調(diào)控納米顆粒尺寸及表面PEG密度
        2.4.2 制備PEG密度不同而粒徑相同的納米顆粒
        2.4.3 高PEG密度顯著延長納米顆粒體內(nèi)循環(huán)時間
        2.4.4 高PEG密度增強納米顆粒在腫瘤部位富集
        2.4.5 高PEG密度增強體內(nèi)腫瘤細胞對納米顆粒攝取
        2.4.6 高PEG密度增強載藥納米顆粒抗腫瘤作用
    2.5 本章小結(jié)
    參考文獻
第三章 聚合物納米顆粒表面PEG長度對其體內(nèi)生物學效應的影響
    3.1 引言
    3.2 實驗材料
        3.2.1 主要材料
        3.2.2 動物
    3.3 實驗方法
        3.3.1 PEG-PCL嵌段聚合物的合成
        3.3.2 表面不同PEG長度的納米顆粒的制備
        3.3.3 PCL-RhoB熒光標記及載藥(DTXL)納米顆粒的制備
        3.3.4 動態(tài)光散射儀檢測納米顆粒穩(wěn)定性
        3.3.5 細胞培養(yǎng)及傳代
        3.3.6 MDA-MB-231乳腺癌模型構(gòu)建
        3.3.7 MDA-MB-231-GFP細胞系構(gòu)建
        3.3.8 MDA-MB-231-GFP乳腺癌模型構(gòu)建
        3.3.9 B16黑色素瘤小鼠模型構(gòu)建
        3.3.10 流式細胞術(shù)(FACS)檢測納米顆粒進入MDA-MB-231細胞的能力
        3.3.11 流式細胞術(shù)(FACS)檢測體內(nèi)納米顆粒進入腫瘤細胞的能力
        3.3.12 黑色素瘤小鼠生長周期實驗
        3.3.13 腫瘤生長抑制實驗
        3.3.14 PCL-RhoB標記的納米顆粒熒光定量
        3.3.15 超高效液相色譜(UPLC)檢測細胞中的熒光顆粒含量
        3.3.16 流式細胞儀分選MDA-MB-231-GFP乳腺癌細胞
        3.3.17 分離不同PEG長度納米顆粒表面的吸附蛋白
        3.3.18 聚丙烯酰氨凝膠電泳(SDS-PAGE)檢測顆粒表面吸附的蛋白含量
        3.3.19 激光共聚焦顯微鏡(LSCM)檢測納米顆粒進入MDA-MB-231細胞的能力
        3.3.20 腫瘤組織冰凍切片
        3.3.21 免疫組化
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 調(diào)控表面不同PEG長度納米顆粒的尺寸
        3.4.2 調(diào)控不同PEG長度納米顆粒的表面PEG密度
        3.4.3 不同PEG長度而其它特性相同的納米顆粒性質(zhì)表征
        3.4.4 不同PEG長度而其它納米特性相同的納米顆粒藥物代謝動力學
        3.4.5 不同PEG長度而其它納米特性相同的納米顆粒腫瘤富集和腫瘤抑制
    3.5 本章小結(jié)
    參考文獻
第四章 陽離子脂質(zhì)輔助荷載他克莫司的藥物載體用于潰瘍性結(jié)腸炎治療
    4.1 引言
    4.2 實驗材料
        4.2.1 主要材料
        4.2.2 主要藥品及試劑
        4.2.3 動物
    4.3 實驗方法
        4.3.1 納米顆粒制備及表征
        4.3.2 納米顆粒載藥(FK506)量檢測
        4.3.3 體外藥物釋放
        4.3.4 誘導結(jié)腸炎小鼠模型
        4.3.5 結(jié)腸部位顆粒富集
        4.3.6 結(jié)腸組織中納米顆粒分布
        4.3.7 脂質(zhì)輔助載藥(FK506)納米顆粒體內(nèi)治療實驗
        4.3.8 MPO和TNF-α分析
    4.4 結(jié)果與討論
        4.4.1 脂質(zhì)輔助荷載他克莫司FK506納米顆粒的制備及性狀表征
        4.4.2 體外胃腸環(huán)境模擬納米載體中他克莫司FK506藥物釋放
        4.4.3 陽離子脂質(zhì)輔助的納米顆粒CLANs增強結(jié)腸部位顆粒富集
        4.4.4 陽離子脂質(zhì)輔助的納米顆粒CLANs增強結(jié)腸部位粘膜吸附能力
        4.4.5 陽離子脂質(zhì)輔助的納米顆粒CLANs減緩葡聚糖硫酸鈉DSS誘導的結(jié)腸炎惡化程度
        4.4.6 組織學分析陽離子脂質(zhì)輔助的納米顆粒CLANs抑制結(jié)腸組織損傷
    4.5 本章小結(jié)
    參考文獻
附錄一 主要儀器設備
附錄二 常規(guī)試劑
附錄三 主要溶液配制
附錄四 常規(guī)實驗方法
致謝
在讀期間發(fā)表的學術(shù)論文與取得的研究成果


【參考文獻】：
期刊論文
[1]Combination of corticosteroids and 5-aminosalicylates or corticosteroids alone for patients with moderate-severe active ulcerative colitis: A global survey of physicians’ practice[J]. Shomron Ben-Horin,Jane M Andrews,Konstantinos H Katsanos,Florian Rieder,Flavio Steinwurz,Konstantinos Karmiris,Jae Hee Cheon,Gordon William Moran,Monica Cesarini,Christian D Stone,Doron Schwartz,Marijana Protic,Xavier Roblin,Giulia Roda,Min-Hu Chen,Ofir Har-Noy,Charles N Bernstein.  World Journal of Gastroenterology. 2017(16)
[2]Molecular mechanism of action of anti-tumor necrosis factor antibodies in inflammatory bowel diseases[J]. Ulrike Billmeier,Walburga Dieterich,Markus F Neurath,Raja Atreya.  World Journal of Gastroenterology. 2016(42)



本文編號：3195416