為通過(guò)化學(xué)方法合成一種天然酶的模擬物以克服天然酶存在的一些固有的缺陷,本實(shí)驗(yàn)以六大酶類中的絲氨酸水解酶類作為要模擬的對(duì)象,以較簡(jiǎn)單的顯色底物對(duì)硝基苯酚乙酸酯作為該模擬酶的催化底物,通過(guò)控制變量法分別考察了不同的溫度、pH值、底物濃度、復(fù)合材料的濃度對(duì)催化活性的影響。天然水解酶的活性中心一般含有直接參與催化過(guò)程的催化基團(tuán)（催化三聯(lián)體（S、H、E/D））和與底物結(jié)合的結(jié)合基團(tuán),并且這些氨基酸殘基通過(guò)肽鏈的盤曲折疊在空間上相互靠近。但也有研究表明在小肽序列中引入水解酶催化三聯(lián)體三個(gè)催化基團(tuán)之一的組氨酸時(shí),小肽自組裝形成纖維也能起到催化作用。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)研究將含催化基團(tuán)組氨酸（H）的和結(jié)合基團(tuán)色氨酸（W）的小肽連接到介孔硅納米材料表面來(lái)模擬水解酶,對(duì)比不同復(fù)合材料的催化活性,得到最理想的模擬酶模擬物并測(cè)定其催化效果最好時(shí)的反應(yīng)條件。首先合成介孔硅并進(jìn)行氨基化,然后利用EDC/NHS方法將小肽的羧基與介孔硅表面氨基耦連生成酰胺鍵,從而將小肽固定到介孔硅上,并進(jìn)行了連接效率的優(yōu)化,得到在0.03 MEDC,pH 6.5,EDC:NHS:Peptide-COOH=30:10:1條件下反應(yīng)24 h時(shí)的連... 

【文章來(lái)源】：天津科技大學(xué)天津市

【文章頁(yè)數(shù)】：55 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

一，質(zhì)子轉(zhuǎn)移示意圖閱

?Ｓｕｒｆａｃｅ?ｃｈａｒｇｅ?ｔｕｎｉｎｇ???Ｐｅｐｔｉｄｅｓ??圖１－２介孔硅裝載藥物和復(fù)合生物分子／其它材料的示意圖１１２６１??Ｆｉｇｕｒｅ?１－２?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ｍｅｓｏｐｏｒｏｕｓ?ｓｉｌｉｃａ?ｌｏａｄｉｎｇ?ｄｒｕｇｓ?ａｎｄ?ｂｉｎｄｉｎｇ?ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ／ｃｏｍｐｏｓｉｔｅｓ．??１．４肽??肽是由兩個(gè)或多個(gè)氨基酸通過(guò)一個(gè)氨基酸的氨基與另一個(gè)氨基酸的羧基結(jié)合而??成的化合物。是機(jī)體完成各種復(fù)雜的生理活性必不可少的參與者。所有細(xì)胞都能合成??多肽物質(zhì)，其功能活動(dòng)也受多肽的調(diào)節(jié)。它涉及激素、祌經(jīng)、細(xì)胞生長(zhǎng)和生殖各領(lǐng)域，??其重要性在于調(diào)節(jié)體內(nèi)各個(gè)系統(tǒng)器官和細(xì)胞。分子量在１０？５０之間的稱為小肽、寡??肽、低聚肽，２？１０肽屬于諱肽，１０？５０肽屬于多肽。??１．５氨基與羧基耦連反應(yīng)??生物分子例如Ｉ）ＮＡ和抗體可以通過(guò)兩種方式固定在納米顆粒表面：物理吸附或??共價(jià)連接。共價(jià)連接的方法因其生物耦連過(guò)程的穩(wěn)定性和特異性而更合適。巰坫，氨??基和羧基功能基團(tuán)是表面修飾的關(guān)鍵基團(tuán)，而氨基是最常用的。在納米顆粒表而引入??氨基的方法一種是“一步法”。另一種方法是“兩步法”，在介孔．氧化硅形成后加入３－??氨丙基三乙氧基硅烷。介孔二氧化硅與識(shí)別分子之間可以使州耦合劑ＥＤＣ／ＮＨＳ形成??穩(wěn)定的酰胺鍵。??本實(shí)驗(yàn)過(guò)程中采取“兩步法”兩步法，小肽丨：游離的羧基與ＥＤＣ反應(yīng)生成不??穩(wěn)定的中間產(chǎn)物〇?—酰基脲

?５００??溫度（°Ｃ）??圖３－３介孔硅、氨基化的介孔硅、肽－介孔硅復(fù)合材料的熱解重量分析曲線??Ｆｉｇｕｒｅ３－３?Ｔｈｅ?Ｔｈｅｒｍｏｇｒａｖｉｍｅｔｒｉｃ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ＭＳＮｓｘ?ＭＳＮ－ＮＨ２?ａｎｄ?ＭＳＮ－ＮＨ２／Ｐｅｐｔｉｄｅ．??２０??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]基于EDC/sulfo-NHS的羧基化SPIO表面抗體耦聯(lián)[J]. 劉琳,張小強(qiáng),張宇,浦躍樸,尹立紅,劉卉,徐靚,楊文倩,徐春雨.  南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2013(04)

碩士論文
[1]功能介孔二氧化硅材料的制備、表征及應(yīng)用[D]. 周黃歆.廣西師范大學(xué) 2014



本文編號(hào)：3007923