菠蘿蛋白酶,具有酯鍵和酰胺鍵的特性,其水解能力強(qiáng),生物活性高,被普遍應(yīng)用于食品、藥品、飼料等多個(gè)方面。但是,由于植物細(xì)胞結(jié)構(gòu)復(fù)雜,含有許多復(fù)雜的有機(jī)化合物,如酚類、色素、多糖等,對(duì)高純度和高活性菠蘿蛋白酶的提取造成影響,因此,研發(fā)一種新型的菠蘿蛋白酶分離純化的方法具有重要意義。本論文主要制備了三種磁性納米材料,通過透射電鏡（TEM）、熱重分析（TGA）、X-射線衍射（XRD）、磁滯回線（VSM）和傅里葉變換紅外（FT-IR）對(duì)材料的形貌和性能進(jìn)行表征,并將其用于分離純化菠蘿蛋白酶,具體內(nèi)容如下:（1）設(shè)計(jì)合成了溫敏性磁性微球Fe₃O₄@P（GMA-co-NIPAM）/IDA/Ni²⁺,對(duì)其形貌及結(jié)構(gòu)進(jìn)行表征。優(yōu)化了該材料與菠蘿蛋白酶之間的吸附條件如溫度、pH、時(shí)間等參數(shù),得到該磁性微球?qū)Σぬ}蛋白酶的最佳吸附量為117 mg/g。將達(dá)到吸附平衡的Fe₃O₄@P（GMA-co-NIPAM）/IDA/Ni²⁺與菠蘿蛋白酶混合液在70℃條件下變性10 min,室溫... 

【文章來(lái)源】：江蘇大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】：97 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

IgG檢測(cè)的競(jìng)爭(zhēng)性免疫測(cè)定的示意圖

(a) (b)圖 1.2 (a) 石墨烯；(b)氧化石墨烯Figure 1.2 (a) Graphene; (b) Graphene oxide1.2.2.3 磁性氧化石墨烯功能復(fù)合材料在分離富集方面的應(yīng)用Hao Jing 等[71]制備了一種磁性氧化石墨烯復(fù)合材料（Go-Co-NH-Fe3O4）用于吸附胰蛋白酶，該材料可通過氫鍵相互作用連接胰蛋白酶分子，得出最終的吸附量為 0.275 mg/mg。Xiniang Hu 等[72]優(yōu)化了磺化 GO@Fe3O4復(fù)合材料與 Cu2+之間的吸附條件，發(fā)現(xiàn)吸附量在 Cu2+初始濃度為 73.71 mg/L，pH 等于 4.68，溫度為 50℃的條件下達(dá)到最優(yōu)，約為 62.73 mg/g。呂生華等[73]利用反相乳液交聯(lián)法設(shè)計(jì)合成了一種殼聚糖與 GO@Fe3O4的復(fù)合材料（MCGO），用于吸附水溶液中的甲基橙。發(fā)現(xiàn)，吸附量在 GO 含量為 5 wt%，MCGO 用量為 60 mg，吸附時(shí)間為 2 h，pH 等于 5 時(shí)，吸附量達(dá)到最優(yōu)，約為 164.79 mg/g。

江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文在當(dāng)?shù)爻匈?gòu)買新鮮的菲律賓進(jìn)口菠蘿，清洗干凈后，剝皮，置于冰箱中預(yù)冷 12 h，將菠蘿皮與磷酸鹽緩沖液按照 1:1 的比例進(jìn)行榨汁，然后保持 10 min后，過濾，將濾液倒入 10 mL 離心管中，在 6000 r/min 離心機(jī)中離心 20 min，溫度設(shè)置為 4℃，上清液放入-18℃冰箱中保存。2.3.6.2 磁性材料 Fe3O4@P(GMA-co-NIPAM)/IDA/Ni2+的應(yīng)用如圖 2.1 所示，量取 0.2 mg Fe3O4@P(GMA-co-NIPAM)/IDA/Ni2+分散于 300μL 菠蘿皮粗提液中，在 30℃恒溫震蕩箱中孵育 30 min 后，借助磁性將吸附劑材料與粗提液分離，使用 0.2 M 的磷酸鹽緩沖液（pH=4, 1 M NaCl）對(duì)材料進(jìn)行洗脫，在 40℃恒溫震蕩箱中震蕩 30 min 后磁分離產(chǎn)物，保留上清液分析凝膠電泳。


本文編號(hào)：2975844