過(guò)氧化物納米酶的功能化及其應(yīng)用于食品中抗生素的檢測(cè)
發(fā)布時(shí)間:2021-01-11 15:13
納米酶是具有內(nèi)在生物酶樣特性的一類納米材料。因其在解決生物酶易變性、成本高、提純困難、難以大量制備等固有缺陷方面表現(xiàn)出巨大的潛力,受到研究者的高度關(guān)注。因食物樣品基質(zhì)的復(fù)雜性,食品中有害物質(zhì)的檢測(cè)長(zhǎng)期以來(lái)困擾著研究者,開(kāi)發(fā)一種簡(jiǎn)單可靠、靈敏度高的食品有害物質(zhì)分析方法依舊具有挑戰(zhàn)性。令人興奮的是,納米酶已經(jīng)開(kāi)始為解決食品安全方面的一些挑戰(zhàn)提供機(jī)會(huì)。利用納米酶構(gòu)建生物傳感器,為檢測(cè)食品污染物提供了廉價(jià)、方便、高效、快速、靈敏的檢測(cè)手段。與傳統(tǒng)方法相比,納米酶生物傳感器具有選擇性高、靈敏度高、目標(biāo)識(shí)別特異性強(qiáng)、檢測(cè)時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn)。本文選擇貴金屬納米簇和金屬有機(jī)骨架材料(MOFs)模擬過(guò)氧化物酶活性,通過(guò)表面修飾貴金屬納米顆粒用以模擬抗體,提高納米酶的催化活性和目標(biāo)特異性,開(kāi)發(fā)了三種食品中抗生素的定量分析方法,分別檢測(cè)了四環(huán)素類(TCs)抗生素、氯霉素(CAP)、甲硝唑(MNZ)。具體工作如下:(1)基于金納米團(tuán)簇(AuNCs)固有的類過(guò)氧化物酶活性,使用了 TCs特異性適配體(Apt)來(lái)提高AuNCs對(duì)過(guò)氧化物酶底物3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)的催化活性,并建立了 TCs的比色檢...
【文章來(lái)源】:南昌大學(xué)江西省 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:88 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖2.1用于比色檢測(cè)TCs的適配體傳感器的原理圖
第2章基于適配體提高金納米團(tuán)簇的酶活性和選擇性構(gòu)建比色法檢測(cè)四環(huán)素類抗生素??1-2-??卜_?n議??。+4:_?;?I?I?1??q?q?■?I?m?H?I???'?屬??Blank?Paraffin?Petrolatum?Unguent??圖2.2與石蠟、黃色凡士林油和軟膏共同孵育的AuNCs-Apt/TMB/H202體系在652nm處的??吸光度。插圖:對(duì)應(yīng)的照片。所有測(cè)量均在室溫下的HAc-NaAc緩沖液(0.20?M,?pH?3.8)中??孵育90?min后進(jìn)行。??2.2.6牛奶中四環(huán)素類抗生素的定量評(píng)測(cè)??液態(tài)奶和奶粉在當(dāng)?shù)爻匈?gòu)買。在檢測(cè)前,通過(guò)一個(gè)簡(jiǎn)單的預(yù)處理過(guò)程[97]。??首先,將0.5?g奶粉溶解在1.0?mL的超純水中。為去除蛋白質(zhì),加入1.5?mL乙??腈,搖晃lOmin,振蕩均勾。取出后,以12000rpm離心20min,用注射器抽取??上清液,用0.22?的過(guò)濾器過(guò)濾,濾液稀釋至10?mL進(jìn)行分析。液態(tài)奶的預(yù)處??理過(guò)程是基本一致,除了第一步?jīng)]有用超純水稀釋。??在牛奶中檢測(cè)TCs的后續(xù)程序與在藥物中檢測(cè)TCs的程序相同。??2.3結(jié)果與討論??2.3.1?AuNCs-Apt?的表征??AuNCs-Apt是通過(guò)簡(jiǎn)單地混合AuNCs和Apt制備的。TEM圖像顯示,獲得??的AuNCs-Apt近似球形粒子的平均尺寸為1.86?nm?(圖2.3?B和D),這比裸AuNCs??(1.77?nm)(圖2.3?A和C)稍大。相應(yīng)的高分辨透射電鏡(HRTEM)圖像顯示晶格間??距為0.15?nm,對(duì)應(yīng)于Au?(220)晶面[98](插圖2.3?B),而該晶面在裸AuNCs的??HRTEM圖像(插圖
第2章基于適配體提高金納米團(tuán)簇的酶活性和選擇性構(gòu)建比色法檢測(cè)四環(huán)素類抗生素??電斥力。??C?;?;?^?D?4?,?1??3=:1*77r?!?W"?3=1.86nmJi|??Jk?'??11〇%^?/I?>?i?t?I??〇。?.........?0%?賢鐵^??1?2?3?^?1?2?3??Size(nm)?Sl2e{nm)??圖2.3(八)八111^5和(8)八11>^:5-八91的蛾1\4圖像。在每張圖像中,插圖是^11^£1^圖像。??(C)?AuNCs和(D)AuNCs?-?Apt的大小分布直方圖。??圖2.4為有無(wú)Apt存在時(shí)AuNCs的FT-IR光譜圖。AuNCs-Apt在1259和??1093?cm-1處的特征吸收帶被觀察到,這分別歸因于磷酸基的反對(duì)稱和對(duì)稱伸縮??振動(dòng),表明Apt被成功地修飾到AuNCs表面[99]。此外,與AuNCs結(jié)合后,Apt堿??基中C=N伸縮振動(dòng)對(duì)應(yīng)的峰值[_從1648cm-1偏移至1637cm-1處,表明Apt的??堿基與AuNCs之間存在相互作用,是形成AuNCs-Apt的主要原因。為了更好的??理解Apt和AuNCs之間的結(jié)合方式,本研究進(jìn)行了?XPS分析(圖2.5和2.6)。從??圖2.5中可以看出,AuNCs-Apt的XPS光譜顯示了其中的C、0、N、P和Au元??素,其中P元素完全來(lái)自于Apt。圖2顯示了?AuNCs-Apt和裸AuNCs的高分辨??率反褶積對(duì)比。對(duì)于裸AuNCs,結(jié)合能88.1和88.7eV分別對(duì)應(yīng)于Au4f7/2能級(jí)??中的Au(0)和Au(I)物種(圖2.6A),而結(jié)合能84.4
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Peroxidase-like properties of Ruthenium nanoframes[J]. Haihang Ye,Jacob Mohar,Qingxiao Wang,Massimo Catalano,Moon J.Kim,Xiaohu Xia. Science Bulletin. 2016(22)
[2]HPLC法測(cè)定原料乳中慶大霉素殘留的研究[J]. 趙靜,劉婷,蔡柏巖,劉鵬,錢鐳. 食品研究與開(kāi)發(fā). 2015(09)
[3]護(hù)士在促進(jìn)合理使用抗菌藥物中的作用[J]. 秦立新. 中國(guó)社區(qū)醫(yī)師(醫(yī)學(xué)專業(yè)). 2010(17)
本文編號(hào):2971007
【文章來(lái)源】:南昌大學(xué)江西省 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:88 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖2.1用于比色檢測(cè)TCs的適配體傳感器的原理圖
第2章基于適配體提高金納米團(tuán)簇的酶活性和選擇性構(gòu)建比色法檢測(cè)四環(huán)素類抗生素??1-2-??卜_?n議??。+4:_?;?I?I?1??q?q?■?I?m?H?I???'?屬??Blank?Paraffin?Petrolatum?Unguent??圖2.2與石蠟、黃色凡士林油和軟膏共同孵育的AuNCs-Apt/TMB/H202體系在652nm處的??吸光度。插圖:對(duì)應(yīng)的照片。所有測(cè)量均在室溫下的HAc-NaAc緩沖液(0.20?M,?pH?3.8)中??孵育90?min后進(jìn)行。??2.2.6牛奶中四環(huán)素類抗生素的定量評(píng)測(cè)??液態(tài)奶和奶粉在當(dāng)?shù)爻匈?gòu)買。在檢測(cè)前,通過(guò)一個(gè)簡(jiǎn)單的預(yù)處理過(guò)程[97]。??首先,將0.5?g奶粉溶解在1.0?mL的超純水中。為去除蛋白質(zhì),加入1.5?mL乙??腈,搖晃lOmin,振蕩均勾。取出后,以12000rpm離心20min,用注射器抽取??上清液,用0.22?的過(guò)濾器過(guò)濾,濾液稀釋至10?mL進(jìn)行分析。液態(tài)奶的預(yù)處??理過(guò)程是基本一致,除了第一步?jīng)]有用超純水稀釋。??在牛奶中檢測(cè)TCs的后續(xù)程序與在藥物中檢測(cè)TCs的程序相同。??2.3結(jié)果與討論??2.3.1?AuNCs-Apt?的表征??AuNCs-Apt是通過(guò)簡(jiǎn)單地混合AuNCs和Apt制備的。TEM圖像顯示,獲得??的AuNCs-Apt近似球形粒子的平均尺寸為1.86?nm?(圖2.3?B和D),這比裸AuNCs??(1.77?nm)(圖2.3?A和C)稍大。相應(yīng)的高分辨透射電鏡(HRTEM)圖像顯示晶格間??距為0.15?nm,對(duì)應(yīng)于Au?(220)晶面[98](插圖2.3?B),而該晶面在裸AuNCs的??HRTEM圖像(插圖
第2章基于適配體提高金納米團(tuán)簇的酶活性和選擇性構(gòu)建比色法檢測(cè)四環(huán)素類抗生素??電斥力。??C?;?;?^?D?4?,?1??3=:1*77r?!?W"?3=1.86nmJi|??Jk?'??11〇%^?/I?>?i?t?I??〇。?.........?0%?賢鐵^??1?2?3?^?1?2?3??Size(nm)?Sl2e{nm)??圖2.3(八)八111^5和(8)八11>^:5-八91的蛾1\4圖像。在每張圖像中,插圖是^11^£1^圖像。??(C)?AuNCs和(D)AuNCs?-?Apt的大小分布直方圖。??圖2.4為有無(wú)Apt存在時(shí)AuNCs的FT-IR光譜圖。AuNCs-Apt在1259和??1093?cm-1處的特征吸收帶被觀察到,這分別歸因于磷酸基的反對(duì)稱和對(duì)稱伸縮??振動(dòng),表明Apt被成功地修飾到AuNCs表面[99]。此外,與AuNCs結(jié)合后,Apt堿??基中C=N伸縮振動(dòng)對(duì)應(yīng)的峰值[_從1648cm-1偏移至1637cm-1處,表明Apt的??堿基與AuNCs之間存在相互作用,是形成AuNCs-Apt的主要原因。為了更好的??理解Apt和AuNCs之間的結(jié)合方式,本研究進(jìn)行了?XPS分析(圖2.5和2.6)。從??圖2.5中可以看出,AuNCs-Apt的XPS光譜顯示了其中的C、0、N、P和Au元??素,其中P元素完全來(lái)自于Apt。圖2顯示了?AuNCs-Apt和裸AuNCs的高分辨??率反褶積對(duì)比。對(duì)于裸AuNCs,結(jié)合能88.1和88.7eV分別對(duì)應(yīng)于Au4f7/2能級(jí)??中的Au(0)和Au(I)物種(圖2.6A),而結(jié)合能84.4
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Peroxidase-like properties of Ruthenium nanoframes[J]. Haihang Ye,Jacob Mohar,Qingxiao Wang,Massimo Catalano,Moon J.Kim,Xiaohu Xia. Science Bulletin. 2016(22)
[2]HPLC法測(cè)定原料乳中慶大霉素殘留的研究[J]. 趙靜,劉婷,蔡柏巖,劉鵬,錢鐳. 食品研究與開(kāi)發(fā). 2015(09)
[3]護(hù)士在促進(jìn)合理使用抗菌藥物中的作用[J]. 秦立新. 中國(guó)社區(qū)醫(yī)師(醫(yī)學(xué)專業(yè)). 2010(17)
本文編號(hào):2971007
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