發(fā)布時(shí)間：2020-12-21 12:01

　　納米銀（AgNPs）由于其獨(dú)特的抗菌性能在許多領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。隨著AgNPs生產(chǎn)和應(yīng)用的增加,人們?cè)絹?lái)越關(guān)注其生態(tài)與健康風(fēng)險(xiǎn)。已有研究證明,AgNPs會(huì)對(duì)生物的多種系統(tǒng)及其功能產(chǎn)生影響。但關(guān)于AgNPs對(duì)生物神經(jīng)系統(tǒng)方面的影響的報(bào)道卻比較少,AgNPs的神經(jīng)毒性效應(yīng)及機(jī)制有待深入研究。為了探究AgNPs對(duì)斑馬魚(yú)（Danio rerio）的神經(jīng)毒性效應(yīng)及機(jī)制,本文根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)和AgNPs對(duì)斑馬魚(yú)96 h半致死濃度（283.13μg/L）,設(shè)置暴露濃度為0、50和100μg/L,在暴露30天后剖取斑馬魚(yú)腦組織進(jìn)行相關(guān)研究。首先,通過(guò)電感耦合等離子體質(zhì)譜儀（ICP-MS）和H.E染色法檢測(cè)腦組織中的Ag⁺含量及其引起的組織結(jié)構(gòu)損傷。然后,通過(guò)分析抗氧化酶活性（T-SOD和CAT）和炎性因子相關(guān)基因（il-1β、il-8、il-6和tnf-α）mRNA表達(dá)量探討AgNPs誘導(dǎo)的神經(jīng)毒性效應(yīng)。最后,通過(guò)評(píng)價(jià)神經(jīng)遞質(zhì)γ-氨基丁酸（GABA）的含量、分析GABA代謝通路關(guān)鍵基因（gabra1、gat1、abat和gad1）和癲癇標(biāo)志物c-fos基因的mRNA表達(dá),探究GA... 

【文章來(lái)源】：山西大學(xué)山西省

【文章頁(yè)數(shù)】：67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

本論文的總體研究方案

第二章 Ag NPs 暴露對(duì)斑馬魚(yú)腦組織結(jié)構(gòu)的損傷在 30 mg 斑馬魚(yú)腦組織中加入 300 μL HNO3 和 H2O2（3:1）混合溶液，于 90 ℃消解 6 h，定容到 1 mL，通過(guò)日本島津 2030 型 ICP-MS 檢測(cè) Ag 含量，以銦（In）元素為內(nèi)標(biāo)。2.4.3 組織病理學(xué)分析暴露結(jié)束后，通過(guò)石蠟切片觀察斑馬魚(yú)腦組織形態(tài)。具體步驟如圖 2.1 所示：

第二章AgNPs暴露對(duì)斑馬魚(yú)腦組織結(jié)構(gòu)的損傷15圖2.2不同濃度AgNPs處理對(duì)斑馬魚(yú)腦組織結(jié)構(gòu)的影響（×400）白色方框：炎性浸潤(rùn)；三角形：空泡化；紅色箭頭：血栓Figure2.2EffectofAgNPsexposureonhistopathologicalstructureofbraininzebrafish(×400)Whitebox:Inflammatorycells,Triangle:Cavitation,Redarrow:Thrombus4討論AgNPs進(jìn)入生物體是其產(chǎn)生毒性效應(yīng)的前提，因此評(píng)價(jià)AgNPs的神經(jīng)毒性效應(yīng)時(shí)，研究其在腦組織的累積量至關(guān)重要[108]�？茖W(xué)研究中，常見(jiàn)的AgNPs暴露方式包括靜脈注射、皮膚接觸、口服和滴鼻等。但不管是何種暴露方式，腦組織都是其靶向性累積的組織之一。已有研究顯示，皮下注射的AgNP可進(jìn)入大鼠的腦部，并以納米顆粒的形式在神經(jīng)元細(xì)胞中累積[112]。在魚(yú)類(lèi)的研究中也得到了相似的結(jié)果。低濃度（10μg/L）AgNPs暴露日本青鳉（Oryziaslatipes）2天，腦組織中的Ag濃度較高，達(dá)到1.5μg/g[111]。PVP包被、粒徑約為10nmAgNPs暴露麥穗魚(yú)（Pseudorasboraparva）10天，腦組織中的Ag濃度比鰓、腸和肌肉中的高[113]。本研究采用PVP包被、粒徑為20nmAgNPs暴露斑馬魚(yú)30天，剖取腦組織進(jìn)行分析，研究結(jié)果同樣表明，AgNPs可進(jìn)入斑馬魚(yú)腦組織，且AgNPs處理組中的Ag積累量呈劑量依賴性增加。斑馬魚(yú)雖是低等的脊椎動(dòng)物，但其結(jié)構(gòu)和功能與哺乳動(dòng)物類(lèi)似，遺傳信息與人


本文編號(hào)：2929792