層粘連蛋白/巖藻聚糖類基膜微環(huán)境的構(gòu)建及微流控芯片內(nèi)應(yīng)用
發(fā)布時(shí)間:2020-12-08 17:43
血管內(nèi)皮層具有天然抗凝血和快速內(nèi)皮化作用。基膜處于內(nèi)皮下層和平滑肌上層,完整基膜結(jié)構(gòu)能夠有效保護(hù)內(nèi)皮層和抑制平滑肌增生,在血管植入材料表面進(jìn)行生物化仿生基膜構(gòu)建能有效地減少植入后的并發(fā)癥。目前,采用具有細(xì)胞結(jié)合位點(diǎn)以及三位空間結(jié)構(gòu)的天然生物大分子進(jìn)行類基膜環(huán)境的仿生構(gòu)建是材料表面生物化及再生醫(yī)學(xué)發(fā)展的一個(gè)重要方向。因此,本文利用具有抗凝血性能及細(xì)胞生長(zhǎng)調(diào)節(jié)作用的多功能蛋白及多糖分子仿生構(gòu)建血管類基膜環(huán)境,并應(yīng)用于微流控芯片研究其對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)行為的影響。論文的主要內(nèi)容如下:(1)利用層層自組裝(LBL)方法將巖藻聚糖硫酸酯(F)、層黏連接蛋白(Ln)通過(guò)靜電吸附固定于APTE硅烷化后的玻片表面,并研究了自組裝薄膜的生物相容性。酸性橙實(shí)驗(yàn)、XPS結(jié)果顯示硅烷化后獲得了富含-NH2的表面,水接觸角顯示組裝薄膜為親水狀態(tài),表面巖藻聚糖含量分析以及QCM-D結(jié)果表明組裝過(guò)程Ln、F增加的質(zhì)量。與氨基化玻片表面相比,LBL薄膜隨著組裝層數(shù)的增加不僅抑制血小板粘附與激活的能力越強(qiáng),其促進(jìn)內(nèi)皮、內(nèi)皮祖細(xì)胞生長(zhǎng)的能力都更好。(2)利用共混固定方法將巖藻聚糖硫酸酯、層黏連接蛋白固定于APTE硅烷化后的玻片表...
【文章來(lái)源】:西南交通大學(xué)四川省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:92 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖1-5層截連蛋白結(jié)構(gòu)
2.?2.?2構(gòu)建方法??研究利用層層自組裝方法,將具有抗凝血功能的巖藻聚糖和基膜主要成分之一的??層點(diǎn)連蛋白進(jìn)行細(xì)胞基底膜的構(gòu)建。具體制備方法如圖2-1所示。??Sonicated?by?Ethanol?and?Deionized?Water???????????t,?Glass??H2S04:H202=7:3.?80'C,?IH????f.??<?‘???OH?H?Glass?.?I??3%APTE,?50'C.?12H?丨?Glass?「I"??Repeat??1?‘?Glass?.?I??■??tPBSrpH3),?LN?mm??EDC/NIIS/MES??1-Ln ̄-?‘Glass?,?I??後?M?PBSjpHS),?F??圖2-1層層自組裝F/Ln微環(huán)境的構(gòu)建示意圖??具體步驟如下:??(1)玻片的制備與清洗:利用玻璃刀將載玻片切割為10*10mm尺寸樣品(Glass,??長(zhǎng)征;
2p峰位在原始玻片Glass,以及G@OH、G@OH@APTE表面峰值都較高,但面組裝Ln后,G@OH@A@Ln表面Si2s、Si2p峰位急劇降低,說(shuō)明樣品表面Ln薄膜降低了原始玻片的Si2s、Si2p峰。??水接觸角結(jié)果及分析??材料表面水接觸角測(cè)試結(jié)果如圖2-6所示,與Glass相比,硅焼化后G@AP品的水接觸角有一定升高,結(jié)果與圖2-4的表述是一致的。由于干凈的玻片是水的,硅焼化引入氨基基團(tuán),使得疏水性增加。層粘連蛋白和巖藻聚糖都是雙分子物質(zhì),其分子組成中含有不同比例的親疏水基團(tuán),且當(dāng)材料表而吸附上不物質(zhì)時(shí)都會(huì)引起材料表面水接觸角的變化,所以吸附Ln和F后的表面水接觸65°C,處于親水狀態(tài)。隨著組裝層數(shù)的增加,表面固定的分子數(shù)量也越來(lái)越多,薄膜的粗糖度增大引起疏水性略有增加,當(dāng)表面組裝數(shù)達(dá)到一定后,表面親達(dá)到穩(wěn)定。但是G@A@5-F樣品的接觸角大于65°C,可能由于當(dāng)吸附量達(dá)到后,改變材料表面的粗鏈度狀態(tài),從而改變材料表面的親疏水狀態(tài)。?????
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]我國(guó)心血管疾病現(xiàn)狀與展望[J]. 姚震,陳林. 海南醫(yī)學(xué). 2013(13)
[2]基于微流控芯片構(gòu)建三維基質(zhì)支架中的腫瘤細(xì)胞侵襲模型[J]. 宋振,蔡紹皙,陳斯佳,晏小清,孫煒,盧斯媛. 科學(xué)通報(bào). 2012(23)
[3]Outline of the Report on Cardiovascular Disease in China,2010[J]. National Center for Cardiovascular Disease,China HU Sheng Shou 1,KONG Ling Zhi 2,GAO Run Lin 1,ZHU Man Lu 1,WANG Wen 1,WANG Yong Jun 3,WU Zhao Su 4,CHEN Wei Wei 1,LIU Ming Bo 1 1.National Center For Cardiovascular Diseases,Beijing 100037,China;2.Ministry of Health of the People’ Republic of China,Beijing 100044,China;3.Beijing Tiantan Hospital,Beijing 100050,China;4.Beijing Anzhen Hospital,Beijing 100029,China. Biomedical and Environmental Sciences. 2012(03)
[4]Study on Antithrombotic and Antiplatelet Activities of Low Molecular Weight Fucoidan from Laminaria japonica[J]. CHEN Anjin 1), 3), ZHANG Fang 3), SHI Jie 1), 3), and ZHAO Xue 2),* 1) School of Medicine and Pharmacy, Ocean University of China, Qingdao 266003, P. R. China 2) College of Food Science and Technology, Qingdao 266003, P. R. China 3) Qingdao Municipal hospital, No.1, Jiaozhou Road, Qingdao 266071, P. R. China. Journal of Ocean University of China. 2012(02)
[5]基于微流控芯片構(gòu)建一種新的體外血管生成模型[J]. 戴小珍,蔡紹皙,葉群芳,蔣稼歡,晏小清,熊新,江奇峰,WANG Albert Chih-Lueh,譚毅. 科學(xué)通報(bào). 2011(27)
[6]預(yù)防心血管病走路比服藥更管用[J]. 盧文潔. 甘肅林業(yè). 2011(03)
[7]抗凝血生物材料[J]. 何淑漫,周健. 化學(xué)進(jìn)展. 2010(04)
[8]藥物洗脫支架與晚期支架血栓形成[J]. 喬巖,馬長(zhǎng)生. 臨床心血管病雜志. 2008(01)
[9]自由基氧化法制備海帶巖藻聚糖硫酸酯的抗凝血活性[J]. 趙雪,傅海艦,薛長(zhǎng)湖,苗本春,付雪艷. 中國(guó)水產(chǎn)科學(xué). 2007(06)
[10]藥物支架晚期血栓[J]. 劉長(zhǎng)紅,劉毅,趙樹(shù)武. 心血管病學(xué)進(jìn)展. 2007(03)
博士論文
[1]Ti表面固定層粘連蛋白/肝素/SDF-1α以構(gòu)建抗凝及誘導(dǎo)內(nèi)皮再生微環(huán)境的研究[D]. 劉濤.西南交通大學(xué) 2014
[2]不同分子質(zhì)量海帶巖藻聚糖硫酸酯抗血栓活性及機(jī)理研究[D]. 陳安進(jìn).中國(guó)海洋大學(xué) 2012
碩士論文
[1]微流控芯片的設(shè)計(jì)制備及用于內(nèi)皮祖細(xì)胞生長(zhǎng)行為的研究[D]. 朱曉華.西南交通大學(xué) 2014
[2]Ti表面構(gòu)建肝素—纖連蛋白-VEGF生物功能層及抗凝/誘導(dǎo)內(nèi)皮化評(píng)價(jià)[D]. 王雪.西南交通大學(xué) 2014
[3]玻璃表面修飾的基底材料對(duì)細(xì)胞粘附研究[D]. 相森.北京化工大學(xué) 2012
[4]載體表面化學(xué)組成對(duì)蛋白質(zhì)吸附行為的影響[D]. 萬(wàn)容兵.浙江理工大學(xué) 2010
[5]鈦氧薄膜材料表面層粘連蛋白與纖連蛋白聯(lián)合固定以及內(nèi)皮化研究[D]. 樊珊.西南交通大學(xué) 2008
[6]鈦氧薄膜材料表面層粘連蛋白修飾以及內(nèi)皮化研究[D]. 葛勝男.西南交通大學(xué) 2007
本文編號(hào):2905434
【文章來(lái)源】:西南交通大學(xué)四川省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:92 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖1-5層截連蛋白結(jié)構(gòu)
2.?2.?2構(gòu)建方法??研究利用層層自組裝方法,將具有抗凝血功能的巖藻聚糖和基膜主要成分之一的??層點(diǎn)連蛋白進(jìn)行細(xì)胞基底膜的構(gòu)建。具體制備方法如圖2-1所示。??Sonicated?by?Ethanol?and?Deionized?Water???????????t,?Glass??H2S04:H202=7:3.?80'C,?IH????f.??<?‘???OH?H?Glass?.?I??3%APTE,?50'C.?12H?丨?Glass?「I"??Repeat??1?‘?Glass?.?I??■??tPBSrpH3),?LN?mm??EDC/NIIS/MES??1-Ln ̄-?‘Glass?,?I??後?M?PBSjpHS),?F??圖2-1層層自組裝F/Ln微環(huán)境的構(gòu)建示意圖??具體步驟如下:??(1)玻片的制備與清洗:利用玻璃刀將載玻片切割為10*10mm尺寸樣品(Glass,??長(zhǎng)征;
2p峰位在原始玻片Glass,以及G@OH、G@OH@APTE表面峰值都較高,但面組裝Ln后,G@OH@A@Ln表面Si2s、Si2p峰位急劇降低,說(shuō)明樣品表面Ln薄膜降低了原始玻片的Si2s、Si2p峰。??水接觸角結(jié)果及分析??材料表面水接觸角測(cè)試結(jié)果如圖2-6所示,與Glass相比,硅焼化后G@AP品的水接觸角有一定升高,結(jié)果與圖2-4的表述是一致的。由于干凈的玻片是水的,硅焼化引入氨基基團(tuán),使得疏水性增加。層粘連蛋白和巖藻聚糖都是雙分子物質(zhì),其分子組成中含有不同比例的親疏水基團(tuán),且當(dāng)材料表而吸附上不物質(zhì)時(shí)都會(huì)引起材料表面水接觸角的變化,所以吸附Ln和F后的表面水接觸65°C,處于親水狀態(tài)。隨著組裝層數(shù)的增加,表面固定的分子數(shù)量也越來(lái)越多,薄膜的粗糖度增大引起疏水性略有增加,當(dāng)表面組裝數(shù)達(dá)到一定后,表面親達(dá)到穩(wěn)定。但是G@A@5-F樣品的接觸角大于65°C,可能由于當(dāng)吸附量達(dá)到后,改變材料表面的粗鏈度狀態(tài),從而改變材料表面的親疏水狀態(tài)。?????
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]我國(guó)心血管疾病現(xiàn)狀與展望[J]. 姚震,陳林. 海南醫(yī)學(xué). 2013(13)
[2]基于微流控芯片構(gòu)建三維基質(zhì)支架中的腫瘤細(xì)胞侵襲模型[J]. 宋振,蔡紹皙,陳斯佳,晏小清,孫煒,盧斯媛. 科學(xué)通報(bào). 2012(23)
[3]Outline of the Report on Cardiovascular Disease in China,2010[J]. National Center for Cardiovascular Disease,China HU Sheng Shou 1,KONG Ling Zhi 2,GAO Run Lin 1,ZHU Man Lu 1,WANG Wen 1,WANG Yong Jun 3,WU Zhao Su 4,CHEN Wei Wei 1,LIU Ming Bo 1 1.National Center For Cardiovascular Diseases,Beijing 100037,China;2.Ministry of Health of the People’ Republic of China,Beijing 100044,China;3.Beijing Tiantan Hospital,Beijing 100050,China;4.Beijing Anzhen Hospital,Beijing 100029,China. Biomedical and Environmental Sciences. 2012(03)
[4]Study on Antithrombotic and Antiplatelet Activities of Low Molecular Weight Fucoidan from Laminaria japonica[J]. CHEN Anjin 1), 3), ZHANG Fang 3), SHI Jie 1), 3), and ZHAO Xue 2),* 1) School of Medicine and Pharmacy, Ocean University of China, Qingdao 266003, P. R. China 2) College of Food Science and Technology, Qingdao 266003, P. R. China 3) Qingdao Municipal hospital, No.1, Jiaozhou Road, Qingdao 266071, P. R. China. Journal of Ocean University of China. 2012(02)
[5]基于微流控芯片構(gòu)建一種新的體外血管生成模型[J]. 戴小珍,蔡紹皙,葉群芳,蔣稼歡,晏小清,熊新,江奇峰,WANG Albert Chih-Lueh,譚毅. 科學(xué)通報(bào). 2011(27)
[6]預(yù)防心血管病走路比服藥更管用[J]. 盧文潔. 甘肅林業(yè). 2011(03)
[7]抗凝血生物材料[J]. 何淑漫,周健. 化學(xué)進(jìn)展. 2010(04)
[8]藥物洗脫支架與晚期支架血栓形成[J]. 喬巖,馬長(zhǎng)生. 臨床心血管病雜志. 2008(01)
[9]自由基氧化法制備海帶巖藻聚糖硫酸酯的抗凝血活性[J]. 趙雪,傅海艦,薛長(zhǎng)湖,苗本春,付雪艷. 中國(guó)水產(chǎn)科學(xué). 2007(06)
[10]藥物支架晚期血栓[J]. 劉長(zhǎng)紅,劉毅,趙樹(shù)武. 心血管病學(xué)進(jìn)展. 2007(03)
博士論文
[1]Ti表面固定層粘連蛋白/肝素/SDF-1α以構(gòu)建抗凝及誘導(dǎo)內(nèi)皮再生微環(huán)境的研究[D]. 劉濤.西南交通大學(xué) 2014
[2]不同分子質(zhì)量海帶巖藻聚糖硫酸酯抗血栓活性及機(jī)理研究[D]. 陳安進(jìn).中國(guó)海洋大學(xué) 2012
碩士論文
[1]微流控芯片的設(shè)計(jì)制備及用于內(nèi)皮祖細(xì)胞生長(zhǎng)行為的研究[D]. 朱曉華.西南交通大學(xué) 2014
[2]Ti表面構(gòu)建肝素—纖連蛋白-VEGF生物功能層及抗凝/誘導(dǎo)內(nèi)皮化評(píng)價(jià)[D]. 王雪.西南交通大學(xué) 2014
[3]玻璃表面修飾的基底材料對(duì)細(xì)胞粘附研究[D]. 相森.北京化工大學(xué) 2012
[4]載體表面化學(xué)組成對(duì)蛋白質(zhì)吸附行為的影響[D]. 萬(wàn)容兵.浙江理工大學(xué) 2010
[5]鈦氧薄膜材料表面層粘連蛋白與纖連蛋白聯(lián)合固定以及內(nèi)皮化研究[D]. 樊珊.西南交通大學(xué) 2008
[6]鈦氧薄膜材料表面層粘連蛋白修飾以及內(nèi)皮化研究[D]. 葛勝男.西南交通大學(xué) 2007
本文編號(hào):2905434
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