發(fā)布時間：2020-09-21 15:21

　　 苦丁茶是我國民間食藥兩用植物,歷史悠久,植物種源繁多,含有多種化學成分,主要包括三萜及甙類化合物、多酚類化合物、黃酮類化合物、氨基酸、香氣、揮發(fā)油等。熊果酸在冬青科苦丁茶中含量較高,是一種五環(huán)三萜類化合物,具有抗癌、護肝、抗菌消炎和抗病毒等生物活性。但由于熊果酸水溶性差,生物利用度低,限制了其在生物醫(yī)學上的應用。因此本論文運用超聲波輔助離子液體法從苦丁茶中提取熊果酸,并對其進行純化,再利用乳化溶劑蒸發(fā)法制備熊果酸納米粒,考察其理化性質和生物利用度改善情況。運用超聲波輔助離子液體法從苦丁茶中提取熊果酸時,首先考察了不同提取溶劑對提取率的影響,接著對影響提取率的主要因素:離子液體濃度、料液比、超聲功率、超聲溫度、超聲時間進行單因素優(yōu)化實驗,得到熊果酸提取的最優(yōu)工藝參數(shù):溴化-辛基-3-甲基咪唑([OMIM]Br)濃度為0.4 mol/L,料液比1:40,超聲功率500 W,超聲溫度40 ℃,超聲時間30 min;平均提取率為2.41 ± 0.35 mg/g。利用萃取法對提取物進行初步純化,得到熊果酸粗提物的含量為29.89 ± 2.23%在反溶劑重結晶法純化熊果酸的實驗中,運用單因素實驗,考察粗提物濃度、溶劑與反溶劑體積比、沉積溫度、攪拌時間、攪拌速度對熊果酸含量的影響,得到熊果酸純化的最優(yōu)工藝參數(shù):粗提物濃度50 mg/mL,溶劑與反溶劑體積比為1:6,沉積溫度40°C,攪拌時間1 min,攪拌速度1500 r/min;純化后的熊果酸含量達到92.18 ±1.87%。結合乳化溶劑蒸發(fā)法和冷凍干燥法制備熊果酸納米粒,此工藝不僅減小了熊果酸的粒徑,而且使熊果酸納米粒轉化為無定形態(tài)。在實驗過程中,選擇泊洛沙姆188為表面活性劑和凍干保護劑,利用單因素實驗法篩選制備熊果酸納米粒的最優(yōu)條件,最優(yōu)條件如下:泊洛沙姆188的濃度為0.5‰,有機相和水相的體積比為1:4,勻漿速度為7000 rpm,勻漿時間為2 min,均質壓力為500 bar,均質次數(shù)為6次。在最優(yōu)條件下制備的熊果酸納米粒的粒徑為157.5 ± 28.0 nm,電位為20.33 ± 1.67 mV。通過掃描電鏡(SEM)可知,熊果酸納米粒的形態(tài)近球形,且粒徑分布均一;經過X射線衍射(XRD)、熱重分析(TG)和示差掃描熱量法(DSC)檢測,可以確定熊果酸納米粒的化學結構沒有發(fā)生改變,但是已經成為無定形態(tài)。在溶劑殘留實驗中,確認了熊果酸納米藥中氯仿和乙醇含量都符合藥物注冊技術要求國際協(xié)會(ICH)的規(guī)定。經過與熊果酸原粉進行飽和溶解度、溶出速率對比實驗發(fā)現(xiàn),熊果酸納米粉顯示出了更大的飽和溶解度和更快的溶出速率。熊果酸納米粉的飽和溶解度在人工胃液(SGF)中是熊果酸原粉的13.48倍;在人工腸液(SIF)中是它的11.79倍,在去離子水中是它的23.99倍。另外,通過乳化法制備的熊果酸納米粉的溶出速率,在SGF中比原粉提高了 14.72倍,在SIF中比其提高了 74.36倍。除此之外,熊果酸納米粉的抗氧化能力和口服生物利用度也有明顯提高,熊果酸納米粉的EC50值比熊果酸原粉降低了37.5倍,口服生物利用度約為原粉的2.68倍。
【學位單位】：東北林業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：TQ28;TB383.1
【部分圖文】：

邐９０逡逑超聲時間（ｍｉｎ）逡逑圖２－６超聲時間對提取率的影響逡逑Ｆｉｇ．邋２－６邋Ｔｈｅ邋ｅｆｆｅｃｔ邋ｏｆ邋ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ邋ｔｉｍｅ邋ｏｎ邋ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ邋ｒａｔｉｏ．逡逑２＿５＿３最優(yōu)驗證逡逑根據(jù)單因素實驗得到以下最佳條件：［ＯＭＩＭ］Ｂｉ？濃度為０．４ｍｏｌ／Ｌ，液料比４０：１，超逡逑聲功率５００邋Ｗ，超聲溫度４０邋°Ｃ，超聲時間３０邋ｍｉｎ；利用最佳條件進行３次重復實驗，逡逑從苦丁茶中提取熊果酸的平均提取率為２．４１±０．３５邋ｍｇ／ｇ。逡逑２．５＿４初步純化逡逑熊果酸粗提液經萃取、干燥后，得到黃綠色粉末，即熊果酸粗提物。圖２－７為初步逡逑純化后產物的液相檢測圖譜，由熊果酸標準曲線計算可得，提取物中熊果酸含量為逡逑２９．８９邋±邋２．２３％，提取物的回收率為８１．６８邋±邋４．１２％。逡逑０．邋０５０：逡逑０．０４５：邐Ｉ逡逑０．邋０４０１逡逑ｓ邋柋邐Ａ邋ｆｙ邐＼＼逡逑０．０００：邐１邋ｗ邐邐邐廣邐邐Ｊ邋｛邐逡逑！逡逑－０．邋００５－逡逑＾邋｜邋＾逡逑－０．邋０５５＾逡逑°Ｈ．邋，邐．邐，邋ｉ逡逑０．００邐２．００邐４．００邐６．００邐８．００

根據(jù)單因素實驗得到以下最佳條件：粗提物濃度５０邋ｍｇ／ｍＬ，反溶劑與溶劑體積比逡逑為６：１，沉積溫度４０邋°Ｃ，攪拌時間１邋ｍｉｎ，損拌速度１５００邋ｒ／ｍｉｎ；利用最佳條件進行３逡逑次重復實驗，純化后的熊果的平均含量為９２．１８±１．８７％，液相色譜圖如圖３－６。在接下來逡逑的熊果酸納米粒制備實驗中，所用到的實驗樣品，均是按照以上最優(yōu)條件純化而成。逡逑０．邋０５ＣＨ逡逑１逡逑０．邋０４５－１逡逑０．０３0ｊ邐ｊ逡逑Ｉ逡逑０．０２＆Ｊ邐ｊ逡逑０．０２０］邐Ｊ逡逑０．０１＆１邐｜逡逑Ｉ邐Ｉ逡逑ｏ．ｏｉｏｌ邐ｉ逡逑Ａ邋Ａｌ逡逑０．邋ＱＯＯｉ一」ｕＷｖ邐�。娺娺姡叔澹诉婂义希蒎义希埃埃埃担殄义希檫娤﹀义希埃澹埃担埃殄义希哄义希�？邋０５邋引逡逑３邐１逡逑－０．邋０６０：逡逑０．００邐２．００邐４．００邐６．００邐＇邐８；邋００邐１０．００邐１２＾００逡逑時間（ｍｉｎ）逡逑圖３－６熊果酸液相色譜圖逡逑Ｆｉｇ．邋３－６邋ＨＰＬＣ邋ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ邋ｏｆ邋ＵＡ．逡逑３．５本章小結逡逑本章利用反溶劑重結晶法進行熊果酸純化，運用單因素實驗，考察粗提物濃度、溶逡逑劑與反溶劑體積比、沉積溫度、攪拌時間、d拱杷俁榷孕芄岷康撓跋歟玫醬炕苠義瞎岬淖鈑毆ひ詹問捍痔崳錙ǘ齲擔板澹恚紓恚�，人G劣敕慈薌撂寤任保海�，沉积温洱x矗板義

本文編號：2823654