【摘要】：納米銀作為一種特殊的銀系材料,具有異于常規(guī)材料的熱、光、電、磁、催化和敏感等獨(dú)特性質(zhì),實(shí)際中作為催化劑材料、防靜電材料、低溫超導(dǎo)材料、生物傳感器材料被廣泛使用,同時(shí)在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域也有應(yīng)用。高效合成納米銀已成為研究的熱點(diǎn)。近年來利用各種生物材料和微生物與硝酸銀生物合成納米銀的報(bào)道層出不窮,目前已證實(shí)多種植物內(nèi)生真菌具有生物合成納米銀的功能。川貝母作為一種名貴的藥食兩用中藥材,具有清熱潤肺,化痰止咳,散結(jié)消癰的作用。川貝母內(nèi)生真菌作為一類與川貝母息息相關(guān)的真菌類群,具有很大的研究?jī)r(jià)值,其生物活性研究近來也成為熱點(diǎn)。本研究以川貝母內(nèi)生真菌為原料,采用生物合成法與硝酸銀溶液反應(yīng)成功合成納米銀,并通過改變反應(yīng)條件對(duì)合成過程進(jìn)行優(yōu)化,再以納米銀為對(duì)象,對(duì)其進(jìn)行抑菌活性和抗腫瘤活性的研究。以期為內(nèi)生真菌生物合成納米銀的深入研究提供理論依據(jù)。主要結(jié)果如下:1.采用生物合成法,利用川貝母內(nèi)生真菌浸泡液與硝酸銀溶液反應(yīng),對(duì)課題組前期分離得到的15株川貝母內(nèi)生真菌進(jìn)行初篩,結(jié)果發(fā)現(xiàn)川貝母內(nèi)生真菌CBY4和CBY13都能通過生物合成法制備納米銀,經(jīng)過鑒定兩株菌均為三線鐮刀菌,將它們合成的納米銀分別命名4-AgNPs和13-AgNPs。2.分別探討浸泡液pH、硝酸銀溶液濃度、光照強(qiáng)度和溫度對(duì)CBY4和CBY13生物合成納米銀的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)反應(yīng)不同條件下,納米銀的合成量具有顯著差異。在pH3-11的范圍內(nèi),4-AgNPs和13-AgNPs的合成量均在pH為6時(shí)達(dá)到最大;當(dāng)硝酸銀溶液濃度為2mmol/L時(shí),制得的4-AgNPs和13-AgNPs均合成量較大、粒徑最小;在2000Lux光照強(qiáng)度范圍內(nèi),隨著光照強(qiáng)度增強(qiáng),4-AgNPs和13-AgNPs的合成量均不斷增加;在50℃溫度范圍內(nèi),隨著溫度增加,4-AgNPs和13-AgNPs的合成量也均增加。最終確定pH為6、硝酸銀濃度為2mmol/L、光強(qiáng)為2000Lux和50℃溫度條件下相對(duì)更適合4-AgNPs和13-AgNPs的合成。3.4-AgNPs和13-AgNPs對(duì)金黃色葡萄球菌和大腸桿菌具有良好的抑菌效果。采用平板孔阱擴(kuò)散法的抑菌圈直徑分別為19.33mm和19.97mm以及19.72mm和19.38mm。4-AgNPs抑制金黃色葡萄球菌和大腸桿菌生物膜形成的最小抑制濃度(MIC)分別為76μg/mL和38μg/mL;13-AgNPs抑制金黃色葡萄球菌和大腸桿菌生物膜形成的最小抑制濃度(MIC)分別為60μg/mL和30μg/mL。4.納米銀4-AgNPs和13-AgNPs均對(duì)人宮頸癌Hela細(xì)胞的增殖生長具有明顯的抑制作用,可以成功誘導(dǎo)癌細(xì)胞的凋亡,具有良好的抗腫瘤活性。綜上,本研究首次發(fā)現(xiàn)川貝母中分離的內(nèi)生真菌CBY4和CBY13具有合成納米銀的能力,優(yōu)化得到了一個(gè)比較適合其納米銀合成的反應(yīng)條件,同時(shí)發(fā)現(xiàn)合成的納米銀具有一定的抑菌和抗腫瘤活性。本研究發(fā)現(xiàn)了川貝母內(nèi)生真菌新的生物功能和作用,也為生物合成納米銀的研究積累了更多的資料。
【學(xué)位授予單位】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：TB383.1;O614.122
【圖文】：

圖采用 Microsoft Excel2010 進(jìn)行，采用 SPS關(guān)分析。生物合成納米銀初篩內(nèi)生真菌的篩選，結(jié)果表明菌株 CBY4 和 C發(fā)現(xiàn)，當(dāng) CBY4 和 CBY13 的浸泡液與 AgN顯變化，由淺黃色變成了棕黃色，而空白效應(yīng)（SPR）造成的，棕黃色是指示納米說明川貝母內(nèi)生真菌 CBY4 和 CBY13 的浸判定整個(gè)溶液體系有納米銀合成。

浸泡液與 AgNO3溶液混合反應(yīng) 4h（左邊）和 CBY13 soaking solution mixed with AgNO3solution reaCBY13 soaking solution (right)可見分光光度計(jì)分別對(duì) CBY4 浸泡液和 CB圖 4.3 可以看出 CBY4 浸泡液和 AgNO3溶液4.4 可以看出 CBY13 浸泡液和 AgNO3溶液的說明 CBY4 和 CBY13 兩株菌株的浸泡液都能納米銀命名為 4-AgNPs，CBY13 浸泡液合

圖 4.4 可以看出 CBY13 浸泡液和 AgNO3溶液的混合液在最大吸收峰，說明 CBY4 和 CBY13 兩株菌株的浸泡液都能合成納米 浸泡液合成的納米銀命名為 4-AgNPs，CBY13 浸泡液合成的納米s。

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本文編號(hào)：2743661