【摘要】：在腫瘤的診斷與治療上,對(duì)于具有低毒性、廣譜性、靶向性的藥物研發(fā)一直是大家關(guān)注的重點(diǎn)。因此,本論文主要研究了天然產(chǎn)物Kamebakaurin、泊那替尼衍生物PA對(duì)血癌的治療作用并設(shè)計(jì)合成了功能化的納米金材料應(yīng)用于腫瘤的研究。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括以下三方面:(1)利用天然產(chǎn)物Kamebakaurin分別對(duì)三種慢性粒白血病細(xì)胞K562、K BM5、K BM5-T315I細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)探究,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明K amebakaurin在6μg/mL時(shí)可以有效地抑制細(xì)胞增殖并通過(guò)降低線粒體膜電位和增加活性氧影響了細(xì)胞凋亡。Western blotting及免疫組化結(jié)果顯示Kamebakaurin能抑制Bcr-Abl融合蛋白及其磷酸化的表達(dá)水平,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明Kamebakaurin能明顯抑制皮下移植瘤的增長(zhǎng),H-E染色說(shuō)明該化合物對(duì)五臟沒(méi)有明顯的毒性。(2)利用計(jì)算機(jī)模擬優(yōu)化分子結(jié)構(gòu)并合成了ponatinib衍生物PA,分別用了三種血癌細(xì)胞K562、KBM5、KBM5-T315I做了相關(guān)的生物實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出三種細(xì)胞的半抑制率IC_(50)值分別為2.45nM、3.26nM和6.97nM。在PA的濃度為8nM時(shí),能夠明顯地誘導(dǎo)了細(xì)胞凋亡并抑制融合蛋白Bcr-Abl及其磷酸化的表達(dá)。組織病理學(xué)分析及TUNEL染色顯示,在用藥過(guò)程中對(duì)五臟尤其是對(duì)肝臟沒(méi)有明顯影響。(3)合成了具有特殊光學(xué)性質(zhì)的金納米粒子,對(duì)其做了TEM形貌表征,結(jié)果顯示它的形貌尺寸均一,基本都在20nm左右。然后對(duì)其表面進(jìn)行了功能化修飾,偶聯(lián)了拉曼染料對(duì)羥基苯甲酸、巰基聚乙二醇以及表皮生長(zhǎng)因子,研究了不同濃度的修飾基團(tuán)對(duì)納米金粒子的影響。檢測(cè)到功能化納米金材料的拉曼信號(hào)并成功應(yīng)用于細(xì)胞暗場(chǎng)成像。
【圖文】：

[19][20]，，目前被大家認(rèn)為是慢性粒細(xì)胞白血病發(fā)病的主要原因，其結(jié)構(gòu)示意圖如（圖1.1）具有2個(gè)柔性環(huán)：一個(gè)是與ATP可以相結(jié)合的P環(huán)（P-loop）還有一個(gè)是具有催化作用的A環(huán)（activation loop）。在A環(huán)N端部位中存在一個(gè)天冬氨酸381-苯丙氨酸382-甘氨酸383（簡(jiǎn)稱DFG）的結(jié)構(gòu)

圖 2.3 Kamebakaurin對(duì)CML細(xì)胞周期的影響（4）Kamebakaurin對(duì)細(xì)胞線粒體膜電位的作用一般情況下早期凋亡的細(xì)胞自身會(huì)產(chǎn)生一些明顯的凋亡現(xiàn)象，比如線粒體膜電位都會(huì)下降，線粒體膜電位由正常變低時(shí)，通過(guò)對(duì)線粒體進(jìn)行染色會(huì)在熒光顯微鏡下觀察到不同的顏色變化，細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)顏色會(huì)從紅光變淺變暗。如圖2.4所示，沒(méi)有給藥的對(duì)照組，細(xì)胞呈現(xiàn)較強(qiáng)的紅光，當(dāng)加入8μg/mL的Kamebakaurin培養(yǎng)后，細(xì)胞中紅光減弱而綠光卻變強(qiáng)，由此通過(guò)線粒體膜電位下降說(shuō)明了細(xì)胞開(kāi)始發(fā)生凋亡。S: 28.05%G2/M: 17.29%S: 47.47%G2/M: 33.26%S: 36.97%G2/M: 18.54%S: 29.03%G2/M: 20.37%KBM5-T315IControlKA(8μg/mLa b c a b c
【學(xué)位授予單位】：長(zhǎng)春工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R730;TB383.1;O657.37

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2685299