【摘要】：隨著納米科技的飛速發(fā)展,特別是對自組裝納米技術(shù)的研究,極大地推動了材料、化學(xué)、生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的快速進(jìn)步。近年來,癌癥已經(jīng)成為醫(yī)學(xué)領(lǐng)域研究的熱點,從而促使許多生物化學(xué)方面的研究者去開發(fā)越來越多的生物納米材料作為藥物或者基因的載體,用于癌癥的治療與研究中。在眾多的生物納米材料里,病毒因其生物相容性好、便于大量制備、易于通過分子生物學(xué)進(jìn)行改造等特點引起了極大的關(guān)注,煙草花葉病毒便是其中之一。本課題充分利用煙草花葉病毒的這種優(yōu)勢,對其外表面進(jìn)行了多肽修飾,在賦予其靶向功能的同時也使得它以穩(wěn)定的盤狀結(jié)構(gòu)存在,并對這種修飾進(jìn)行了簡單的探索與研究。本課題基于已經(jīng)報道的對于煙草花葉病毒的修飾的研究,結(jié)合病毒本身棒狀特性以及自組裝特點,以煙草花葉病毒外殼蛋白為研究對象,先對其進(jìn)行修飾,然后誘導(dǎo)其自組裝,成功將其控制在盤狀結(jié)構(gòu)狀態(tài),并具有靶向功能。本課題首先獲得了煙草花葉病毒外殼蛋白的基因,利用生物化學(xué)中的基因工程技術(shù),通過PCR突變,分別在蛋白的3號位以及C端引入半胱氨酸和RGD多肽。利用高速離心、瓊脂糖凝膠電泳、SDS聚丙烯酰氨凝膠電泳(SDS-PAGE)、快速蛋白液相色譜(HPLC)、透析、透射電子顯微鏡(TEM)等試驗設(shè)備對蛋白進(jìn)行了純化,并誘導(dǎo)蛋白進(jìn)行了自組裝,通過改變pH和離子濃度對其組裝情況進(jìn)行了分析。雖然在煙草花葉病毒的最佳組裝條件pH=5.5時,可以看到棒狀結(jié)構(gòu),但是這種結(jié)構(gòu)是以堆積的形式排列的,并不是真正意義上的病毒結(jié)構(gòu),在5.5pH6.0、離子強(qiáng)度100m M的條件下,可以清楚的觀察到組裝體幾乎全部以納米盤狀結(jié)構(gòu)存在。因此,通過引入功能性多肽,利用多肽所產(chǎn)生的位阻效應(yīng),成功得到了一種具有靶向功能的盤狀納米材料。
【學(xué)位授予單位】：東北石油大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：TB383.1

【參考文獻(xiàn)】

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1 陳安偉;曾光明;陳桂秋;易斌;郭志;;金屬納米材料的生物毒性效應(yīng)研究進(jìn)展[J];環(huán)境化學(xué);2014年04期

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本文編號：2678200