發(fā)布時間：2020-05-11 16:03

【摘要】：在基因治療過程中構(gòu)建安全性高、轉(zhuǎn)染率高的基因遞送載體是實現(xiàn)基因治療的前提和關(guān)鍵。凝膠多糖作為一種天然多糖,除了具有許多優(yōu)良的生物性能外,由于主鏈上具有大量的反應(yīng)活性基團(tuán),我們可以據(jù)此進(jìn)行化學(xué)修飾來制備各種具有生物功能的多糖衍生物,因而凝膠多糖在生物醫(yī)藥研究領(lǐng)域日益受到人們的關(guān)注。本文首先通過“click”反應(yīng)對凝膠多糖進(jìn)行化學(xué)改性,制備了水溶性好的多氨基化凝膠多糖(Cur-PLG),進(jìn)一步分別用適量的乳糖酸(lactobionic acid,Lac)和尿刊酸(urocanic acid,UA)對氨基凝膠多糖做化學(xué)修飾,合成了兩種新型的凝膠多糖衍生物(Cur-Lac和Cur-UA)。合成化合物的結(jié)構(gòu)分別通過紅外(FTIR)、核磁共振氫譜(~1H NMR)和核磁共振碳譜(~(13)CNMR)進(jìn)行確證,分子量利用GPC進(jìn)行測定,在PBS緩沖溶液里所合成化合物粒子的形態(tài)和大小采用掃描電子顯微鏡和動態(tài)光散射進(jìn)行測定。所合成的兩種衍生物的細(xì)胞毒性、負(fù)氫能力和結(jié)合DNA的能力依次通過MTT法、酸堿滴定和凝膠電泳實驗一一進(jìn)行測定。研究結(jié)果表明不同取代度的乳糖酸功能化陽離子凝膠多糖納米粒子(Cur-Lac5%Cur-Lac15%和Cur-Lac20%)平均粒徑在200nm左右,而低取代度的尿刊酸修飾陽離子凝膠多糖納米粒子(Cur-UA5%和Cur-UA10%)平均粒徑小于100nm,Cur-Lac和Cur-UA納米粒子在合適的N/P條件下都能很好地結(jié)合DNA,并具有較好的負(fù)載氫質(zhì)子的能力。綜合而言,本論文合成了兩類具有跨膜功能的凝膠多糖基因載體,該載體具有體內(nèi)外遞送基因的潛力。研究結(jié)果為開發(fā)基于凝膠多糖的新型納米基因載體提供了先進(jìn)的方法和有益的參考。
【圖文】：

圖 1.1 功能化納米載體的基因遞送Fig 1.1 functionalized nanocarriers for gene delivery體可以大致分為兩類，一類為病毒載體，另一類為非病毒載體。鑒于轉(zhuǎn)染率，基因治療發(fā)展的早期人們大多利用病毒（如逆轉(zhuǎn)錄病毒，載體。由于病毒本身存在潛在的致癌性、免疫原性、廣泛的組織親力以及制備困難等因素，病毒性載體的應(yīng)用受到了極大的限制。與較高的基因負(fù)載量和易于制備的特點，因而人們越來越注重開發(fā)應(yīng)毒載體的開發(fā)已取得了相當(dāng)?shù)倪M(jìn)展，人們利用物理、化學(xué)和其他方無機或有機的非病毒基因載體。非病毒載體需要具有如下5個要素[致密的 DNA 復(fù)合物以保護(hù) DNA 免于核酸酶和其他血液成分的影

圖 1.2 脂質(zhì)體Fig 1.2 Chemical structure尤其值得提出的是脂質(zhì)體在遞送 siRNA 的明，一類基于脂質(zhì)的 siRNA 載體經(jīng)臨床評價為過對粒徑小于 200nm 的 DNA 遞送載體和包封后，確定了此 SNALP 的組成[28]。首例用于遞以乙型肝炎小鼠為動物模型，遞送 siRNA 的靶納米載體都能有效運載核酸進(jìn)入肝細(xì)胞，且在疾病相關(guān)的基因。一些 SNALP 在體內(nèi)遞送 siR細(xì)胞對粒子的內(nèi)化作用[30]。據(jù)報道，脂質(zhì)體納pKa 值相關(guān)，，較弱堿性的陽離子脂質(zhì)（pKa～而，也有研究發(fā)現(xiàn)成分確定的具有較高的 pKa
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：TB383.1;O629.12

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2658715