【摘要】：多孔結(jié)構(gòu)薄膜材料及生物活性分子的表面修飾都會對細(xì)胞行為產(chǎn)生一定的影響,但是目前大部分文獻(xiàn)主要集中在單一因素對細(xì)胞行為的研究,而將材料的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)及表面修飾相結(jié)合來考察生物材料和細(xì)胞之間相互作用的研究相對較少。因此,本文以聚己內(nèi)酯作為材料,利用水滴模板法(Breath Figure)制備具有一定孔徑的蜂窩狀多孔薄膜材料,平面結(jié)構(gòu)作為對照;然后用氫氧化鈉對材料水解,使材料表面帶有一定量的負(fù)電荷,進(jìn)一步通過層層自組裝(Layer-by-layer assembly,LBL)的方法對材料表面進(jìn)行生物活性分子修飾,通過掃描電鏡、激光共聚焦顯微鏡、接觸角測量以及生物活性分子含量的測定等方法對材料表面性質(zhì)進(jìn)行表征;考察修飾的材料對兔間充質(zhì)干細(xì)胞的貼附、增殖的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn):1)通過對水滴模板法相關(guān)參數(shù)(旋涂體積、相對濕度、溶劑和濃度)的優(yōu)化,結(jié)果發(fā)現(xiàn)在以四氫呋喃/三氯甲烷(97/3,v/v)作為有機(jī)溶劑、濃度為40 mg/mL、溶液滴加體積為750 μL、相對濕度大于65%的條件下,基于掃描電鏡觀察,所得的材料表面具有形態(tài)規(guī)則、孔徑均一的蜂窩狀多孔結(jié)構(gòu),利用Image J軟件對孔徑大小進(jìn)行統(tǒng)計,發(fā)現(xiàn)孔徑尺寸的分布范圍為18.87±3.25μm;2)以明膠/硫酸軟骨素、明膠/透明質(zhì)酸、殼聚糖/硫酸軟骨素和殼聚糖/透明質(zhì)酸4種組合對薄膜材料表面進(jìn)行LBL修飾6層,材料表面的接觸角呈現(xiàn)隨著兩種組分的替換而周期性變化,利用異硫氰酸熒光素對明膠和殼聚糖分別標(biāo)記,借助激光共聚焦顯微鏡觀察以及酶標(biāo)儀熒光定量測定,都證實(shí)材料表面存在生物活性分子,且熒光區(qū)域的厚度隨層數(shù)的增加而增加,達(dá)到了 LBL的修飾效果;3)有孔材料與無孔材料相比,孔結(jié)構(gòu)的存在一定程度上限制了細(xì)胞鋪展,而LBL修飾后的材料表面親水性增加,促進(jìn)了 rMSCs的貼附與增殖。綜上所述,多孔薄膜材料孔結(jié)構(gòu)的存在結(jié)合表面生物活性分子修飾會對細(xì)胞的貼附、形態(tài)、鋪展、增殖產(chǎn)生影響。
【學(xué)位授予單位】：華東理工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：Q813.11;TB383.2

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本文編號：2545700