磁性納米微球的制備以及其應(yīng)用在α-乙酰乳酸脫羧酶的固定
發(fā)布時間:2018-05-30 08:49
本文選題:四氧化三鐵 + 溶膠-凝膠。 參考:《大連工業(yè)大學(xué)》2015年碩士論文
【摘要】:在本研究中,一種具有靈活使用性的Fe3O4@SiO2 NH2納米微球成功被合成。使用羰基二咪唑(CDI)作為一種螯合交聯(lián)劑,將α-乙酰乳酸脫羧酶(α-ALDC)成功的固定在這種核殼納米微球上。首先,單分散性、具有親水的性質(zhì)的、單晶型、平均直徑100 nm左右的Fe3O4磁性納米粒子通過先前報導(dǎo)過的溶劑熱還原方法(加上一點小的修飾)制備得到。第二步,通過溶膠-凝膠技術(shù),正硅酸乙酯(TEOS)用來引入高活性的硅醇到磁性Fe3O4的納米微球的表面。第三步,氨基功能化的核殼Fe3O4磁納米粒子是通過氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)與Fe3O4@SiO2 OH結(jié)構(gòu)納米粒子表面的羥基通過極性化學(xué)鍵連接所得。然后,以CDI作為一種螯合交聯(lián)劑,α-ALDC是成功地被固定在氨基功能化的Fe3O4磁性納米粒子上。影響α-ALDC固定在氨基功能化的Fe3O4表面的因素和固定化的α-ALDC的性質(zhì)被詳細(xì)的進(jìn)行分析。制備得到的Fe3O4、Fe3O4@SiO2 OH、Fe3O4@Si O2 NH2磁性納米粒子通過掃描電鏡(SEM),透射電鏡(TEM),X-射線衍射(XRD),傅里葉紅外光譜(FT-IR)來進(jìn)行定性分析。測試結(jié)果表明合成的納米粒子具有令人滿意的磁性,良好的親水性,高度的結(jié)晶性,并且有大量的氨基基團(tuán)在納米粒子上。固定在氨基Fe3O4磁納米粒子上的α-ALDC的載量被檢測出是48.70±1.25μg/mg。與游離的α-ALDC相比較,固定的α-ALDC展示出良好的熱穩(wěn)定性和pH穩(wěn)定性。盡管與游離的α-ALDC相比較,固定的α-ALDC的Vmax有所減小,Km值有所增加,但是這兩個動力學(xué)參數(shù)的改變是相當(dāng)?shù)慕咏?這表明固定的α-ALDC仍然具有良好的催化能力。在儲存14天后,與固定化的酶的活力相比,固定的α-ALDC仍然具有65.35%的活力。然而在相同的條件下,游離的α-ALDC只保存了它起初活力的39.22%。在8次的連續(xù)使用后,固定的α-ALDC的剩余活力仍然保持在它起初活力的67.47%。因此,這種固定α-ALDC的方式在實際應(yīng)用方面展示出潛在的價值。
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本文編號:1954681
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