基于納米容器的腫瘤標志物檢測方法研究
本文關(guān)鍵詞:基于納米容器的腫瘤標志物檢測方法研究 出處:《青島科技大學》2015年碩士論文 論文類型:學位論文
更多相關(guān)文章: 金納米容器 ATP 熒光檢測 電化學 谷胱甘肽
【摘要】:第一部分在癌細胞的生長繁殖過程中,細胞內(nèi)的ATP的含量會發(fā)生明顯變化,另外,細胞死亡過程中,ATP的合成受到抑制,細胞中ATP的含量迅速降低。研究細胞內(nèi)ATP的含量,對于了解癌細胞病變程度和細胞的新陳代謝狀態(tài)具有重要意義。本實驗用還原三氟乙酸銀法制備了銀納米立方體,并通過銀納米立方體合成了中空、壁薄的金納米容器并用透射電子顯微鏡(TEM)、紫外分光光度計(UV)對其進行了初步表征。根據(jù)TEM照片顯示金納米容器粒徑在30-40 nm;利用DNA雜交技術(shù)將金納米容器和金納米粒子組裝成DNA生物傳感器,然后通過檢測ATP置換下來的引物鏈的量檢測ATP濃度,并利用核酸外切酶循環(huán)放大技術(shù)實現(xiàn)了信號放大。在實驗的最佳條件下,對不同濃度的ATP進行測定,得到ATP的檢測線性范圍:1.0×10-9~1.0×10-7mol/L,檢測限:8.8×10-10mol/L(3σ)。實驗還對Hela細胞提取液中的ATP進行測定,結(jié)果為3.27×10-6mol/L。第二部分采用合成的新型電化學探針檢測巰基化合物。通過優(yōu)化實驗確定檢測GSH的最佳檢測條件為,0.2 mol/L B-R緩沖溶液(pH 2.0)中反應20 min。在此條件下,檢測線性范圍為1.0×10-10~1.0×10-9mol/L,檢測限達1.0×10-10mol/L (3σ, n=11)。另外,通過差示脈沖伏安法(DPV)我們檢測了探針對金屬硫因蛋白(MT)及谷胱甘肽還原酶(GR)的電化學響應。比較了探針對蛋白巰基(MT)和非蛋白巰基(GSH)電化學檢測的靈敏度,DPV分析結(jié)果表明,TTF-BBSD對MT的響應明顯高于GSH,即探針對蛋白巰基的響應更靈敏。
[Abstract]:In the first part , the ATP content in the cells was significantly changed during the growth and propagation of cancer cells . The ATP content in the cells was significantly decreased in the process of cell death . The results showed that the size of ATP in the cells was 30 - 40 nm . The detection limit was 3.8 脳 10 - 10 mol / L ( pH 2.0 ) . Under the optimum conditions , the detection limit was 1.0 脳 10 - 10 ~ 1.0 脳 10 - 9mol / L . The detection limit was 1.0 脳 10 - 10 mol / L ( 3蟽 , n = 11 ) . In addition , the electrochemical response of probe to MT and glutathione reductase ( GR ) was detected by differential pulse voltammetry ( DPV ) . The sensitivity of probe to protein sulfhydryl ( MT ) and non - protein sulfhydryl ( GSH ) electrochemical detection was compared . The results of DPV analysis showed that the response of the probe to MT was significantly higher than that of GSH , that is , the response of probe to sulfhydryl group was more sensitive .
【學位授予單位】:青島科技大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R730.4;TB383.1
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,本文編號:1392258
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