發(fā)布時間：2017-11-21 15:21

  本文關(guān)鍵詞：核桃蛋白酶解物調(diào)控制備納米硒及其抗腫瘤活性的研究

  更多相關(guān)文章： 核桃蛋白酶解物 納米硒 抗腫瘤 凋亡

【摘要】：硒是機體生命活動不可缺少的一種微量元素。近年來,隨著對硒化合物生理作用研究的不斷深入,硒與硒化合物的抗腫瘤活性受到普遍關(guān)注。單質(zhì)硒粒度一旦達到納米尺度,在水相中就形成膠體,其穩(wěn)定性好,除了具有硒元素所具備的生物活性,又具有納米尺度效應(yīng)。納米單質(zhì)硒屬于無機硒,具有活性高、毒性低的特點,在腫瘤預防、治療、降低化療藥物抗藥性等方面顯示出極大的優(yōu)勢。用蛋白酶解物為模板調(diào)控劑用于納米藥物的制備具有很好的生物兼容性。蛋白酶解物具有耗能低、轉(zhuǎn)運速度快和不易被飽和的特點,此外蛋白酶解物還具有很好的營養(yǎng)作用:提高氨基酸的利用率,促進蛋白質(zhì)的合成和礦質(zhì)元素的吸收等。本課題用核桃蛋白酶解物調(diào)控制備功能化納米硒復合物,并系統(tǒng)研究了其抗腫瘤作用的機理。主要內(nèi)容與結(jié)論如下:(1)核桃蛋白酶解物的酶解制備與分離純化以蛋白回收率和水解度為指標,設(shè)計單因素實驗篩選最佳酶解工藝,制備核桃蛋白酶解物。研究發(fā)現(xiàn)胰蛋白酶最適加酶量為底物蛋白含量的2%,最適酶解時間為30 h,此時得到的核桃蛋白酶解液蛋白回收率為43.97%,水解度為22.96%。經(jīng)超濾膜分離出分子量10000 u的組分,冷凍干燥,得到調(diào)控制備納米硒的核桃蛋白酶解物。(2)核桃蛋白酶解物-納米硒的制備與結(jié)構(gòu)表征在維生素C還原亞硒酸鈉的體系中,以3 mg/m L核桃蛋白酶解物可調(diào)控制備出單分散且均一的球狀納米硒粒子,平均粒徑為89.22 nm。用納米粒度儀、掃描電鏡、元素分析和紅外光譜四種方法對核桃蛋白酶解物-納米硒的結(jié)構(gòu)進行表征,結(jié)果發(fā)現(xiàn)其形成機理主要是通過核桃蛋白酶解物上羥基的吸附作用,納米硒被吸附在核桃蛋白酶解物的分子表面,并阻止納米硒的進一步聚集。(3)核桃蛋白酶解物納米硒的抗腫瘤活性研究通過MTT法篩選出人乳腺癌細胞MCF-7最為敏感。進一步研究發(fā)現(xiàn),核桃蛋白酶解物-納米硒能引起MCF-7細胞皺縮,細胞核內(nèi)出現(xiàn)凋亡小體,DNA Ladder,使MCF-7細胞周期阻滯在S期,誘導細胞早期凋亡。在MCF-7細胞內(nèi)檢測到FADD的表達水平增高以及Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的活化,說明核桃蛋白酶解物-納米硒誘導凋亡的其中一條途徑是通過死亡受體介導的外源性凋亡通路。此外,MCF-7細胞內(nèi)還檢測到大量ROS產(chǎn)生和線粒體功能紊亂的現(xiàn)象,說明核桃蛋白酶解物-納米硒誘導凋亡的第二條途徑是線粒體介導的內(nèi)源性凋亡通路。
【學位授予單位】：華南理工大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：TB383.1;TQ460.1

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張謙益;吳洪華;;牛肉酶解物的Tricine-SDS-PAGE電泳分析[J];肉類工業(yè);2006年07期

2 楊萬根;張煜;王璋;許時嬰;;蛋清蛋白酶解物的抗氧化、抗凝血酶活性及生化特性的研究[J];食品科學;2008年06期

3 李琳;趙謀明;吳敏芝;;鳙魚酶解物體外抗氧化的研究[J];中國食品添加劑;2010年02期

4 陳達;霍敏晶;黃文芊;劉尊英;;牡蠣蛋白酶解物螯合鋅的工藝優(yōu)化[J];農(nóng)產(chǎn)品加工(學刊);2012年10期

5 曾慶祝,許慶陵,林魯萍;扇貝邊酶解物抗氧化作用研究[J];中國生化藥物雜志;2005年02期

6 邱春江;劉利;;花蜆酶解物清除羥自由基作用研究[J];生物加工過程;2007年01期

7 李琳;趙謀明;孫莉娜;;連續(xù)串聯(lián)超濾對鳙魚酶解物抗氧化活性的影響[J];中國食品學報;2009年05期

8 張艷萍;戴志遠;張虹;;貽貝蛋白的酶解及其酶解物的抗氧化活性研究[J];中國食品學報;2012年01期

9 邱春江;陳瑜;劉利;薛長湖;;貽貝酶解物對羥自由基清除作用的試驗研究[J];食品研究與開發(fā);2006年10期

10 劉志東;王蔭榆;曲映紅;郭本恒;;乳清分離蛋白酶解物的分離條件[J];食品工業(yè)科技;2008年04期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 趙芹;薛長湖;王靜鳳;;日本刺參膠原蛋白酶解物對過氧化氫損傷神經(jīng)細胞的保護作用[A];2008年中國水產(chǎn)學會學術(shù)年會論文摘要集[C];2008年

2 金文剛;冉旭芹;吳海濤;朱蓓薇;;蝦夷扇貝生殖腺酶解物的理化特性研究[A];中國食品科學技術(shù)學會第八屆年會暨第六屆東西方食品業(yè)高層論壇論文摘要集[C];2011年

3 劉尊英;葛曉軍;曾名ng;;海參(Parastichopus californicus)膠原蛋白酶解物乳化特性研究[A];2010年中國水產(chǎn)學會學術(shù)年會論文摘要集[C];2011年

4 丁利君;張宏梅;賴學玲;;馬鮫魚蛋白酶解物的抗氧化性[A];中國食品科學技術(shù)學會第五屆年會暨第四屆東西方食品業(yè)高層論壇論文摘要集[C];2007年

5 石丹;王彩云;云戰(zhàn)友;;蛋白質(zhì)酶解物苦味的探討[A];首屆中國奶業(yè)大會論文集(下冊)[C];2010年

6 吳浩浩;劉尊英;劉雷;慕現(xiàn)敏;曾名ng;;不同因素對溊魚蛋白酶解物鈣鹽螯合特性的影響[A];2010年中國農(nóng)業(yè)工程學會農(nóng)產(chǎn)品加工及貯藏工程分會學術(shù)年會暨華南地區(qū)農(nóng)產(chǎn)品加工產(chǎn)學研研討會論文摘要集[C];2010年

7 楊小軍;左偉勇;陳偉華;鄒思湘;;灌喂大豆蛋白的胃蛋白酶酶解物對大鼠免疫功能的影響[A];中國生理學會2004年消化內(nèi)分泌生殖學術(shù)研討會論文摘要匯編[C];2004年

8 李益武;楊文超;吳珍紅;繆曉青;;蜂王漿蛋白酶解物體外抗氧化活性的研究[A];2012年全國蜂產(chǎn)品市場信息交流會暨中國（江蘇）蜂業(yè)博覽會論文集[C];2012年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前9條

1 劉媛;海灣扇貝酶解物的制備、鑒定及其體內(nèi)外抗腫瘤作用研究[D];河北農(nóng)業(yè)大學;2015年

2 丁秀臻;大豆球蛋白酶解物中巰基肽的分布、制備及其與重金屬離子作用的研究[D];江南大學;2016年

3 任小青;鯰魚骨酶解物的制備、抑菌性能、抑菌機理及其在食品中的應(yīng)用研究[D];華東理工大學;2012年

4 李琳;鳙魚蛋白控制酶解及酶解物抗氧化研究[D];華南理工大學;2006年

5 董玉蓮;一種海產(chǎn)小雜魚酶解物生理活性組分的分離純化與表征[D];中國科學院研究生院（廣州地球化學研究所）;2002年

6 MOHAMED TABITA KAMARA;小米蛋白及其酶解物的營養(yǎng)和功能特性研究[D];江南大學;2010年

7 趙濤;葵花籽粕中綠原酸和蛋白酶解肽的制備及生物活性研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學;2013年

8 徐明生;雞蛋卵白蛋白酶解物抗氧化肽研究[D];陜西師范大學;2006年

9 李娜;基于Wnt/β-catenin信號通路鹿茸膠原酶解物治療GCIP的分子機制研究[D];長春中醫(yī)藥大學;2014年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 彭晨;酶解鯽魚蛋白制備生物活性肽的研究[D];天津科技大學;2013年

2 孫蒙蒙;脫脂核桃多肽制備及其解酒活性初探[D];北京林業(yè)大學;2016年

3 張榕;核桃蛋白酶解物調(diào)控制備納米硒及其抗腫瘤活性的研究[D];華南理工大學;2016年

4 李相沂;蕎麥蛋白質(zhì)的提取及其酶解物的ACE抑制活性研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學;2016年

5 段汝清;瓜爾豆膠酶解物對蛋清蛋白的改性研究[D];江南大學;2016年

6 王政;酪蛋白酶促水解及其酶解物性質(zhì)研究[D];河南農(nóng)業(yè)大學;2005年

7 曹娟娟;大鯢（Andrias davidianus）肉與幾種食用肉酶解物的制備及其體外抗氧化活性的比較研究[D];重慶師范大學;2014年

8 李娟;蓮子蛋白酶解物的制備及其抗氧化特性研究[D];湖南農(nóng)業(yè)大學;2010年

9 江建梅;魷魚酶解工藝及其酶解物的研究[D];天津科技大學;2010年

10 張榮華;豬皮膠原蛋白酶解物的抗氧化特性研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學;2012年

，

本文編號：1211381