本文關(guān)鍵詞：磁性及多級孔納米材料的制備及其分離固定溶菌酶的研究

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【摘要】：隨著溶菌酶在食品和醫(yī)藥上的應(yīng)用日益廣泛,溶菌酶的分離純化和固載化應(yīng)用尤為重要。本文設(shè)計制備了兩種新型納米材料,將磁性納米材料應(yīng)用于溶菌酶的分離純化;多級孔納米材料應(yīng)用于溶菌酶的固載化研究。本文研究通過利用化學共沉淀法制備磁性Fe_3O_4納米粒子,用APTES嫁接氨基基團,利用氨基和醛基的反應(yīng),將具有特定序列的溶菌酶適配體接枝在磁性Fe_3O_4納米粒子上,具有水分散性良好,有較大的比表面積和超順磁性等優(yōu)良特征,通過靜電的相互作用可對雞蛋蛋清中的溶菌酶起到特定分離純化的作用。通過水熱合成法合成多級孔生物活性玻璃載體,因材料具有多種復(fù)合孔道,較大的比表面積,可作為固載溶菌酶的良好載體。針對制備出的兩種載體還做了一些材料方面的表征,包括TEM、SEM、FTIR、TGA、磁滯回線等等。在分離和固載實驗中,找到了最優(yōu)的實驗條件,在此條件下,磁性Fe_3O_4納米粒子在水溶液中溶菌酶的最大吸附量為460±3.4 mg/g,在蛋清中溶菌酶的最大吸附量是113±4.2mg/g,洗脫液中溶菌酶的酶活力為原酶的88.9±0.3%,該方法操作簡便,經(jīng)濟合理,可擴大化生產(chǎn);多級孔生物活性玻璃載體,在最優(yōu)實驗條件下,最大的固載量為648±5.1 mg/g,經(jīng)過一系列光譜的分析,溶菌酶固載后二級構(gòu)象并沒有發(fā)生改變,而且固載酶的活力仍保留原酶活力的61.9±0.2%左右,重復(fù)利用4次后活力仍保留原酶的35.1±0.3%,提高了酶的催化效率,節(jié)約了成本。
【關(guān)鍵詞】：磁性納米粒子 多級孔生物活性玻璃 溶菌酶 分離純化 固載
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：TB383.1;Q814.2
【目錄】：

• 中文摘要8-9
• Abstract9-11
• 第一章 緒論11-23
• 1.1 溶菌酶的概述11
• 1.2 溶菌酶的應(yīng)用研究11-13
• 1.2.1 溶菌酶在食品工業(yè)中的應(yīng)用11-12
• 1.2.2 溶菌酶在醫(yī)藥上的應(yīng)用12-13
• 1.2.3 溶菌酶在生物技術(shù)中的應(yīng)用13
• 1.3 溶菌酶的分離純化方法13-15
• 1.3.1 結(jié)晶法13
• 1.3.2 離子交換法13
• 1.3.3 親和膜色譜法13-14
• 1.3.4 超濾法14
• 1.3.5 反膠團萃取法14
• 1.3.6 凝膠層析法14-15
• 1.4 固定化酶技術(shù)的定義及方法15-16
• 1.4.1 吸附法15
• 1.4.2 包埋法15
• 1.4.3 結(jié)合法15
• 1.4.4 交聯(lián)法15-16
• 1.5 磁性納米粒子的概述16
• 1.6 磁性納米粒子的制備16-19
• 1.6.1 化學共沉淀法16-17
• 1.6.2 高溫分解法17-18
• 1.6.3 微乳液法18
• 1.6.4 金屬還原法18
• 1.6.5 水熱合成法18-19
• 1.6.6 溶膠-凝膠法19
• 1.7 磁性納米粒子的應(yīng)用19-20
• 1.7.1 細胞分離19
• 1.7.2 固定化酶19
• 1.7.3 靶向給藥19-20
• 1.8 生物活性玻璃的概述20
• 1.8.1 生物活性玻璃的簡介20
• 1.8.2 生物活性玻璃的制備20
• 1.9 多級孔生物活性玻璃研究進展20-21
• 1.9.1 多級孔生物活性玻璃的簡介20-21
• 1.9.2 多級孔生物活性玻璃的合成21
• 1.10 立題背景及本論文研究的內(nèi)容21-23
• 第二章 基于溶菌酶適配體磁性納米粒子的制備及其對蛋清中溶菌酶的分離23-44
• 2.1 前言23-24
• 2.2 實驗材料與設(shè)備24-25
• 2.2.1 實驗材料與試劑24
• 2.2.2 實驗儀器與設(shè)備24-25
• 2.3 實驗方法25-28
• 2.3.1 基于溶菌酶適配體磁性納米粒子的制備25
• 2.3.2 基于溶菌酶適配體磁性納米粒子的表征25-26
• 2.3.3 吸附水溶液中溶菌酶的研究26-27
• 2.3.4 蛋清中溶菌酶的分離純化27
• 2.3.5 溶菌酶的活力測定27-28
• 2.4 結(jié)果與討論28-42
• 2.4.1 基于溶菌酶適配體磁性Fe_3O_4納米粒子反應(yīng)條件的優(yōu)化28
• 2.4.2 基于溶菌酶適配體磁性Fe_3O_4納米粒子的表征28-35
• 2.4.3 基于特定適配體磁性Fe_3O_4納米粒子吸附水中溶菌酶的研究35-41
• 2.4.4 基于溶菌酶適配體磁性Fe_3O_4納米粒子分離純化蛋清中的溶菌酶41-42
• 2.4.5 洗脫液中溶菌酶活力的測定42
• 2.5 本章小結(jié)42-44
• 第三章 多級孔生物活性玻璃的制備及其對溶菌酶的固定化應(yīng)用44-63
• 3.1 前言44-45
• 3.2 實驗材料與設(shè)備45
• 3.2.1 實驗材料與試劑45
• 3.2.2 實驗儀器與設(shè)備45
• 3.3 實驗方法45-46
• 3.3.1 介孔生物活性玻璃（MBG）的制備45
• 3.3.2 多級孔生物活性玻璃的制備45
• 3.3.3 載體對溶菌酶的固載與洗脫45-46
• 3.3.4 多級孔材料表征46
• 3.3.5 酶活力的測定46
• 3.4 結(jié)果與討論46-61
• 3.4.1 多級孔生物活性玻璃載體材料的表征46-50
• 3.4.2 多級孔生物活性玻璃載體材料固載溶菌酶條件優(yōu)化50-61
• 3.5 本章小結(jié)61-63
• 第四章 結(jié)論63-64
• 參考文獻64-71
• 導師簡介71-72
• 作者簡介72-73
• 致謝73

【參考文獻】

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本文編號：1037846