RNA干擾(RNAi)是一種轉(zhuǎn)錄后水平的基因調(diào)節(jié)作用,利用RNAi所產(chǎn)生的基因沉默現(xiàn)象能夠用于癌癥等疾病的臨床治療,而RNAi臨床應(yīng)用的關(guān)鍵之一是構(gòu)建安全有效的遞送載體,以實現(xiàn)對基因藥物的有效遞送。本文以天然curdlan多糖為原料,首先通過對其結(jié)構(gòu)單元的C6位進行疊氮和還原,制備不同氨基化程度(30%,50%,70%和100%)的6-氨基-6-脫氧-凝膠多糖(6AC)。經(jīng)IR和13CNMR確定結(jié)構(gòu),通過激光粒度儀和掃描電鏡測試所形成納米粒子的粒徑分布、形貌、Zeta電位,并通過酸堿滴定的方法測定對H。的緩沖能力；然后通過體外細胞siRNA轉(zhuǎn)染試驗對其作為基因載體的安全性及對基因遞送效率等做了研究。研究結(jié)果表明此新型的6AC能形成粒徑約為120nm的納米粒子,且其水溶液具有很好的氫離子負載能力和正的Zeta電位值,6AC與siRNA結(jié)合后形成粒徑約為130nm的粒子：此載體對于HepG2細胞和Hela細胞顯示了較低的細胞毒性,對于A549、H727、HCT116, THP-1和MEF細胞,能夠高效率遞送siRNA使內(nèi)源性靶標mRNA水平下調(diào)70-90%,而且對于小鼠胚胎干細胞能顯著地在...

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．３?ｓｉＲＮＡ的基因沉默機理??Ｆｉｇ．１．３?Ｄｅｌｉｖｅｒｙ?ｏｆ?ｓｉ民ＮＡ?化ｅｒａｐｅｕｔｉｃ??

Ｆｉｇ．１．３?Ｄｅｌｉｖｅｒｙ?ｏｆ?ｓｉ民ＮＡ?化ｅｒａｐｅｕｔｉｃ??１．３．２?ＳｉＲＮＡ治療的限制因素??通過靜脈注射可Ｗ將ＳｉＲＮＡ遞送到組織，如圖１．４所示，ＳｉＲＮＡ經(jīng)過靜脈注射后，通過??血液循環(huán)將ＳｉＲＮＡ遞送分散到組織，在姐織內(nèi)，ＳｉＲＮＡ離開血管進入間隙，....

圖１．４?ＳｉＲＮＡ進入細胞的過程??Ｆｉｇ?１．４?Ｔｈｅ?ｐｒｏｃｅｓｓ?ｏｆ?ｄｅｌｉｖｅｒｉｎｇ?ｓｉＲＮＡ?ｉｍｏ?ｃｅｌｌｓ??

Ｉ?ｎｉＲＮＡ?Ｃｌｅａｖａｇｅ??ＡＡＡＡＡＡ／?＂ＷＶＷ??圖１．３?ｓｉＲＮＡ的基因沉默機理??Ｆｉｇ．１．３?Ｄｅｌｉｖｅｒｙ?ｏｆ?ｓｉ民ＮＡ?化ｅｒａｐｅｕｔｉｃ??１．３．２?ＳｉＲＮＡ治療的限制因素??通過靜脈注射可Ｗ將ＳｉＲＮＡ遞送到組織，如圖１．４所示，ＳｉＲ....

圖１．６單層脂質(zhì)體（Ａ）與多層脂巧體（Ｂ）的結(jié)構(gòu)??Ｆｉｇｌ?．６?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ?ｏｆＭｏｎｏｌａｙｅｒ?ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ?（Ａ）?ａｎｄ?ｔｈｅ?ｍｕｌｔｉｌａｙｅｒ?ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ?（Ｂ）??

內(nèi)蒙古大學碩＋學位論文脂質(zhì)體載體??質(zhì)體具有雙分子層的囊泡結(jié)構(gòu)，是一種人工膜，己經(jīng)成為基因治療中的常用水的部分圍繞在磯脂雙分子層的內(nèi)部，為單層脂質(zhì)體，如圖（Ａ）所示；如果上，雙分子脂質(zhì)膜與水層交替排列形成層脂質(zhì)體，如圖巧）所示。在緩沖液中，可組成多層脂質(zhì)體；具有特定尺寸（１００－....

圖１．?７樹枝狀分于體內(nèi)遞送過程??Ｆｉｇｕｒｅ?１．７?Ｄｅｎｄｒｉｍｅｒｓ?ｄｅｌｉｖｅｒｙ?ｐｒｏｃｅｓｓｅｓ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｃｅｌｌ??

為了提高血液流動過程中環(huán)境的穩(wěn)定性，Ｔａｒａｔｕｌａ提出用一個帶有二硫鍵的樹枝狀分子與??與ＳｉＲＮＡ組裝形成納米粒子進入細胞，細胞質(zhì)中的還原物質(zhì)谷脫甘膚的存在能夠使二硫鏈還??原，進而使ＳｉＲＮＡ在範細胞質(zhì)內(nèi)釋放。如圖１．７所示，裸露的ｓｉＲＮＡ?（Ａ’）經(jīng)過內(nèi)吞作用進入?？?....

本文編號：3982291