第三部分明確hsa-miR-4505對HSPA12B的調(diào)控位點(diǎn)目的明確hsa-miR-4505對HSPA12B的調(diào)控位點(diǎn)方法構(gòu)建luciferase （螢火蟲熒光素酶）表達(dá)載體pGL3-promoter-HSPA12B-3’UTR全長和Hsa-miR-4505結(jié)合位點(diǎn)突變的克隆。分別將它們與pRL（海腎熒光素酶）內(nèi)參質(zhì)粒以及miR-NC和Hsa-miR-4505共同轉(zhuǎn)染HUVEC中,檢測報(bào)告基因的熒光,計(jì)算熒光比值。結(jié)果為了驗(yàn)證hsa-miR-4505是否直接作用HSPA12BmRNA3’UTR上,我們對HumanHSPA12B基因進(jìn)行了報(bào)告基因的檢測。我們分別用正常及突變的HSPA12B-3’UTR克隆轉(zhuǎn)染HUVEC,結(jié)果發(fā)現(xiàn)：正常克隆同hsa-miR-4505 mimic共轉(zhuǎn)后,其熒光比值較NC組低且有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p=0.0039）,突變克隆與hsa-miR-4505 mimic共轉(zhuǎn)后,其熒光比值較NC組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)論正常克隆同hsa-miR-4505 mimic共轉(zhuǎn)后,其熒光比值較NC組低且有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,突變克隆與hsa-miR-4505 mimic共轉(zhuǎn)后,其熒光比值較NC組... 

【文章來源】：中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué)上海市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：96 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞表
前言
第一部分 通過生物信息學(xué)手段對可能調(diào)節(jié)人HSPA12B基因的miRNA進(jìn)行預(yù)測
    材料與方法
    結(jié)果
    結(jié)論
    討論
第二部分 篩選LPS處理HUVEC時對人HSPA12B基因表達(dá)有調(diào)節(jié)作用的miRNA
    材料與方法
    結(jié)果
    結(jié)論
    討論
第三部分 明確hsa-miR-4505對HSPA12B的調(diào)控位點(diǎn)
    材料與方法
    結(jié)果
    結(jié)論
    討論
第四部分 LPS處理HUVEC時hsa-miR-4505表達(dá)改變的機(jī)制
    材料和方法
    結(jié)果
    結(jié)論
    討論
第五部分 Hsa-miR-4505通過HSPA12B加重LPS誘導(dǎo)的HUVEC損傷
    材料和方法
    結(jié)果
    結(jié)論
    討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
在讀期間發(fā)表論文和參加科研工作情況
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]熱休克蛋白A12B對脂多糖誘導(dǎo)肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的影響[J]. 余桂芳,張旭,朱科明.  上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2014(07)



本文編號：3445250