目的：分析耐碳青霉烯類鮑曼不動桿菌（carbapenem-resistant Acinetobacter 6aumannii,CRAB）的分子特征并評價替加環(huán)素聯(lián)合頭孢哌酮/舒巴坦對CRAB的體外、體內(nèi)及細(xì)胞內(nèi)活性。方法：（1）應(yīng)用RT-PCR檢測我院臨床分離的非重復(fù)87株CRAB攜帶blaTEM, blaGES,blaSHV, blaKPC,blnCTX-M-1,blaVIM-1,blaVIM-2,blaIMP-1,blaIMP-2,blanSIM-1, blaNDM-1,blaOXA-23-like,blaOXA-24-like,blaOXA-51-like,blaOXA-58-like等15個碳青霉烯酶耐藥基因情況并測序。（2）應(yīng)用微量肉湯稀釋法測定聯(lián)合抑菌指數(shù)（FICI）,應(yīng)用時間—殺菌曲線評價替加環(huán)素、頭孢哌酮/舒巴坦及聯(lián)合用藥的體外效果。（3）C57BL/6小鼠腹腔內(nèi)注射最低致死劑量的CRAB建立腹膜炎/膿毒癥小鼠模型,分析給藥4h和18h小鼠血、肺、肝、脾、腎各臟器菌落數(shù)并觀察病理。 （4）建立細(xì)胞內(nèi)感染鮑曼不動桿菌模型：小鼠單核巨噬細(xì)胞RAW264.7與CRAB孵育4h... 

【文章來源】：中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：102 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１．１典型陽性基因ＰＣＲ擴增產(chǎn)物電泳圖??

ＡＢ－８菌株、在２４ｈ內(nèi)能清除ＡＢ－４４和ＡＢ－１４菌株。培養(yǎng)時間延長至４８?ｈ，這些??聯(lián)合用藥作用下的細(xì)菌未出現(xiàn)再生長。我們同時評價復(fù)合制劑頭孢呢酮／舒巴坦各??自的成分在聯(lián)合用藥中的作用（圖２．３），結(jié)果表明：１／２ＸＭＩＣ的替加環(huán)素和等劑??量的舒巴坦聯(lián)合在２４ｈ內(nèi)不能清除ＡＢ－８和ＡＢ－４４，２４?ｈ后出現(xiàn)了細(xì)菌的再生長。??因此，替加環(huán)素聯(lián)合頭孢呢酮／舒巴坦的殺菌活性優(yōu)于替加環(huán)素聯(lián)合等劑量的舒巴??坦（Ｐ＜０．０５）?０??１２「（Ａ）?Ｉ?ＡＢ－８?Ｉ?「（Ｂ）?ＡＢ－４４??Ｉ?１?１０?－???＾??！：■％??０?Ｌ＿＿，?，?，＿．?Ｘ?■?０?——‘——‘——‘——‘＾＼?‘）（??０?２?４?８?１２?２４?４８?０?２?４?８?１２?２４?４８??時間（ｈ）?＿（ｈ＞??［（Ｄ）?Ｉ?ＡＢ－１４?１??１０?－?‘?‘?１０?－??０?＾＾?‘?＾?‘?‘?‘?０??‘?１?１?１?￣１＾＿＿Ｉ??０?２?４?８?１２?２４?０?２?４?８?１２?２４?４８??吋間…）?時間⑶??圖２．２替加環(huán)素、頭孢呢酮／舒巴坦單獨和聯(lián)合應(yīng)用對４株廣泛耐藥鮑受不動桿菌的時間一殺??菌曲線。??注：（Ａ）?ＡＢ－８?（ＦＩＣＩ＝０．１３）?；?（Ｂ）?ＡＢ－４４?（ＦＩＣＩ＝０．７５）?；?（Ｃ）?ＡＢ－１９?（ＦＩＣＩ＝１．５）；??（Ｄ）?ＡＢ－１４?（ＦＩＣＩ＝０．３７５）?。?？??—陰性對照，…Ａ…１／２Ｘ?ＭＩＣ替加環(huán)素，…口…１／２Ｘ?ＭＩＣ頭孢呢酮／舒巴坦，…Ｘ…１／２Ｘ??ＭＩＣ替加環(huán)素聯(lián)合頭孢呢酮／舒巴坦

呢酮／舒巴坦和模型組明顯下降（Ｐ＜０．０５）。給藥組小鼠的死亡時間均發(fā)生在２０?ｈ??后，若持續(xù)觀察３６ｈ，仍未死亡的小鼠在連續(xù)觀察７天后仍無死亡。各小鼠的生??存曲線見圖３．１。聯(lián)合用藥組小鼠精神狀態(tài)整體要好于其他組小鼠。??表３．５接種細(xì)菌１２ｈ后模型組（Ｍ組）和對照組（Ｃ組）小鼠的體溫、血細(xì)胞的變化情況??體溫?ＷＢＣ?Ｇ％?Ｌ％?Ｍ％?ＰＬＴ??Ｃ?組?３６．８±０．５?５．７士?０．８?１６．１士０．７?７９．７±?１．２?４．２±?０．４?８３８．８士?３２．３??Ｍ?組?３４．１±１．２＂?１．６±０．７＂?２０．４±?１．６?７５．６土?１．６?２．８±０．６＊?３０１．３±?１０．７＂??？？Ｐ＜０．０１，?＊Ｐ＜０．０５?ＶＳ?對照組??１００－豆?，?Ｔ??９０－?；??一?：?Ｉ?一?Ｃ??承?７０－?－－??一?６０－?；?…Ｍ??＾?５０－?．???Ｉ??—＾?ＴＴ??５?４０－?Ｉ?—?ＴＣ??他?３０－?！?ｍ??２０－?ＴＴＣ??１０－?；?ＴＴＳ??０?Ｉ?Ｉ?Ｉ?１—＊?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ??８?１２?１６?２０?２４?２８?３２?３６??接種時Ｍ?Ｃｈ）??圖３．１各組小鼠的生存曲線。注：Ｃ：對照組；Ｍ：模型組；ＴＴ：替加環(huán)素單藥組；ＴＣ：頭??抱哌酮／舒巴坦組；ＴＴＣ：替加環(huán)素聯(lián)合頭孢呢酮／舒巴坦組；ＴＴＳ：替加環(huán)素聯(lián)合舒巴坦組。??３．４病理觀察組織學(xué)炎癥??各組的腎臟在接種后各時間點沒有觀察到組織學(xué)的變化（圖３．２）。接種２ｈ??后

【參考文獻】：
期刊論文
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