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不動桿菌屬OXA-23及OXA-24/40型碳青霉烯酶傳播機(jī)制研究

發(fā)布時間:2021-02-04 03:49
  不動桿菌屬是院內(nèi)感染重要致病菌之一,以鮑曼-醋酸鈣不動感桿菌復(fù)合體為主,可引起肺炎、皮膚軟組織感染、傷口感染、尿路感染、腦膜炎以及血流感染等。近年來,不動桿菌屬碳青霉烯耐藥率不斷上升,給臨床用藥與治療形成了極大的挑戰(zhàn),而不動桿菌屬碳青霉烯耐藥的主要機(jī)制之一為產(chǎn)OXA型碳青霉烯酶。本研究對國內(nèi)不動桿菌屬OXA-23與OXA-24/40型碳青霉烯酶的傳播機(jī)制進(jìn)行了深入分析。OXA-23酶是不動桿菌屬中最常見的OXA類碳青霉烯酶。本課題組于2009年1月至2010年12月在全國18個省、28家醫(yī)院收集了產(chǎn)OXA-23型碳青霉烯酶的60株鮑曼不動桿菌與3株院內(nèi)不動桿菌,這些菌株來自不同省市地區(qū)以代表不同的遺傳背景。研究通過PCR擴(kuò)增blaOXA-23基因周圍結(jié)構(gòu),S1/ApaI-PFGE-Southern blot明確blaOXA-23基因定位,并通過微量肉湯稀釋法明確菌株美羅培南、亞胺培南的MIC值,探討其耐藥性與基因定位、拷貝數(shù)的關(guān)系。此外,借助電轉(zhuǎn)化、接合轉(zhuǎn)移等方式檢測質(zhì)粒的轉(zhuǎn)移能力,并對代表性質(zhì)粒進(jìn)行了高通量測序與序列分析。研究結(jié)果顯示,攜帶染色體編碼blaOXA-23基因的共有35株... 

【文章來源】:浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:127 頁

【學(xué)位級別】:博士

【文章目錄】:
致謝
中文摘要
Abstract
英文縮略語表
第一部分 不動桿菌屬OXA-23型碳青霉烯酶傳播機(jī)制研究
    引言
    1 材料與方法
        1.1 材料
            1.1.1 菌株來源
            1.1.2 試劑和儀器
        1.2 研究方法
            1.2.1 體外藥物敏感性試驗
            1.2.2 菌種鑒定
OXA-23基因篩查">            1.2.3 blaOXA-23基因篩查
OXA-23基因定位分析">            1.2.4 blaOXA-23基因定位分析
OXA-23基因周圍結(jié)構(gòu)">            1.2.5 PCR擴(kuò)增blaOXA-23基因周圍結(jié)構(gòu)
            1.2.6 細(xì)菌質(zhì)粒提取
            1.2.7 質(zhì)粒接合
            1.2.8 質(zhì)粒電轉(zhuǎn)化
            1.2.9 質(zhì)粒復(fù)制子分型
OXA-23質(zhì)粒高通量測序">            1.2.10 blaOXA-23質(zhì)粒高通量測序
            1.2.11 PCR擴(kuò)增新型復(fù)制子
    2 結(jié)果
OXA-23陽性菌株鑒定結(jié)果及分子分型">        2.1 blaOXA-23陽性菌株鑒定結(jié)果及分子分型
        2.2 藥敏結(jié)果
OXA-23基因的定位">        2.3 blaOXA-23基因的定位
            2.3.1 質(zhì)粒定位
            2.3.2 染色體定位
OXA-23基因定位與碳青霉烯藥敏">        2.4 blaOXA-23基因定位與碳青霉烯藥敏
OXA-23基因周圍結(jié)構(gòu)">        2.5 blaOXA-23基因周圍結(jié)構(gòu)
OXA-23質(zhì)粒可轉(zhuǎn)移性分析">        2.6 blaOXA-23質(zhì)?赊D(zhuǎn)移性分析
OXA-23質(zhì)粒結(jié)構(gòu)分析">        2.7 blaOXA-23質(zhì)粒結(jié)構(gòu)分析
        2.8 質(zhì)粒復(fù)制子分型
    3 討論
    4 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 不動桿菌屬OXA24/40-like碳青霉烯酶傳播機(jī)制研究
    引言
    1 材料與方法
        1.1 材料
            1.1.1 菌株來源
            1.1.2 試劑和儀器
        1.2 研究方法
            1.2.1 PFGE
            1.2.2 細(xì)菌質(zhì)粒提取
OXA-24/40-like基因周圍結(jié)構(gòu)分析">            1.2.3 blaOXA-24/40-like基因周圍結(jié)構(gòu)分析
OXA-24/40-like質(zhì)粒高通量測序">            1.2.4 blaOXA-24/40-like質(zhì)粒高通量測序
    2 結(jié)果
        2.1 分子分型
OXA-24/40-like基因周圍結(jié)構(gòu)">        2.2 blaOXA-24/40-like基因周圍結(jié)構(gòu)
            2.2.1 PCR walking結(jié)果
OXA-24/40-like基因周圍結(jié)構(gòu)分析">            2.2.2 blaOXA-24/40-like基因周圍結(jié)構(gòu)分析
        2.3 質(zhì)粒高通量測序結(jié)果
    3 討論
    4 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
作者簡歷及在讀期間所取得的科研成果


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]2013年中國CHINET細(xì)菌耐藥性監(jiān)測[J]. 胡付品,朱德妹,汪復(fù),蔣曉飛,孫自鏞,陳中舉,胡志東,李金,謝軼,康梅,徐英春,張小江,張朝霞,季萍,王傳清,王愛敏,倪語星,孫景勇,俞云松,林潔,儲云卓,田素飛,徐元宏,沈繼錄,單斌,杜艷,卓超,蘇丹虹,張泓,孔菁,魏蓮花,吳玲,胡云建,艾效曼.  中國感染與化療雜志. 2014(05)
[2]細(xì)菌毒素-抗毒素系統(tǒng)的研究進(jìn)展[J]. 王曉蕾,趙龍旋,張俊杰.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2008(09)



本文編號:3017674

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