放射治療是癌癥的有效治療手段之一,但它同時無可避免的使輻射區(qū)的正常組織,尤其是骨組織產生放射性損傷,例如骨質丟失,骨壞死,甚至病理性骨折。迄今為止,放射性骨損傷的病理變化機制尚未明確,針對放射性骨損傷也沒有有效的預防性或治療性措施。過往實驗研究的動物模型,大多是是采用全身性的輻射,由此引起其他系統(tǒng),例如造血系統(tǒng)放射性損傷,會嚴重干擾對骨損害機制的闡明。在本報告中,我們使用新推出的小動物精確輻射儀（small animal radiation research platform, SARRP）,模仿前列腺癌,直腸癌,宮頸癌等盆腔惡性腫瘤的局部劑量分割放療方案,以3月齡大鼠建立局部放療動物模型。顯微CT標準圖像分析和有限元分析（FEA）的結果表明,局部輻射后骨小梁出現(xiàn)大幅度的骨量減少和力學強度下降。進一步的組織學分析提示輻射后骨質丟失主要原因是新骨形成減少,而不是骨吸收作用增強。這說成骨細胞數(shù)目或功能受損是放射骨損傷的重要細胞機制。重組人甲狀旁腺激素（PTH1-34,特立帕肽）,是美國食品藥監(jiān)局（FDA）批準用于治療嚴重骨質疏松的唯一促骨合成代謝類藥物,我們發(fā)現(xiàn)每天間歇的PTH1-34的皮... 

【文章來源】：浙江大學浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：117 頁

【學位級別】：博士

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致謝
中文摘要
Abstract
目錄
第1章 緒論
    1.1 課題背景
    1.2 放射性骨損傷
        1.2.1 放射性治療現(xiàn)狀
        1.2.2 放射性骨損害的組織細胞學改變
        1.2.3 放射性細胞損害的分子改變
    1.3 放射性骨損傷后骨折
    1.4 放射性骨損傷的治療現(xiàn)狀
    1.5 甲狀旁腺激素以及與WNT信號傳導通路
        1.5.1 Wnt信號傳導通路與骨代謝
        1.5.2 甲狀旁腺激素與wnt信號傳導通路
    1.6 假設與實驗設計
        1.6.1 本文的整體假設
        1.6.2 實驗設計一
        1.6.3 實驗設計二PTH促進放療后成骨細胞DNA修復的機制是通過激活經典的wnt信號傳導通路
    1.7 本章小結
第2章 放射性骨損傷模型的建立
    2.1 放射性骨損害動物模型的建立方法
        2.1.1 動物
        2.1.2 麻醉SD大鼠
        2.1.3 放療過程
        2.1.4 觀察指標
    2.2 結果
    2.3 本章小結
第3章 PTH1-34治療放射性骨損害的療效判定
    3.1 方法
        3.1.1 動物實驗設計
        3.1.2 活體顯微CT掃描和分析
        3.1.3 骨組織形態(tài)計量學指標檢測
        3.1.4 組織學檢測
        3.1.5 統(tǒng)計學
    3.2 結果
        3.2.1 PTH有效防止放療介導的局部骨小梁丟失
        3.2.2 PTH1-34促進成骨細胞以及骨細胞存活是PTH1-34治療放射性骨丟失的重要機制
        3.2.3 PTH1-34有效抑制輻射后成骨細胞以及骨細胞凋亡
        3.2.4 PTH1-34有效抑制輻射后骨髓腔脂肪化
    3.3 討論
    3.4 本章小結
第4章 WNT/B-CATENIN通路激活與DNA修復
    4.1 材料與方法
        4.1.1 重要試劑
        4.1.2 建立輻射介導細胞凋亡的體外模型
        4.1.3 siRNA沉默實驗
        4.1.4 細胞DNA雙鏈斷裂（DSB）免疫熒光檢測
        4.1.5 檢測細胞DNA微損傷的彗星實驗（Comet assay）
        4.1.6 細胞蛋白表達的免疫印跡法檢測
        4.1.7 顱骨體外培養(yǎng)及放射
        4.1.8 體外顱骨培養(yǎng)的免疫組織化學檢測
        4.1.9 統(tǒng)計學分析
    4.2 結果
        4.2.1 PTH激活PKA/β-catenin通路減輕細胞凋亡
        4.2.2 PTH1-34加速輻射后的DNA修復
        4.2.3 活化的Wnt典型通路保護骨原細胞,成骨細胞,骨細胞和免于輻射誘導的細胞死亡
        4.2.4 Ku70介導Wnt3a和PTH促進DNA修復和細胞生存作用
    4.3 討論
    4.4 本章小結
第5章 全文總結
參考文獻
綜述
    參考文獻
作者簡介



本文編號：2921628