【摘要】：目的分離、鑒定具備重金屬鉛抗性、鉛吸附性的乳酸菌,為成為具有排鉛功能的新型保健食品提供新的菌源。方法利用乳酸菌選擇性培養(yǎng)基MRS,從30份健康、足月新生兒糞便分離耐鉛菌,通過形態(tài)特征,16S rRNA測序,構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹;利用《伯杰氏系統(tǒng)細(xì)菌學(xué)手冊》進(jìn)行生理生化、藥敏檢測和耐酸耐膽鹽試驗(yàn);進(jìn)一步通過ICP-OES法檢測分離菌對鉛離子的吸附能力。結(jié)果分離得到3株可耐受500 mg/L鉛離子濃度的干酪乳桿菌,均對青霉素、頭孢曲松敏感。耐酸耐膽鹽試驗(yàn)顯示p H 2.0人工胃液培養(yǎng)3 h,細(xì)菌數(shù)保持相同數(shù)量級,0.3%的膽鹽環(huán)境8 h存活率可達(dá)62.5%。吸附實(shí)驗(yàn)表明對低濃度(1 mg/L)鉛離子的吸附率高達(dá)90.4%,對高濃度(50 mg/L)鉛離子的吸附率可達(dá)86.27%。結(jié)論從新生兒糞便中分離到3株具備鉛抗性、鉛吸附性、耐酸耐膽鹽的干酪乳桿菌,為利用益生菌膳食策略緩解鉛中毒效應(yīng)開辟新的途徑和解決方案。
【圖文】：

JSouthMedUniv,2016,36(12):1602-1608http://www.j-smu.com均呈乳白色，濕潤，圓形凸起，邊緣整齊，直徑約1~2mm，光鏡下觀察均為革蘭陽性，桿狀，無芽孢，與標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC7469染色性一致（圖1）。圖1耐鉛菌株的革蘭染色Fig.1Gramstainingresultsofthelead-resistantstrains(Oil,originalmagnification:×100).A:SYF-B;B:SYF-E;C:SYF-I;D:ATCC7469.ABCD2.3耐鉛菌株的鑒定對篩選的3株耐鉛菌株提取基因組DNA，進(jìn)行PCR擴(kuò)增，目的位置可見清晰條帶，如圖2所示。菌株SYF-B，SYF-E，SYF-I的PCR產(chǎn)物送上海生工生物技術(shù)有限公司測定16SrRNA序列，進(jìn)行BLAST比對。結(jié)果表明3株菌株與干酪乳桿菌（Lactobacilluscasei）不同菌株的16SrRNA序列高度同源。分別達(dá)到100%，99%和100%（表2）。采用軟件MEGA7.0中的Neighbor-joining法構(gòu)建16SrRNA序列系統(tǒng)發(fā)育樹，結(jié)果與BLAST分析一致。分離菌株和干酪乳桿菌菌株聚為一簇（圖3），，表明它們親緣關(guān)系最近。結(jié)合菌落特征、細(xì)菌形態(tài)特征與16SrRNA序列分析結(jié)果，3株菌株均鑒定為干酪乳桿菌（Lactobacilluscasei）菌種。2.4生理生化實(shí)驗(yàn)參照《伯杰氏系統(tǒng)細(xì)菌學(xué)手冊》有關(guān)干酪乳桿菌的描述，進(jìn)行生理生化試驗(yàn)，結(jié)果表明，3株菌均符合干酪乳桿菌的生物學(xué)特性，為干酪乳桿菌非鼠李糖亞種（表3）。2.5藥敏試驗(yàn)結(jié)果試驗(yàn)顯示3株耐鉛菌株對慶大霉素均不敏感，對青霉素、頭孢曲松均敏感，表明基礎(chǔ)抗生素青霉素即可有效抑制其生長（圖4）。圖2菌株SYF-B,SYF-E,SYF-I的16SrDNA的PCR產(chǎn)物Fig.2GelelectrophoresisofPCR-amplifiedfragments.M:Marker;0:Control;1,2:SYF-B;3,4:SYF-El;5,6:SYF-I.M0123456bp20001000750500250表2耐鉛菌株的16SrRNA序列分析Tab.216SrRNAsequenceanalysisoflead-resist

JSouthMedUniv,2016,36(12):1602-1608http://www.j-smu.com均呈乳白色，濕潤，圓形凸起，邊緣整齊，直徑約1~2mm，光鏡下觀察均為革蘭陽性，桿狀，無芽孢，與標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC7469染色性一致（圖1）。圖1耐鉛菌株的革蘭染色Fig.1Gramstainingresultsofthelead-resistantstrains(Oil,originalmagnification:×100).A:SYF-B;B:SYF-E;C:SYF-I;D:ATCC7469.ABCD2.3耐鉛菌株的鑒定對篩選的3株耐鉛菌株提取基因組DNA，進(jìn)行PCR擴(kuò)增，目的位置可見清晰條帶，如圖2所示。菌株SYF-B，SYF-E，SYF-I的PCR產(chǎn)物送上海生工生物技術(shù)有限公司測定16SrRNA序列，進(jìn)行BLAST比對。結(jié)果表明3株菌株與干酪乳桿菌（Lactobacilluscasei）不同菌株的16SrRNA序列高度同源。分別達(dá)到100%，99%和100%（表2）。采用軟件MEGA7.0中的Neighbor-joining法構(gòu)建16SrRNA序列系統(tǒng)發(fā)育樹，結(jié)果與BLAST分析一致。分離菌株和干酪乳桿菌菌株聚為一簇（圖3），表明它們親緣關(guān)系最近。結(jié)合菌落特征、細(xì)菌形態(tài)特征與16SrRNA序列分析結(jié)果，3株菌株均鑒定為干酪乳桿菌（Lactobacilluscasei）菌種。2.4生理生化實(shí)驗(yàn)參照《伯杰氏系統(tǒng)細(xì)菌學(xué)手冊》有關(guān)干酪乳桿菌的描述，進(jìn)行生理生化試驗(yàn)，結(jié)果表明，3株菌均符合干酪乳桿菌的生物學(xué)特性，為干酪乳桿菌非鼠李糖亞種（表3）。2.5藥敏試驗(yàn)結(jié)果試驗(yàn)顯示3株耐鉛菌株對慶大霉素均不敏感，對青霉素、頭孢曲松均敏感，表明基礎(chǔ)抗生素青霉素即可有效抑制其生長（圖4）。圖2菌株SYF-B,SYF-E,SYF-I的16SrDNA的PCR產(chǎn)物Fig.2GelelectrophoresisofPCR-amplifiedfragments.M:Marker;0:Control;1,2:SYF-B;3,4:SYF-El;5,6:SYF-I.M0123456bp20001000750500250表2耐鉛菌株的16SrRNA序列分析Tab.216SrRNAsequenceanalysisoflead-resist

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 陸長虹,蔡威,湯慶婭,馮一,于黎華;健康新生兒靜息能量消耗的研究[J];中華兒科雜志;2003年01期

2 張浩琳;;健康新生兒的溫暖鎮(zhèn)痛療法[J];中國疼痛醫(yī)學(xué)雜志;2012年06期

3 郝翼中;李新景;;健康新生兒191例心電圖分析[J];山西醫(yī)藥雜志;1982年05期

4 汪潤蓀,周春秀,陳小立;91名健康新生兒顱內(nèi)壓的測量[J];湖南醫(yī)學(xué);1985年03期

5 方奉淮;廣西壯鄉(xiāng)武嗚縣175例壯族健康新生兒血象調(diào)查報告[J];臨床檢驗(yàn)雜志;1987年02期

6 李助宣;健康新生兒、嬰兒可觸知的淋巴結(jié)[J];國外醫(yī)學(xué)(兒科學(xué)分冊);1987年05期

7 趙侯榮;;足月健康新生兒血壓正常值多少?有何變化?(文摘)[J];新生兒科雜志;1988年03期

8 表鐘九,肖漢林,樸竹(扌亻古),佟學(xué)權(quán),楊閣富,郭麗華;510名朝鮮族健康新生兒面部發(fā)育幾項(xiàng)生理常數(shù)的調(diào)查研究[J];實(shí)用兒科臨床雜志;1990年02期

9 戈光輝;魯恩慶;;120例健康新生兒指甲面積調(diào)查研究[J];湖北省衛(wèi)生職工醫(yī)學(xué)院學(xué)報;1991年01期

10 樓金梁;211例健康新生兒心電圖分析[J];溫州醫(yī)學(xué)院學(xué)報;1985年02期

相關(guān)會議論文 前4條

1 王立;吳光聲;周芳;;健康新生兒生后120小時內(nèi)經(jīng)皮膽紅素水平的研究[A];2012年江浙滬兒科學(xué)術(shù)年會暨浙江省醫(yī)學(xué)會兒科學(xué)分會學(xué)術(shù)年會、兒內(nèi)科疾病診治新進(jìn)展國家級學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2012年

2 陳灝珠;陳允欽;金雪娟;周俊;陳斌;孫愛軍;鄒云增;葛均波;;上海市區(qū)2008至2009年健康新生兒及體檢人群血脂水平調(diào)查[A];第十三次全國心血管病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2011年

3 陶黎梅;凌萬里;顧梅青;錢建青;周劍峰;朱懌東;徐詠梅;;亞健康新生兒不同日齡Hb、MCV及RDW變化規(guī)律臨床意義研究[A];2012年江浙滬兒科學(xué)術(shù)年會暨浙江省醫(yī)學(xué)會兒科學(xué)分會學(xué)術(shù)年會、兒內(nèi)科疾病診治新進(jìn)展國家級學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2012年

4 蔡寶萍;曹蕾;尹娜;王桂霞;;新生兒缺氧缺血性腦病時血漿神經(jīng)降壓素的變化[A];2004年全國危重病急救醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議論文集[C];2004年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 何源遠(yuǎn);健康新生兒出生后早期脈搏血氧飽和度的動態(tài)觀察[D];浙江大學(xué);2009年

本文編號：2557553