發(fā)布時間：2019-09-22 07:23

【摘要】：目的研究引起兒童感染的沙門菌耐藥特點及快速鑒定方法。方法選擇沙門菌75株,使用標(biāo)準(zhǔn)生物化學(xué)和血清學(xué)試驗對所有菌株進行鑒定;使用16S rRNA基因測序法鑒定;使用基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時間質(zhì)譜(matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)法鑒定,以上兩種方法結(jié)果與傳統(tǒng)培養(yǎng)方法結(jié)果進行比對分析。使用Kerby-Bauer紙片擴散法對常用抗生素進行敏感性試驗,使用聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction,PCR)測定對廣譜β-內(nèi)酰胺類藥物耐藥的基因。結(jié)果 75株沙門菌中,鼠傷寒沙門菌和腸炎沙門菌檢出率最高,分別為32株和26株。16S rRNA基因測序法與傳統(tǒng)培養(yǎng)法的符合率為100%。MALDI-TOF-MS法的屬符合率為100%,其中鑒定率在99.9%以上的為17株,90%以上的為32株,80%以上的為26株,結(jié)果均可信,但其對具體血清型的符合率不高。75株沙門菌中,耐藥率最高的是氨芐西林(69.3%,52/75),其次是氨芐西林/舒巴坦(44.0%,33/75),第三是萘啶酸(42.7%,32/75)。75株沙門菌中共檢出19株對廣譜β-內(nèi)酰胺類藥物耐藥,占25.3%。19株中有15株攜帶bla CTX-M基因(8株為bla CTX-M-14,2株為bla CTX-M-9,1株為bla CTX-M-34,2株為bla CTX-M-3,2株為bla CTX-M-15),8株攜帶bla TEM-1基因,4株攜帶bla OXA-1基因。結(jié)論 16S rRNA基因測序法作為細(xì)菌鑒定的金標(biāo)準(zhǔn),以其快速準(zhǔn)確著稱,可作為傳統(tǒng)鑒定法的補充方法。MALDI-TOF-MS法可以快速鑒定沙門菌,但僅在科研模式下指向性地提示血清型,因此需采用其他輔助技術(shù)進行鑒定。引起兒童腹瀉的沙門菌對多種抗生素耐藥,對3代頭孢菌素類的耐藥主要由bla CTX-M型引起。
【圖文】：

第3期胡立新等:兒童感染沙門菌耐藥特點及鑒定方法的研究沙門菌株中，21株對所有的抗生素均敏感，15株對1種抗生素耐藥，5株對2種抗生素耐藥，34株對3種及以上的抗生素耐藥。其中耐藥率最高的是氨芐西林(69.3%，52/75)，其次是氨芐西林/舒巴坦(44.0%，33/75)，萘啶酸(42.7%，32/75)，詳見表5。75株沙門菌中共檢出19株對廣譜β－內(nèi)酰胺類耐藥，占25.3%。圖1PCＲ擴增電泳圖Fig.1PCＲamplificationN:negativecontrol;M:marker;No.1－16:Salmonellarespectively．表5沙門菌抗生素敏感試驗結(jié)果Tab.5ＲesultsofantibioticsensitivitytestofSalmonellaNameofantibioticsＲesistanceNumberＲatio/%IntermediaryNumberＲatio/%SensitiveNumberＲatio/%Ampicillin5269.3002330.7Chloramphenicol1216.022.76181.3Ciprofloxacin68.0912.06080.0Ceftriaxone1925.311.35573.3Cefepime1520.0006080.0Imipenem000075100.0Meropenem000075100.0Sulfamethoxazole1418.7006181.3Ceftazidime2026.711.35472.0Ampilillin-sulbactam3344.034.03952.0Nalidixicacid3242.722.74154.775株沙門菌中共檢出對廣譜β－內(nèi)酰胺類耐藥的菌株19株，占25.3%。19株沙門菌中有2株未擴增出β－內(nèi)酰胺類耐藥基因，其中攜帶blaTEM基因的有8株，經(jīng)DNA測序表明均為blaTEM-1型;攜帶blaOXA基因的有4株，經(jīng)DNA測序表明均為blaOXA-1型;攜帶blaCTX-M基因的有15株，包括blaCTX-M-1型5株，blaCTX-M-9型10株。經(jīng)DNA測序表明，5株blaCTX-M-1型中，1株為blaCTX-M-1亞型，2株為blaCTX-M-3亞型，2株為blaCTX-M-15亞型。10株blaCTX-M-9型中，2株為blaCTX-M-9亞型，8株為blaCTX-M-14亞型。未檢出blaSHV基因、blaCTX-M-2基因和blaCTX-M-8基因。具體的基因型及分布?

第3期胡立新等:兒童感染沙門菌耐藥特點及鑒定方法的研究沙門菌株中，21株對所有的抗生素均敏感，15株對1種抗生素耐藥，5株對2種抗生素耐藥，34株對3種及以上的抗生素耐藥。其中耐藥率最高的是氨芐西林(69.3%，52/75)，其次是氨芐西林/舒巴坦(44.0%，33/75)，萘啶酸(42.7%，32/75)，詳見表5。75株沙門菌中共檢出19株對廣譜β－內(nèi)酰胺類耐藥，占25.3%。圖1PCＲ擴增電泳圖Fig.1PCＲamplificationN:negativecontrol;M:marker;No.1－16:Salmonellarespectively．表5沙門菌抗生素敏感試驗結(jié)果Tab.5ＲesultsofantibioticsensitivitytestofSalmonellaNameofantibioticsＲesistanceNumberＲatio/%IntermediaryNumberＲatio/%SensitiveNumberＲatio/%Ampicillin5269.3002330.7Chloramphenicol1216.022.76181.3Ciprofloxacin68.0912.06080.0Ceftriaxone1925.311.35573.3Cefepime1520.0006080.0Imipenem000075100.0Meropenem000075100.0Sulfamethoxazole1418.7006181.3Ceftazidime2026.711.35472.0Ampilillin-sulbactam3344.034.03952.0Nalidixicacid3242.722.74154.775株沙門菌中共檢出對廣譜β－內(nèi)酰胺類耐藥的菌株19株，占25.3%。19株沙門菌中有2株未擴增出β－內(nèi)酰胺類耐藥基因，其中攜帶blaTEM基因的有8株，經(jīng)DNA測序表明均為blaTEM-1型;攜帶blaOXA基因的有4株，，經(jīng)DNA測序表明均為blaOXA-1型;攜帶blaCTX-M基因的有15株，包括blaCTX-M-1型5株，blaCTX-M-9型10株。經(jīng)DNA測序表明，5株blaCTX-M-1型中，1株為blaCTX-M-1亞型，2株為blaCTX-M-3亞型，2株為blaCTX-M-15亞型。10株blaCTX-M-9型中，2株為blaCTX-M-9亞型，8株為blaCTX-M-14亞型。未檢出blaSHV基因、blaCTX-M-2基因和blaCTX-M-8基因。具體的基因型及分布?
【作者單位】： 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京兒童醫(yī)院檢驗中心;
【分類號】：R446.5;R725.1

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本文編號：2539835