【摘要】：目的研究克雷伯菌屬對(duì)亞胺培南耐藥機(jī)制以及KPC-2基因在克雷伯菌屬中傳播機(jī)制。方法收集四川大學(xué)華西醫(yī)院兩個(gè)階段(2009~2010年和2012~2013年)分離的對(duì)亞胺培南耐藥的克雷伯菌屬細(xì)菌。瓊脂稀釋法測(cè)定亞胺培南最低抑菌濃度(MIC),CARB ChromID平板和改良Hodges試驗(yàn)檢測(cè)碳青霉烯耐藥表型,PCR檢測(cè)細(xì)菌的KPC-2基因表達(dá)。質(zhì)粒接合試驗(yàn)檢測(cè)質(zhì)粒傳播性。隨機(jī)引物擴(kuò)增多態(tài)性DNA(RAPD)方法和腸桿菌基因間重復(fù)一致序列聚合酶鏈反應(yīng)(ERIC-PCR)技術(shù)分別用于分析質(zhì)粒和菌株的同源性。結(jié)果第一階段篩選并確證耐亞胺培南的3株產(chǎn)酸克雷伯菌首先獲得碳青酶烯類抗生素耐藥性,第二階段篩選并確證耐亞胺培南的7株肺炎克雷伯菌出現(xiàn)相同的獲得性耐藥。PCR顯示10株細(xì)菌均攜帶KPC-2型基因。質(zhì)粒接合試驗(yàn)顯示產(chǎn)酸克雷伯菌中攜帶KPC-2基因的質(zhì)粒可以傳遞到受體菌,且與KPC-2基因陽性的肺炎克雷伯菌中攜帶的質(zhì)粒具有同源性。ERIC-PCR結(jié)果顯示7株KPC-2基因陽性的肺炎克雷伯菌具有同源性。結(jié)論四川大學(xué)華西醫(yī)院分離的對(duì)亞胺培南耐藥的肺炎克雷伯菌和產(chǎn)酸克雷伯菌主要耐藥機(jī)制是產(chǎn)生KPC-2型碳青霉烯酶。產(chǎn)酸克雷伯菌中攜帶KPC-2基因質(zhì)粒,該質(zhì)粒具有傳遞性且與肺炎克雷伯菌攜帶質(zhì)粒相同。肺炎克雷伯菌中耐藥株的傳播形式為同一克隆傳播,而在克雷伯菌屬中不同菌種間耐藥傳播途徑為同一質(zhì)粒的水平傳播。
[Abstract]:Objective To study the mechanism of the resistance of Klebsiella to imipenem and the mechanism of the KPC-2 gene in the genus Klebsiella. Methods The isolates of Imipenem-resistant Klebsiella bacteria isolated from the two stages (2009-2010 and 2012-2013) of the West China Hospital of Sichuan University were collected. The minimal inhibitory concentration (MIC) of imipenem, the CARB ChromeID plate and the modified Hodges test were used to detect the resistance phenotype of carbapenem, and the expression of the KPC-2 gene of the bacteria was detected by PCR. Plasmid-binding assay was used to detect plasmid propagation. RAPD and ERIC-PCR were used to analyze the homology of plasmid and strain. Results Three strains of Klebsiella pneumoniae resistant to imipenem were first screened and confirmed to be resistant to carbapenem antibiotics. The second stage of screening and confirmation of imipenem-resistant 7 strains of Klebsiella pneumoniae showed the same acquired resistance. PCR showed that 10 strains of bacteria carried the KPC-2 type gene. The plasmid-binding assay shows that the plasmid carrying the KPC-2 gene in the acid-producing klebsiella can be transferred to the recipient bacterium and has homology with the plasmid carried in the klebsiella pneumoniae positive by the KPC-2 gene. The results of ERIC-PCR show that the 7 KPC-2 gene-positive Klebsiella pneumoniae has homology. Conclusion The main drug-resistant mechanism of Klebsiella pneumoniae and klebsiella for imipenem-resistant Klebsiella pneumoniae isolated from West China Hospital of Sichuan University is the production of the KPC-2 carbapenem. The klebsiella-producing klebsiella carries the KPC-2 gene plasmid, and the plasmid has the transmission property and is the same as that of the Klebsiella pneumoniae carrying plasmid. The transmission forms of the drug-resistant strains in Klebsiella pneumoniae are the same and the transmission of drug-resistant strains in the genus Klebsiella is the same as that of the same plasmid.
【作者單位】： 四川大學(xué)華西醫(yī)院實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(No.81000712)資助
【分類號(hào)】：R440

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本文編號(hào)：2501143