【摘要】：通過構(gòu)建PET28a-WalR表達載體并在大腸桿菌BL21中表達WalR重組蛋白,以評價其對C57小鼠的免疫原性;并分析其在不同血清型肺炎鏈球菌中的保守性和B細胞的抗原表位。以肺炎鏈球菌D39血清型WalR基因為模板,構(gòu)建重組質(zhì)粒PET28a-WalR并轉(zhuǎn)入BL21誘導(dǎo)表達目的蛋白質(zhì)。采用Clustal X 2.1軟件對WalR蛋白在不同血清型S.pn中的保守性進行分析;利用DNASTAR軟件對其B細胞抗原表位進行分析。結(jié)果顯示,成功構(gòu)建PET28a-Wal R重組表達載體,經(jīng)IPTG誘導(dǎo)后有大量高純度的目的蛋白質(zhì),但其主要以包涵體形式存在;Wal R蛋白在不同血清型肺炎鏈球菌中高達99.4%,其B細胞抗原表位可能位于9-16、35-42、95-111、113-135、150-161、200-218等氨基酸序列位點。成功獲得大量以包涵體形式表達的肺炎鏈球菌Wal R重組蛋白,并對其保守性和抗原表位進行了系統(tǒng)分析。
[Abstract]:PET28a-WalR expression vector was constructed and WalR recombinant protein was expressed in E. coli BL21 to evaluate its immunogenicity to C57 mice, and its conservatism in different serotypes of Streptococcus pneumoniae and antigen epitopes of B cells were analyzed. Using Streptococcus pneumoniae D39 serotype WalR as template, the recombinant plasmid PET28a-WalR was constructed and transferred into BL21 to induce the expression of the target protein. The conservatism of WalR protein in different serotypes of S.pn was analyzed by Clustal X 2.1 software, and its B cell epitope was analyzed by DNASTAR software. The results showed that PET28a-Wal R recombinant expression vector was successfully constructed and a large number of high purity target proteins were induced by IPTG, but they mainly existed in the form of inclusion bodies. Wal R protein is as high as 99.4% in different serotypes of Streptococcus pneumoniae. Its B cell epitope may be located at 9: 16, 35 / 42, 95: 111113: 135150 / 161200 / 218 and other amino acid sites. A large number of recombinant proteins of Streptococcus pneumoniae Wal R expressed in the form of inclusion bodies were successfully obtained and their conserved and antigenic epitopes were systematically analyzed.
【作者單位】： 遵義醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗系;遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院檢驗科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(81460317) 貴州省科技攻關(guān)項目(黔科合SY字(2012)3092號)
【分類號】：R446.1

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