發(fā)布時(shí)間：2019-04-07 20:04

【摘要】：目的觀察早期注射骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)對(duì)制動(dòng)大鼠骨骼肌細(xì)胞Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)的影響方法取幼齡大鼠(80-100g)脛骨和股骨,分離培養(yǎng)大鼠BMSCs。用可塑性石膏制備右下肢管型固定肌萎縮模型,根據(jù)隨機(jī)數(shù)字分組法將24只大鼠分成假手術(shù)組,干細(xì)胞組,PBS組,干細(xì)胞組大鼠下肢制動(dòng)48h后比目魚肌局部多點(diǎn)注射1×106個(gè)BMSCs;PBS組大鼠下肢制動(dòng)48h后注射等量磷酸緩沖液(phosphate-buffered saline,PBS);假手術(shù)組大鼠下肢包裹相同重量石膏且不限制關(guān)節(jié)活動(dòng),48h后注射等量PBS,14天后各組大鼠拆除石膏取標(biāo)本分析。結(jié)果培養(yǎng)中的大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞形態(tài)以梭形細(xì)胞為主,呈放射狀排列的細(xì)胞集落,細(xì)胞生長(zhǎng)旺盛,可連續(xù)穩(wěn)定傳代10代以上。實(shí)驗(yàn)中第4代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞表面標(biāo)志CD44,CD90均呈陽(yáng)性表達(dá),陽(yáng)性率分別為95.84%,96.00%,而CD34,CD45陽(yáng)性率極低,其陽(yáng)性表達(dá)率分別為3.81%,4.25%。Western blot結(jié)果:與假手術(shù)組大鼠比目魚肌中Bax和Bcl-2蛋白表達(dá)量[(0.14±0.11);(0.81±0.06)]比較,干細(xì)胞組和PBS組Bax蛋白表達(dá)量[(0.41±0.08);(0.63±0.10)]明顯升高,而兩組Bcl-2蛋白表達(dá)量[(0.47±0.14);(0.22±0.13)]明顯降低;干細(xì)胞組中Bax蛋白的表達(dá)較PBS組降低明顯,而Bcl-2蛋白的表達(dá)量顯著增高,差異有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義意義(P0.05)。結(jié)論制動(dòng)大鼠骨骼肌早期注射BMSCs,可引起抗凋亡蛋白Bcl-2上調(diào)、促凋亡蛋白Bax表達(dá)的下調(diào)。
[Abstract]:Objective to observe the effect of early injection of bone marrow mesenchymal stem cells (bone mesenchymal stem cells,BMSCs) on the expression of Bcl-2,Bax protein in skeletal muscle cells of rats. Methods BMSCs. was isolated from tibia and femur of young rats (80 g) and cultured in vitro. 24 rats were divided into three groups: sham operation group, stem cell group, PBS group, stem cell group and stem cell group. After 48 hours of braking, 1 脳 10 6 BMSCs; were injected into the flounder muscle. Rats in PBS group were injected with equal phosphate buffer (phosphate-buffered saline,PBS) 48 hours after braking. The lower extremities of the sham-operated rats were covered with the same weight gypsum and the joint activity was not restricted. 48 hours after the injection of the same amount of PBS,14, the samples of the rats in each group were removed and analyzed. Results the cultured rat bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) were mainly spindle-shaped cells with radially arranged colonies. The cells grew vigorously and could be continuously and stably passaged for more than 10 generations. The positive rate of CD44,CD90 was 95.84%, 96.0% respectively, while the positive rate of CD34,CD45 was very low, the positive rate was 3.81%, the positive rate of BMSCs was 95.84% and 96.0%, respectively, and the positive rate of BMSCs was 3.81%. 4.25%.Western blot results: compared with sham-operated group, the expression of Bax and Bcl-2 protein in soleus muscle [(0.14 鹵0.11)]; (0.81 鹵0.06), the expression of Bax protein in stem cell group and PBS group [(0.41 鹵0.08); (0.63 鹵0.10)] was significantly higher than that in control group [(0.47 鹵0.14)], while the expression of Bcl-2 protein in both groups was significantly higher than that in control group [(0.47 鹵0.14)]. The expression of Bax protein in stem cell group was significantly lower than that in PBS group, while the expression of Bcl-2 protein in stem cell group was significantly higher than that in PBS group (P0.05). Conclusion early injection of BMSCs, into skeletal muscle of rats can up-regulate the expression of anti-apoptotic protein Bcl-2 and down-regulate the expression of pro-apoptotic protein Bax.
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R49

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本文編號(hào)：2454381