【摘要】：目的構(gòu)建肺炎克雷伯菌rcs B基因缺失的無(wú)痕突變株和回補(bǔ)株,通過(guò)對(duì)突變株的超粘性和生物膜表型進(jìn)行分析,探討轉(zhuǎn)錄調(diào)控子Rcs B對(duì)細(xì)菌超粘性和生物膜形成能力的影響。方法首先構(gòu)建突變株Δrcs B,PCR擴(kuò)增rcs B基因上下游同源臂片段,克隆到質(zhì)粒p KO3-Km上,將重組質(zhì)粒導(dǎo)入肺炎克雷伯菌NTUH-K2044中,經(jīng)同源重組后篩選得到無(wú)痕突變株。然后構(gòu)建回補(bǔ)株,擴(kuò)增rcs B基因片段,克隆到質(zhì)粒p BAD33上,將重組質(zhì)粒導(dǎo)入突變株Δrcs B中,得到回補(bǔ)株。測(cè)定野生株、突變株、回補(bǔ)株的超粘性和生物膜形成能力。結(jié)果成功構(gòu)建rcs B基因缺失的無(wú)痕突變株Δrcs B和回補(bǔ)株C-Δrcs B。與野生株相比,突變株超粘性和生物膜形成能力均減弱,回補(bǔ)株介于野生株和突變株之間。結(jié)論轉(zhuǎn)錄調(diào)控子Rcs B對(duì)肺炎克雷伯菌超粘性和生物膜形成具有正向調(diào)控作用。
[Abstract]:Objective to construct the scarless mutant and complement strain of Klebsiella pneumoniae rcs B gene deletion. By analyzing the hyperviscosity and biofilm phenotype of the mutant, the effect of transcription regulator Rcs B on bacterial hyperviscosity and biofilm formation was studied. Methods the upstream and downstream homologous arm fragments of rcs B gene were amplified by 螖 rcs BG-PCR and cloned into plasmid p KO3-Km. The recombinant plasmid was introduced into NTUH-K2044 of Klebsiella pneumoniae. After homologous recombination, trace free mutant was obtained. Then, the complement strain was constructed, the fragment of rcs B gene was amplified and cloned into plasmid p BAD33. The recombinant plasmid was introduced into the mutant 螖 rcs B and the complementary strain was obtained. The hyperviscosity and biofilm formation ability of wild, mutant and compensatory strains were determined. Results the trace free mutant 螖 rcs B and the complement strain C- 螖 rcs B were successfully constructed. Compared with the wild strain, the superviscosity and biofilm formation ability of the mutant were weakened, and the compensatory strain was between the wild and the mutant. Conclusion Transcriptional regulator Rcs B can positively regulate the hyperviscosity and biofilm formation of Klebsiella pneumoniae.
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生與管理學(xué)院醫(yī)學(xué)與社會(huì)發(fā)展研究中心健康領(lǐng)域社會(huì)風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)治理協(xié)同創(chuàng)新中心;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(31200064,31071093,31170129)~~
【分類號(hào)】：R446.5

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6 王京;引起肝膿腫的肺炎克雷伯菌毒力基因分析與分子流行特征研究[D];中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2013年

7 賈艷;豬源肺炎克雷伯菌菌毛致病的分子基礎(chǔ)及其免疫相關(guān)抗原表位的篩選[D];吉林大學(xué);2007年

8 趙麗娜;基層醫(yī)療機(jī)構(gòu)大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌氟喹諾酮耐藥分子流行及遺傳特征研究[D];浙江大學(xué);2015年

9 李君杰;產(chǎn)KPC酶肺炎克雷伯菌對(duì)磷霉素耐藥及傳播機(jī)制研究[D];浙江大學(xué);2015年

10 李家斌;產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌流行病學(xué)及分子生物學(xué)研究[D];浙江大學(xué);2002年

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3 王云;呼吸道合胞病毒合并肺炎克雷伯菌感染所致肺炎與TLR4-NF-κB信號(hào)通路關(guān)系的初步研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

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本文編號(hào)：2383694