【摘要】：目的探討多藥耐藥外排泵基因在白色假絲酵母菌和克柔假絲酵母菌耐唑類藥物中的作用,對假絲酵母菌屬的耐藥研究提供理論基礎(chǔ)。方法通過體外藥敏試驗篩選出臨床白色假絲酵母菌和克柔假絲酵母菌對伊曲康唑的耐藥菌株和敏感菌株,使用實時熒光定量PCR(FQ-RT-PCR)方法檢測耐藥和敏感菌株多藥耐藥外排泵基因(CDR1/CDR2/ABC1)的mRNA表達水平,使用羅丹明6G為示蹤劑了解白色假絲酵母菌和克柔假絲酵母菌的藥物外排情況。結(jié)果臨床分離的白色假絲酵母菌和克柔假絲酵母菌對氟胞嘧啶、兩性霉素B的敏感率均較高,均80.00%,白色假絲酵母菌對伊曲康唑的耐藥率較高,70.00%;根據(jù)實時熒光定量RT-PCR實驗獲得的ΔCt值,經(jīng)統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn),白色假絲酵母菌耐藥菌株CDR1、CDR2mRNA的表達量高于敏感菌株的表達量,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),但克柔假絲酵母菌中僅有一株耐藥菌株出現(xiàn)高表達,敏感菌株和耐藥菌株ABC1mRNA的表達量差異無統(tǒng)計學意義;通過羅丹明6G外排試驗測定,隨時間延長羅丹明6G外排明顯增加,在CDR1/CDR2mRNA高表達的耐藥菌株明顯增高。結(jié)論外排泵基因CDR1、CDR2在白色假絲酵母菌耐藥性的產(chǎn)生中可能起到一定作用,但不能說明外排泵基因ABC1在克柔假絲酵母菌耐藥性的產(chǎn)生中無作用,因樣本量較小,需要擴大樣本量進一步研究。
[Abstract]:Objective to investigate the role of multidrug resistant efflux pump gene in the study of resistance to azoles in Candida albicans and Candida krrostris, and to provide a theoretical basis for the study of drug resistance of Candida. Methods the resistant and sensitive strains of clinical Candida albicans and Candida krorostris to itraconazole were screened by drug sensitivity test in vitro. Real-time fluorescence quantitative PCR (FQ-RT-PCR) was used to detect the mRNA expression of multidrug resistant efflux pump gene (CDR1/CDR2/ABC1) in drug-resistant and sensitive strains. Rhodamine 6G was used as tracer to understand the drug efflux of Candida albicans and Candida krorostris. Results the sensitivity rates of Candida albicans and Candida krorostris to fluorocytosine and amphotericin B were both high (80.00g). The resistance rate of Candida albicans to itraconazole was high (70.00g). According to the 螖 Ct value obtained by real-time fluorescence quantitative RT-PCR test, the expression of CDR1,CDR2mRNA in Candida albicans resistant strain was higher than that of sensitive strain (P0.05). However, only one resistant strain of Candida krorostris showed high expression, and there was no significant difference in the expression of ABC1mRNA between sensitive strain and resistant strain. The results of Rhodamine 6G efflux test showed that the efflux of Rhodamine 6G increased with time, and that of drug-resistant strains with high expression of CDR1/CDR2mRNA increased significantly. Conclusion the efflux pump gene CDR1,CDR2 may play a certain role in the production of resistance of Candida albicans, but it does not indicate that the efflux pump gene ABC1 has no effect on the production of resistance of Candida krrostris because the sample size is small. Further research is needed to expand the sample size.
【作者單位】： 山西醫(yī)科大學第二醫(yī)院皮膚科;
【基金】：山西省青年科技研究基金資助項目(2012021035-3) 山西省基礎(chǔ)研究基金資助項目(2012011045-3) 山西省高等學�？萍脊P(guān)基金資助項目(20141106) 山西省衛(wèi)生廳科技攻關(guān)基金資助項目(201301009) 山西醫(yī)科大學科技創(chuàng)新基金資助項目(01201013);山西醫(yī)科大學第二醫(yī)院青年基金資助項目(20110104)
【分類號】：R440

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本文編號：2327670