【摘要】：【目的】本項研究采用SSP和流式細(xì)胞術(shù)方法,研究在初治惡性血液病患者、健康供者及移植后患者表達(dá)供者來源的NK細(xì)胞表面的KIR3DL1表達(dá)水平,并同時從供受者KIR基因型、單倍型、KIR/HLA受配體模式的角度,分析了KIR3DL1的表達(dá),為研究KIR3DL1基因在預(yù)示無關(guān)造血干細(xì)胞移植預(yù)后中的作用提供實驗依據(jù)�！痉椒ā繉�116例接受無關(guān)造血干細(xì)胞移植的患者(其中AML和MDS為60例、ALL40例、CML8例、其他6例)和92例正常供者,以及初診20例白血病患者,采用序列特異性引物聚合酶鏈反應(yīng)(sequence specific primers PCR.SSP)和基因測序(Sequence-base typing,SBT)進(jìn)行KIR和HLA基因分型;采用流式細(xì)胞術(shù)和4種單抗(CD3、CD56、CD159和CD158e)檢測NK細(xì)胞表面抑制性KIR3DL1的表達(dá);并從KIR基因型、單倍型、KIR/HLA受配體模式的角度分析初治患者與正常供者KIR3DL1的表達(dá)水平。同時結(jié)合臨床資料分析移植后免疫耐受組、a GVHD組和復(fù)發(fā)組患者表達(dá)供者異源反應(yīng)性NK細(xì)胞和KIR3DL1的表達(dá)水平。【結(jié)果】1.研究正常供者KIR基因型、單倍體和KIR/HLA受配體模式,及其KIR3DL1的表達(dá)1)92例健康供者中KIR-AA,Bx1,Bx2為常見基因型,頻率分別為46.8%(43/92),18.5%(17/92),10.2(9/92);KIR-A,B1,B2,B3,B4為常見單體型,頻率分別為69%(128/182),11%(20/182),7%(13/182),5%(8/182),1%(2/182)。2)供者KIR3DL1基因識別受者的HLA-BW4配體,在92例供者識別受者HLA-BW4/BW4、HLA-BW4/BW6、HLA-BW6/BW6配體的頻率分別為13.79%、67.81%、18.39%,三者之間的分布有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.0001)。3)單倍型KIR-A/A、KIR-B/x、KIR-B/B的KIR3DL1的中位表達(dá)水平分別為18.77%、13.14%、0.37%,三者之間有統(tǒng)計學(xué)差異,P值分別是0.039、0.0003、0.0003。在單倍型KIR-B/x中同時表達(dá)KIR3DL1/2DL2與無2DL2基因KIR3DL1的表達(dá)水平分別為16.3%和11.2%,兩者的表達(dá)水平無統(tǒng)計學(xué)差異。但KIR3DL1的表達(dá)水平在單倍型KIR-A/A與單倍型KIR-B/x無2DL2基因中相比有統(tǒng)計學(xué)意義(p=0.019)。4)KIR3DL1識別HLA-BW4組(包括配體為HLA-BW4/BW4和BW4/BW6)與KIR3DL1不識別HLA-BW4組(HLA-BW6/BW6)的表達(dá)水平分別是17.61%和10.65%,兩者的表達(dá)水平有統(tǒng)計學(xué)差異(p=0.006)。2.KIR3DL1在無關(guān)供者HLA全相合造血干細(xì)胞移植后的表達(dá)及臨床意義1)在基因型KIR-AA組正常供者和惡性血液病初治患者的KIR3DL1的中位表達(dá)水平為20.39%和9.7%;KIR-Bx組兩者KIR3DL1的中位表達(dá)水平為15.94%和6.8%,有統(tǒng)計學(xué)差異(p=0.038,p=0.023)。2)在免疫耐受組中KIR3DL1在移植后1、2、3個月的表達(dá)水平分別是27.74%、23.56%、26.61%,與正常供者的表達(dá)水平相比均無統(tǒng)計學(xué)差異(p0.05)。KIR3DL1識別HLA-BW4組與HLA-BW4不識別組在移植后1個月的表達(dá)水平分別是21.86%和16.54%(p=0.046);2個月的表達(dá)水平分別是19.51%和16.54%(p=0.27);3個月的表達(dá)水平分別是19.19%和10.86%(p=0.014)。3)供者為KIR-AA基因型移植后復(fù)發(fā)組的KIR3DL1中位表達(dá)水平低于免疫耐受組,在1個月時表達(dá)水平為19.11%,與免疫耐受組相比有統(tǒng)計學(xué)差異(p=0.023),而2、3個月時的表達(dá)水平雖低,分別是19.84%和13.69%,與免疫耐受組相比無統(tǒng)計學(xué)差異。而供者為KIR-Bx基因型復(fù)發(fā)組的KIR3DL1中位表達(dá)水平均低于免疫耐受組,但未顯示統(tǒng)計學(xué)差異。同時當(dāng)免疫耐受組與復(fù)發(fā)組均為KIR3DL1識別HLA-BW4組復(fù)發(fā)組KIR3DL1的表達(dá)水平低于免疫耐受組,但無明顯統(tǒng)計學(xué)差異。4)當(dāng)供者KIR3DL1不識別HLA-BW6/BW6配體時,在a GVHD組1-3個月KIR3DL1的表達(dá)水平高于免疫耐受組,但均無統(tǒng)計學(xué)差異。5)供者為KIR-Bx基因型的OS高于供者為KIR-AA基因型,兩者相比有統(tǒng)計學(xué)差異(p=0.034)。【結(jié)論】除了KIR-BB不表達(dá)KIR3DL1以外,KIR3DL1基因在KIR-AA和KIR-AB中均表達(dá)。KIR3DL1的配體在HLA-BW4/BW6雜合組比例最高,呈偏態(tài)分布。初治惡性血液病患者NK細(xì)胞表面KIR3DL1表達(dá)水平較正常供者明顯降低,移植后復(fù)發(fā)組KIR3DL1的表達(dá)水平低于免疫耐受組。供者為KIR-Bx基因型的OS高于供者為KIR-AA基因型。因此,從KIR基因型、單倍型、KIR/HLA受配體模式的角度進(jìn)行分析,對預(yù)示無關(guān)供者異基因造血干細(xì)胞移植預(yù)后有一定的臨床應(yīng)用價值。
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【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R457.7

【參考文獻(xiàn)】

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1 竇立萍;達(dá)萬明;王暢;康慧媛;高春記;李曉紅;李猛;韓曉萍;趙瑜;靳海杰;于力;;漢族健康人群KIR分布對異基因造血干細(xì)胞移植供者選擇的影響[J];山東醫(yī)藥;2007年32期

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本文編號：2300672