本文選題：精液 + 外泌體��； 參考：《南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)》2016年11期

【摘要】：目的介紹PEG6000富集精液來(lái)源外泌體的提取和鑒定方法,為精液外泌體相關(guān)研究奠定基礎(chǔ)。方法選自南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院檢驗(yàn)中心6名正常志愿者精液,經(jīng)8%PEG6000富集并多步離心結(jié)合超速離心方法獲取提取物,然后采用透射電子顯微鏡觀察其形態(tài),納米顆粒跟蹤分析儀分析其大小,蛋白印跡法檢測(cè)其蛋白組成成分。結(jié)果提取物呈類(lèi)圓形、橢圓形囊泡,質(zhì)膜完整,大小約為30~150 nm,內(nèi)部含有低電子密度物質(zhì),均陽(yáng)性表達(dá)CD63、ALIX、TSG101蛋白,且不含精子細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Calnexin蛋白。結(jié)論經(jīng)過(guò)對(duì)提取物的形態(tài)、大小以及其蛋白成分分析證實(shí)所提取到的物質(zhì)為精液來(lái)源的外泌體,為后續(xù)開(kāi)展精液外泌體臨床及基礎(chǔ)研究提供了方法學(xué)基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective to introduce the method of extraction and identification of exocrine from semen enriched by PEG6000 so as to lay a foundation for the study of semen exocrine. Methods the semen samples from 6 normal volunteers were collected from the Center of Southern Hospital of Southern Medical University. The semen was enriched by 8PEG6000 and centrifuged with ultracentrifugation. The morphology of semen was observed by transmission electron microscope (TEM). The size of nanoparticles was analyzed by tracking analyzer, and the protein components were detected by Western blotting. Results the extracts were round, oval vesicles, and the plasma membrane was intact, the size was about 30 ~ 150nm.There was a low electron density substance in the extract. All of the extracts expressed CD63 + ALIXT TSG101 protein and did not contain Calnexin protein in spermatocyte endoplasmic reticulum (ER). Conclusion the analysis of the morphology, size and protein composition of the extract confirmed that the extracted substance was the exocrine of semen, which provided a methodological basis for further clinical and basic research of semen exocrine.
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院泌尿外科;南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院檢驗(yàn)中心;
【基金】：廣東省自然科學(xué)基金(2015A030310027,2016A030310393) 廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2014A020212204,2013B021800317) 南方醫(yī)科大學(xué)創(chuàng)新強(qiáng)校科技項(xiàng)目(QD2014N005)
【分類(lèi)號(hào)】：R446.19

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本文編號(hào)：2038657