本文選題：去乙酰化 + 虎杖苷�。� 參考：《南方醫(yī)科大學》2015年博士論文

【摘要】：急性腎損傷(acute kidney injury,AKI)是住院病人常見的并發(fā)癥之一。一旦發(fā)生AKI,患者死亡率和病死率均明顯增加,缺血是引起急性腎功能損傷常見原因。有報道稱AKI之后,盡管部分患者當時成功存活下來但是腎臟功能出現了不可逆的損傷甚至慢性腎功能不全,后續(xù)生存率降低。據統(tǒng)計,急性腎臟衰竭后患者病死率高達40-60%。AKI的特征是腎小球濾過率急劇下降。人們逐漸清楚地認識到,慢性腎臟疾病基礎之上的AKI是推動終末期腎病進程的一個重要因素。以往的研究表明,細胞凋亡、氧化劑和鐵離子介導的細胞損傷,內皮細胞的變化、再生和修復,炎癥反應等在AKI的發(fā)病機制中扮演中關鍵的作用。然而,越來越多的研究結果表明,線粒體功能障礙是AKI的主要原因。失血性休克作為一種病理狀態(tài)的顯著的特點之一是全身和局部組織灌注減少,液體復蘇是重癥失血性休克患者的重要治療措施。多器官功能衰竭作為失血性休克復蘇后的常見不良預后,腎臟是主要的受累的器官之一。然而,重癥失血性休克再灌注(hemorrhagic shock/reperfusion,HS/R)后腎臟細胞是否也存在線粒體功能障礙尚不清楚。已經查明,AKI線粒體功能障礙發(fā)生機制主要和缺血缺氧、氧化應激、微循環(huán)障礙、線粒體動力學破壞和線粒體介導的細胞凋亡有關。p53作為腫瘤抑制因子它具有強大的調節(jié)細胞凋亡的作用。正常情況下,p53蛋白通過MDM2介導的泛素化和降解途徑維持在較低水平。然而,當細胞暴露于包括基因毒性應激在內的應激環(huán)境時,p53蛋白可迅速蓄積并作用于下游靶點發(fā)揮生物學效應。主要表現為p53通過轉錄依賴性和轉錄非依賴性方式調控凋亡途徑。p53轉錄依賴性的細胞凋亡和凋亡相關靶基因包括Bax、NOXA和PUMA的表達有關。p53轉錄非依賴性的細胞凋亡通過p53在線粒體和抗凋亡Bcl-2等之間的直接相互作用后促進Bax釋放和線粒體外膜通透性增加,細胞色素C從線粒體膜間隙釋放啟動凋亡。p53的數量、穩(wěn)定性和活性部分受到翻譯后的多種修飾調節(jié),包括磷酸化、泛素化和乙酰化等。已有大量文獻報道,限制熱量攝入可以延緩衰老、延年益壽,但由于應用中存在很多不足,臨床危重病人難以在短時間治療起效。而促進染色質沉默和轉錄抑制的sirtuin家族是一種模擬熱量限制的替代選擇,它在腎臟疾病的發(fā)病中起著重要的作用。該家族中已知沉默信息調節(jié)因子2相關酶1(Sirtuin 1,SIRT1)是一種煙酰胺腺嗓呤二核苷酸(Nicotinamide adenine dinucleotide,NAD+)依賴的蛋白去乙酰化酶,它是哺乳動物Sir2的7種同源染色體之一,總序列最長,被研究得最為廣泛。SIRT1最初被發(fā)現能夠調節(jié)長壽、凋亡和DNA修復。SIRT1不僅去乙酰組蛋白H1、H3和H4,而且也對其他許多非組蛋白包括p53、FOXO、Ku70、P300、Rb、E2F1、NF-κB、p73和PGC-1α等產生去乙酰化作用。由于作用于上述重要的蛋白,SIRT1參與調控正常和異常細胞的多種生命進程,如應激反應、腫瘤代謝、衰老等。p53基因是第一個被發(fā)現的SIRT1去乙酰化非組蛋白靶點。即使是在組蛋白去乙酰化酶(Histone deacetyltransferase,HDAC)抑制劑曲古抑菌素 A(trichostatin A,TSA)作用的條件下,細胞裂解液中的乙�；痯53也極不穩(wěn)定。而蛋白去乙�；傅拇嬖诳赡苁莗53乙酰化不穩(wěn)定的原因,SIRT1可能是通過去乙�；绞浇档蚿53乙�；�,影響p53的線粒體移位和線粒體凋亡途徑。后續(xù)有研究證實盡管在常用的HDAC抑制劑TSA存在的條件下,SIRT1的去乙酰化酶活性仍不能被有效抑制。進一步的研究證實p53的確是SIRT1的作用靶點,即SIRT1通過去乙酰化負性調節(jié)p53活性,該現象也被Vaziri和Langley等分別加以驗證。近年來,白藜蘆醇作為SIRT1的激活劑受到了廣泛的報道,它廣泛存在于紅葡萄皮和紅葡萄酒,改善線粒體功能和脂質水平、促進和維持PGC-1α表達,最終維持了足細胞的完整性。有趣的是,白藜蘆醇被首先證實是SIRT1的激動劑且已經被證實能夠減輕腎臟缺血再灌注損傷。此外,白藜蘆醇還被證實能夠通過SIRT1的去乙�；痯53途徑減少順鉑誘發(fā)的小鼠近端小管上皮細胞損傷和多柔比星誘發(fā)的心肌細胞凋亡。除了白藜蘆醇,其他新的SIRT1激動劑也有報道。由于輔酶因子NAD+是SIRT1關鍵信號分子。食物中添加NAD+前體煙酰胺單核苷酸或核苷能夠增強氧化代謝。因此,sirtuin家族成員和他們的活化劑可能是有前途的治療靶點。虎杖苷(Polydatin,PD),又名白藜蘆醇,虎杖晶4號。它是從中國傳統(tǒng)中藥虎杖的根莖中提取的有效活性成分,化學結構已確定為3,4,5-三羥基二苯乙烯-3-β-D-葡萄糖苷,是單晶體藥物。PD經過南方醫(yī)科大學(原第一軍醫(yī)大學)病理生理教研室趙克森教授等經過30年的研究,已證實在多個疾病模型中有確切效果,多年來應用無明顯毒副作用。通過趙克森教授和海王藥業(yè)有限責任公司的合作開發(fā),PD已取得了臨床試驗的正式批件(批件號2006L00301),成為國家為數不多的I類新藥,目前正在開展臨床失血性休克和燒傷Ⅱb試驗,進展順利。多項研究表明,PD對多種原因引起的實驗動物休克有顯著的療效。我們實驗組既往工作通過大鼠失血性和燒傷休克等模型證實PD能夠擴張微血管,改善微循環(huán),提高心輸出,降低全身外周阻力,增強心功能及脈壓,改變血液流變學特征,抑制白細胞粘附等。其次,PD能改善缺血再灌注模型多臟器的損傷。我室宋瑞、王興民等均證實PD有保護重癥休克血管平滑肌和腦神經元線粒體損傷的效應。張利萍等通過大鼠實驗證實PD治療心肌缺血/再灌注損傷的作用�？偨Y其機制與下列原因有關:1、PD通過抑制線粒體KATP以及線粒體通透性轉變孔(mitochondrial permeability transition,mPTP)開放,保護線粒體,發(fā)揮心臟保護作用;2、增加Bcl-2蛋白表達,減少Bax蛋白表達,減少缺血/再灌注誘導的大鼠心肌細胞凋亡;3、使鈣離子內流減少和開放KATP增加鉀離子外流,產生明顯的抗心肌缺血/再灌注心律失常作用;4、抑制血小板聚集,降低白細胞對血管內皮的粘附性,改善微循環(huán),抑制脂質過氧化。也有學者證實PD通過直接抗氧化應激等作用保護缺血再灌注后的心肌受損。在孕兔失血性休克模型中,PD可能通過誘導肺組織HSP-70表達,抑制肺組織NF-κB的激活,減少了血清炎癥因子TNF-α等的釋放以及肺組織ICAM-1粘附分子的生成,最終減輕了產兔失血性復休克后的肺損傷。最新文獻報導PD還能預防膿毒癥后肺損傷。既往報道顯示,PD能夠減少線粒體第三復合物(complex Ⅲ)氧自由基形成,具有直接保護線粒體的作用�；谏鲜鑫墨I回顧,本研究擬解決如下幾個問題:1、HS/R后大鼠腎臟細胞是否存在線粒體損傷;2、HS/R后大鼠腎臟細胞線粒體損傷是否和SIRT1-p53有關;3、PD作用能否上調SIRT1的表達和(或者)活性,它是否是PD線粒體保護的分子機制。根據上述問題,我們將實驗分為如下三個部分:1.建立HS/R的動物模型,檢測腎臟細胞是否發(fā)生了線粒體損傷,哪一種細胞尤為明顯;分離靶細胞,集中對受損的細胞線粒體功能進行評估;探討SIRT1水平和活性,乙�；痯53水平和線粒體損傷之間的關系。2.探討PD是否具有SIRT1的激動作用,PD對于SIRT1-p53信號通路的影響和保護細胞線粒體的機制;3.構建人腎細胞株(human kidney2,HK-2)缺氧復氧模型,進一步驗證SIRT1-p53信號通路在缺氧復氧模型中的作用以及PD對于SIRT1-p53信號通路的激動作用。第一部分失血性休克再灌注后大鼠腎小管上皮線粒體損傷1、HS/R后大鼠腎小管上皮細胞存在線粒體損傷首先我們評估了重癥失血性休克再灌注后是否存在線粒體損傷,通過透射電鏡(transmission electron microscope,TEM)檢查休克再灌注后腎臟細胞的線粒體超微結構。我們發(fā)現腎小管上皮細胞線粒體損傷尤為顯著,表現為正常對照組(Control)大鼠的腎小管上皮細胞(renal tubular epithelial cells,RTECs)線粒體形態(tài)正常,線粒體膜和嵴完整。休克后(vehicle組)RTECs線粒體形態(tài)不規(guī)則,腫脹明顯,嵴部分破壞或難以辨認。因此,我們確定了腎小管上皮細胞的線粒體作為后續(xù)研究的對象。通過分離RTECs并采用我們既往報道的方法測定了 RTECs線粒體通透性轉變孔(mPTP),線粒體跨膜電位(ΔΨm),細胞內ATP水平和溶酶體穩(wěn)定性。共聚焦顯微鏡下Control組中可見明亮黃綠色的鈣黃綠素熒光,而在HS/R組(vehicle組)熒光被部分淬滅。為進一度對通透性轉變孔的開放程度進行定量,我們采用了流式細胞技術對calcein-AM熒光進行了分析。和control組比較,calcein-AM熒光強度在重癥休克再灌注后(vehicle組)下降至34.1±2.1%(t=15.654,P=0.000)。采用熒光探針JC-1的單體JC-1/聚合體比率這一指標反映線粒體膜電位(ΔΨm)。結果發(fā)現重癥休克后,單體JC-1/聚合體比率顯著增加(t=-10.495,P=0.002)。采用熒光素熒光素酶法檢測細胞內ATP水平,結果發(fā)現vehicle組ATP水平較正常對照組下降了 34±7.3%(t=10.939,P=0.000)。我們既往研究證實線粒體和溶酶體是密切相關,線粒體的受損可能加重溶酶體的損傷,反過來溶酶體的破壞可能會進一步惡化線粒體損傷。也可以認為,亞細胞器溶酶體損傷是線粒體損傷的一個間接的指標。介于溶酶體和線粒體的關系,我們也探討了失血性休克RTECs溶酶體的影響。我們發(fā)現HS/R后,vehicle組出現了紅色顯著減弱,甚至典型的"蒼白細胞"(t=7.155,P=0.000)。2、HS/R后大鼠腎小管上皮細胞線粒體促凋亡蛋白表達增加為了探討HS/R后RTECs線粒體損傷的機制,我們采用免疫組化技術對線粒體凋亡相關蛋白的測定。結果發(fā)現HS/R之后腎臟組織較control促凋亡蛋白Bax表達顯著增加而抑凋亡蛋白Bcl-2減少。為了進一步定量凋亡相關蛋白Bax和Bcl-2,我們采用了免疫印跡技術測定這腎臟皮質的兩種蛋白的相對含量并提取了其胞質和線粒體蛋白測定細胞色素C含量。和免疫組化結果的趨勢一致,HS/R后vehicle組的Bax含量較control組增加了30±14%(t=-3.682,P=0.006)。與之對應的是Bcl-2的含量,HS/R后vehicle組Bcl-2較control組減少了29±9.8%(t=4.692,P=0.002)。細胞色素C的測定HS/R后胞質/線粒體比率較control組增加了 115±32.2%(t=-6.817,P=0.000)。上述結果表明線粒體損傷后,線粒體的凋亡相關蛋白發(fā)生了顯著的變化。3、HS/R后大鼠腎皮質p53的乙�；皆黾用庖哂∮浗Y果發(fā)現,HS/R后vehicle組大鼠腎臟組織的p53蛋白較control組顯著增加;不僅如此,HS/R后vehicle組Acetyl-p53也較control組增加(t=-3.063,P=0.039),這些結果提示p53可能參與了 HS/R線粒體凋亡調節(jié)。4、HS/R后大鼠腎臟皮質的SIRT1蛋白和活性減少同正常對照組(control組)相比,休克大鼠腎臟皮質中SIRT1的蛋白表達和活性分別下降了48.6±5.3%(t=8.859,P=0.002)和58.2±8.9%(t=8.329,P=0.001)。第二部分虎杖苷通過激活SIRT1減少失血性休克再灌注誘導的大鼠腎小管上皮細胞線粒體損傷1、PD和Ex527對于正常大鼠腎臟組織的SIRT1活性的影響正常大鼠7天給藥后,各組大鼠腎臟組織SIRT1蛋白表達和活性的差異均有統(tǒng)計學意義(SIRT1 蛋白:F=30.233,P=0.000;SIRT1 活性:F=56.636,P=0.000)。其中PD組腎臟組織SIRT1蛋白表達和活性分別較溶劑對照組(control組)增加了 25.3±11.8%和30.5±13.6%;Ex527組則出現了相反的現象,該組SIRT1蛋白表達和活性分別較control降低了 30.5± 13.6%和24.3±5.4%。2、PD對于HS/R后腎臟上皮細胞SIRT1的激動作用休克給藥后各組SIRT1蛋白表達和活性測定差異均具有統(tǒng)計學意義(SIRT1蛋白:F=22.236,P=0.002;SIRT1 活性:F=11.006,P=0.002)。PD 給藥后 SIRT1蛋白表達和活性分別較vehicle組增加了 60.5±10.5%和65.1±27.9%;當Ex527添加到PD/Ex527組混合給藥后,該組的SIRT1活性和蛋白表達較PD組分別下降了 33.8±14.1%和 30.1±8.8%。3、PD對于HS/R后腎臟上皮細胞p53的去乙酰化作用免疫印記測定發(fā)現盡管休克再灌注后各組p53蛋白差別無統(tǒng)計學差異(F=0.836,P=0.478,圖7D,表12)。然而,各組Acetyl-p53差異有統(tǒng)計學意義(F=20.778,P=0.002)。PD給藥后較 vehicle 組的 Acetyl-p53 下降了 40.8±7.9%。然而,在Ex527給藥后,下降的Acetyl-p53再度升高甚至超過vehicle組的水平。這些結果說明PD可以有效地減少p53蛋白的乙�；�,且PD對于p53具有去乙酰化的作用。4、PD抑制線粒體凋亡信號與vehicle組比較,PD給藥能夠一定程度上減少Bax表達量而增加Bcl-2的表達。為了進一步定量PD對于凋亡相關蛋白的影響,我們采用了免疫印跡技術測定腎臟皮質的兩種蛋白的相對含量并提取了其胞質和線粒體蛋白用于細胞色素C的測定。結果發(fā)現上述指標各組間差異均有統(tǒng)計學意義(Bax:F=7.423,P=0.008;Bcl-2:F=6.270,P=0.014;細胞色素C:F=14.109,P=0.001)。和免疫組化結果的趨勢一致,HS/R后PD處理后Bax表達量較vehicle組顯著下降。與之對應的是Bcl-2的含量,PD治療后Bcl-2恢復接近control組。PD治療后胞質/線粒體比率較vehicle組顯著下降。而Ex527阻滯了 PD對于線粒體對于線粒體凋亡蛋白的作用,表現為Ex527也促進了細胞的線粒體凋亡蛋白Bax和細胞質中細胞色素C表達,抑制了抗凋亡蛋白Bcl-2的表達等。這些結果均提示PD可能是通過激動SIRT1信號途徑發(fā)揮線粒體保護作用的。5、PD減少HS/R后的腎小管上皮細胞的線粒體損傷通過TEM觀察,我們發(fā)現PD組較vehicle組腎小管上皮細胞線粒體腫脹減輕,嵴形態(tài)可見;此外所測定的各組鈣黃綠素熒光、JC-1單體/聚合體、ATP水平和AO-red差異均有統(tǒng)計學差異(鈣黃綠素熒光:F=115.480,P=0.000;JC-1:F=11.078,P=0.002;ATP:F=5.406,P=0.013;AO-red:F=11.158,P=0.002)。流式細胞測定結果提示,與vehicle組相比,PD抑制了 RTECs通透性轉變孔的開放,表現為PD處理后有鈣黃綠素熒光強度恢復至control組的81.1±5.6%,為vehicle組的238.2±16.3%;PD治療后JC-1單體/聚合體比率較vehicle組有部分恢復,說明PD能夠有效穩(wěn)定HS/R后RTECs細胞的跨膜電位。此外,PD給藥較vehicle組ATP水平顯著增加。發(fā)現HS/R后,而PD治療較vehicle組溶酶體熒光探針AO-red的強度增加,說明PD治療能夠有效恢復RTECs溶酶體的穩(wěn)定性。然而,當SIRT1的抑制Ex527加入時,PD對于線粒體的保護作用都不同程序的減少了,表現為線粒體腫脹顯著,嵴消失;鈣黃綠素熒光減弱,JC-1單體聚合體比率增加,ATP水平下降和A0熒光強度降低。第三部分PD對缺氧復氧HK-2細胞的線粒體的保護作用1、PD和Ex527對SIRT1蛋白和活性的影響為了進一步明確PD對于SIRT1的作用,我們引入了 HK-2細胞。首先探討了PD、Ex527和PFT-α(一種p53的特異性抑制劑)對于正常HK-2細胞的SIRT1的影響。結果發(fā)現,連續(xù)給藥7天后,各組HK-2的SIRT1蛋白和活性的差異均具有統(tǒng)計學意義(SIRT1 蛋白:F=26.202,P=0.000;SIRT1 活性:F=36.651,P=0.000)。PD組SIRT1蛋白和活性分別較正常對照組增加了 34.4±9.8%和60.0±15.0%;而Ex527組則出現了相反的趨勢,該組SIRT1含量和活性均較PD組下降了 52.9±8.6%和39.7±6.6%,組間差別均有統(tǒng)計學意義。但PFT-α處理組SIRT1蛋白和活性均和control組無顯著差異(P=NS)。2、PD激活SIRT1-p53信號通路為了從細胞實驗證實PD的具體作用機制,我們復制了缺氧復氧(hypoxia/reoxygen,H/R)細胞模型,該模型具有和HS/R類似的病理生理機制。首先,我們通過測定PD作用時間和劑量效應曲線確定了 48小時的缺氧時間和50 μM的PD給藥濃度。為了進一步證實PD的作用和SIRTl-p53信號通路途徑的關系,我們建立PD/Ex527 組和 PD/Ex527/PFT-α 組(pifithrin-α,PFT-α,一種 p53 的可逆抑制劑)。首先我們采用免疫印跡、細胞免疫熒光方法分別測定了各組細胞中SIRT1蛋白和活性表達,結果發(fā)現差異具有統(tǒng)計學意義(SIRT1蛋白免疫印跡:F=23.553,P=0.002;SIRT1 活性:F=34.362,P=0.000)。和我們預料的一致,H/R 后 vehicle組SIRT1蛋白表達、SIRT1免疫熒光強度和活性均較control組顯著下降,然而PD給藥后上述值分別增加至vehicle組的2.1±0.5倍、1.7±0.3倍和2.2±0.6倍。有意思的是,PD/Ex527組中SIRT1的蛋白表達和活性較PD組再度下降。該結果提示Ex527能夠有效阻滯PD對于SIRT1的激動作用。而在PD/Ex527/PFT-α組,盡管有PFT-α加入,較PD/Ex527組SIRT1的蛋白表達和活性仍未有顯著增加。在確定了 PD對于SIRT1激動的基礎上,我們就SIRT1的下游信號p53進行了分析。結果發(fā)現,H/R后各組p53蛋白含量、線粒體移位和乙�；讲町惥薪y(tǒng)計學意義(p53蛋白:F=53.134,P=0.000;p53線粒體移位:F=108.571,P=0.000;Acetyl-p53 免疫印跡:F=55.264,P=0.000;Acetyl-p53 流式:F=36.450,P=0.000)。其中vehicle組測定的上述指標均較control組顯著增加。與vehicle組相比,盡管PD組p53的蛋白總表達量未見顯著變化,但p53線粒體移位減少并且乙�；痯53水平降低。當Ex527加入后,PD/Ex527組線粒體的p53線粒體移位和乙酰化水平均較PD組顯著增加,且接近vehicle組水平。值得注意的是,在PD/Ex527/PFT-α組,增加的p53線粒體移位較PD/Ex527組再度降低但是乙酰化水平無顯著變化。上述結果提示PD的作用和SIRT1激活有關,一旦SIRT1被阻滯之后,Acetyl-p53水平增加。盡管PFT-α可以抑制PD/Ex527/PFT-α組p53的表達,但Acetyl-p53水平未顯著降低。3、PD減輕H/R誘發(fā)的HK-2細胞的凋亡H/R之后,各組凋亡細胞百分比差異有統(tǒng)計學意義(F=149.025,P=0.000)。其中vehicle組凋亡細胞百分比顯著增加;PD給藥則有效地抑制了凋亡(9.8±0.4%vs3.5±0.4%);與PD組相比,Ex527/PD組凋亡細胞的比率再度增加;當PFT-α加入后,PD/Ex527/PFT-α組較Ex527/PD組凋亡細胞顯著減少且和PD組相當。接下來,我們就凋亡相關蛋白的表達量進行測定,我們發(fā)現H/R后Bax、Bcl-2和細胞色素C胞漿/線粒體比均有統(tǒng)計學差異(Bax:F=67.627,P=0.000;Bcl-2:F=40.551,P=0.000;細胞色素 C:F=134.290,P=0.000)。其中 vehicle 組較 control組促凋亡蛋白Bax、細胞色素C胞漿/線粒體比率顯著增加而抑凋亡蛋白Bcl-2顯著減少;與vehicle組相比,PD給藥后促凋亡蛋白Bax表達顯著減少,抗凋亡蛋白Bcl-2表達增加,細胞色素C胞漿/線粒體比下降(P=0.000);當Ex527加入后,Ex527/PD組Bax表達和細胞色素C胞漿/線粒體比較PD組再度增加,而Bcl-2蛋白顯著下降;PD/Ex527/PFT-α組較Ex527/PD組促凋亡蛋白增加而抑凋亡蛋白減少。4、PD減輕缺氧復氧誘發(fā)的人近端小管上皮細胞線粒體損傷H/R之后各組Cailcein-AM、JC-1比率、ATP水平和AO-red的差異均有統(tǒng)計學意義(Calcein-AM:F=87.36,P=0.000;JC-1:F=268.800,P=0.000;ATP:F=76.620,P=0.000;AO-red:F=152.809,P=0.000)。vehicle 組的 Cailcein-AM 熒光較control下降了 59.7±2.4%,PD給藥后該熒光強度恢復至control組的66.1±4.2%;H/R后vehicle組的JC-1單體/聚合體比例增加至control組的23.5±1.8倍而ATP水平降至control組的34±5.9%,PD給藥后JC-1單體/聚合體比例比值降至2.5±0.5倍而ATP增加至control組的80±6.5%;溶酶體穩(wěn)定性測定方面,H/R之后vehicle組的AO-red熒光強度降至control組的21.1±2.5%,但PD處理后該項值提高到56.3±4.8%。這些結果均提示PD能夠改善H/R之后線粒體的損傷。然而,當Ex527加入到PD/Ex527組之后,上述PD對于線粒體的保護作用均被不同程度減弱且組間差別均有統(tǒng)計學意義,這些結果說明PD很可能是通過激活SIRT1而發(fā)揮作用的。而PD/Ex527/PFT-α組較PD/Ex527組線粒體功能功能顯著恢復。提示盡管PD對SIRT1的作用被阻滯了,但是PFT-α通過抑制p53減少線粒體介導的凋亡。結論1、重癥休克再灌注后腎小管上皮細胞存在線粒體損傷,SIRT1蛋白表達和活性下降以及p53乙酰化水平增加可能是腎小管上皮細胞線粒體損傷的機制。即重癥休克再灌注后SIRT1的蛋白水平并活性降低,其去乙酰化活性下降,p53乙�；胶途�粒體移位增加,促進了線粒體凋亡促凋亡蛋白增加和抗凋亡蛋白減少,線粒體外膜通透性增加,細胞色素C釋放到胞質,啟動細胞凋亡;2、PD具有SIRT1的激動作用,它可能是減輕重癥休克再灌注后腎小管上皮細胞細胞線粒體損傷的機制之一:PD通過上調SIRT1,減少了乙�；痯53水平,抑制p53轉錄非依賴性線粒體凋亡途徑;3、PD通過上調SIRT1-p53信號通路減少了H/R誘發(fā)的HK-2細胞凋亡。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：南方醫(yī)科大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R459.7;R692.5

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8 鐘霞麗;鐘才高;;輔酶Q在外源物所致細胞線粒體損傷中的作用研究進展[J];中國藥理學與毒理學雜志;2014年02期

9 駱助林;權毅;潘顯明;屈波;;外科缺血再灌注過程中的線粒體損傷[J];西南軍醫(yī);2008年04期

10 劉林;成揚;胡義揚;;線粒體損傷在脂肪性肝病發(fā)生發(fā)展中的機制研究進展[J];中西醫(yī)結合肝病雜志;2014年03期

相關會議論文 前5條

1 趙曉紅;畢婷婷;孫健;;線粒體損傷機制及測定方法[A];2014線粒體毒性與基于毒性通路的安全性評價新策略學術研討會暨中國毒理學會毒理學替代法與轉化毒理學專業(yè)委員會成立大會論文集[C];2014年

2 張如意;李林;張?zhí)m;;何首烏TSG對線粒體損傷致能量代謝障礙細胞的藥理作用及機制探討[A];2009全國抗衰老與老年癡呆學術會議論文匯編[C];2009年

3 趙昱;李陳莉;尹青;陳煒;王慧娟;;NO在高Ca~(2+)所致線粒體損傷中的作用[A];2007年中國解剖學會第十屆全國組織學與胚胎學青年學術研討會論文摘要匯編[C];2007年

4 田京偉;傅風華;;羥基紅花黃色素A對腦缺血所致大鼠腦線粒體損傷的保護作用[A];第八屆全國生化藥理學術討論會暨第七屆Servier獎頒獎大會會議摘要集[C];2003年

5 李興泰;陳瑞;;黃芩苷對活性氧引起鼠腦線粒體損傷的保護作用[A];全國中藥研究與開發(fā)學術研討會論文摘要集[C];2001年

相關博士學位論文 前3條

1 張國偉;DBP致男（雄）性生殖毒性中內質網應激及線粒體損傷的作用機制研究[D];第三軍醫(yī)大學;2016年

2 曾振華;SIRT1-p53通路在虎杖苷減輕失血性休克腎臟線粒體損傷和細胞凋亡中的作用[D];南方醫(yī)科大學;2015年

3 羅磊;“益腎調督”法對AD模型大鼠神經元軸突線粒體損傷的影響及針灸作用機制研究[D];湖北中醫(yī)藥大學;2014年

相關碩士學位論文 前6條

1 張曉菲;淫羊藿苷預防阿爾茨海默病線粒體損傷的保護作用研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2015年

2 宋東旭;線粒體損傷對囊腫襯里上皮細胞初級纖毛結構與功能的影響[D];第二軍醫(yī)大學;2015年

3 李莉;鈣離子介導線粒體損傷在熱打擊誘導內皮細胞凋亡中的作用[D];南方醫(yī)科大學;2015年

4 董小銣;HUMMR在低氧誘導神經元線粒體損傷中的作用研究[D];第四軍醫(yī)大學;2015年

5 李苗苗;低劑量輻射對多柔比星所致小鼠心肌細胞線粒體損傷的保護作用及機制研究[D];吉林大學;2016年

6 潘小海;鎘致線粒體損傷及干預研究[D];復旦大學;2010年

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本文編號：1997790